File size: 24,700 Bytes
c6f6063
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
100
101
102
103
104
105
106
107
108
109
110
111
112
113
114
115
116
117
118
119
120
121
122
123
124
125
126
127
128
129
130
131
132
133
134
135
136
137
138
139
140
141
142
143
144
145
146
147
148
149
150
151
152
153
154
155
156
157
158
159
160
161
162
163
164
165
166
167
168
169
170
171
172
173
174
175
176
177
178
179
180
181
182
183
184
185
186
187
188
189
190
191
192
193
194
195
196
197
198
199
200
201
202
203
204
205
206
207
208
209
210
211
212
213
214
215
216
217
218
219
220
221
222
223
224
225
226
227
228
229
230
231
232
233
234
235
236
237
238
239
240
241
242
243
244
245
246
247
248
249
250
251
252
253
254
255
256
257
258
259
260
261
262
263
264
265
266
267
268
269
270
271
272
273
274
275
276
277
278
279
280
281
282
283
284
285
286
287
288
289
290
291
292
293
294
295
296
297
298
299
300
301
302
303
304
305
306
307
308
309
310
311
312
313
314
315
316
317
318
319
320
321
322
323
324
325
326
327
328
329
330
331
332
333
334
335
336
337
338
339
340
341
342
343
344
345
346
347
348
349
350
351
352
353
354
355
356
357
358
359
360
361
362
363
364
365
366
367
368
369
370
371
372
373
374
375
376
377
378
379
380
381
382
383
384
385
386
387
388
389
390
391
392
393
394
395
396
397
398
399
400
401
402
403
404
405
406
407
408
409
410
411
412
413
414
415
416
417
418
419
420
421
422
423
424
425
426
427
428
429
430
431
432
433
434
435
436
437
438
439
440
441
442
443
444
445
446
447
448
449
450
451
452
453
454
455
456
457
458
459
460
461
462
463
464
465
466
467
468
469
470
471
472
473
474
475
476
477
478
479
480
481
482
483
484
485
486
487
488
489
490
491
492
493
494
495
496
497
498
499
500
501
502
503
504
505
506
507
508
509
510
511
512
513
514
515
516
517
518
519
520
521
522
523
524
525
526
527
528
529
530
531
532
533
534
535
536
537
538
539
540
541
542
543
544
545
546
547
548
549
550
551
552
553
554
555
556
557
558
559
560
561
562
563
564
565
566
567
568
569
570
571
572
573
574
575
576
577
578
579
580
581
582
583
584
585
586
587
588
589
590
591
592
593
594
595
596
597
598
599
600
601
602
603
604
605
606
607
608
609
610
611
612
613
614
615
616
617
618
619
620
621
622
623
624
625
626
627
628
629
630
631
632
633
634
635
636
637
638
639
640
641
642
643
644
645
646
647
648
649
650
651
652
653
654
655
656
657
658
659
660
661
662
663
664
665
666
667
668
669
670
671
672
673
674
675
676
677
678
679
680
681
682
683
684
685
686
687
688
689
690
691
692
693
694
695
696
697
698
699
700
701
702
703
704
705
706
707
708
709
710
711
712
713
714
715
716
717
718
719
720
721
722
723
724
725
726
727
728
729
730
731
732
733
734
735
736
737
738
739
740
741
742
743
744
745
746
747
748
749
750
751
752
753
754
755
756
757
758
759
760
761
762
763
764
765
766
767
768
769
770
771
772
773
774
775
776
777
778
779
780
781
782
783
784
785
786
787
788
789
790
791
792
793
794
795
796
797
798
799
800
801
802
803
804
805
806
807
808
809
810
811
812
813
814
815
816
817
818
819
820
821
822
823
824
825
826
827
828
829
830
831
832
833
834
835
836
837
838
839
840
841
842
843
844
845
846
847
848
849
850
851
852
853
854
855
856
857
858
859
860
861
862
863
864
1
00:00:02,800 --> 00:00:05,820
نبدأ اليوم إن شاء الله بالمعمل الرابع بعنوان

2
00:00:05,820 --> 00:00:10,760
Arabic Colonic Count بنرمز له ACC أو له مصطلح 

3
00:00:10,760 --> 00:00:14,360
ثاني Total Viable Count لاحظوا أنا عمالي بأحكي

4
00:00:14,360 --> 00:00:19,380
كلمة Count معناها فيها عدّ الشغلة، فيها عدّ معناها

5
00:00:19,380 --> 00:00:21,640
هي من ضمن الـ food analysis اللي هي الـ quantitative

6
00:00:21,640 --> 00:00:26,350
مش qualitative، Total يعني عدّ جميع أنواع البكتيريا 

7
00:00:26,350 --> 00:00:30,210
بغض النظر عن نوعها، طيب بدي أعدّ الكل يعني الـ media

8
00:00:30,210 --> 00:00:33,590
مش هيكون فيها أي inhibitors، فهي الـ media بيسميها

9
00:00:33,590 --> 00:00:39,510
general media، مثال عليها الـ nutrient agar، viable

10
00:00:39,510 --> 00:00:43,870
يعني بكتيريا حية، بكتيريا حية لأن هذه هي اللي هتكون

11
00:00:43,870 --> 00:00:47,610
عندها القدرة إنها تلمّ و تتكثر أو تتضاعف في الـ size

12
00:00:47,610 --> 00:00:50,790
وسيلها multiplication، وتظهر بالنهاية على شكل 

13
00:00:50,790 --> 00:00:57,740
كولونية، نبدأ بملخص للمعمل وبعدين هنمشي على الـ

14
00:00:57,740 --> 00:01:02,340
سلايدات، حكينا إنه في عند الـ sample line خط إنتاج 

15
00:01:02,340 --> 00:01:07,680
لكل خط إنتاج له lot، والـ lot له lot number، قلنا من

16
00:01:07,680 --> 00:01:10,880
العجينة أو من الـ lot بأخد حاجة اسمها الـ sample

17
00:01:10,880 --> 00:01:15,320
unit، الـ sample unit على الأقل بتكون 100 جرام أو 

18
00:01:15,320 --> 00:01:18,500
مل، ليش 100 على الأقل؟ هيتعتبر statistical

19
00:01:18,500 --> 00:01:24,000
significant، من الـ Sample Unit بأخد منه مقدار من 25

20
00:01:24,000 --> 00:01:28,660
لـ 50 جرام أو مل، سميناها الـ Analytical Unit وهي 

21
00:01:28,660 --> 00:01:32,440
هي اللي بشتر عليها في المعمل، اليوم بدنا نعدّي

22
00:01:32,440 --> 00:01:38,470
البكتيريا الموجودة في أي عينة، ممكن نصل لـ، بحكي لي

23
00:01:38,470 --> 00:01:42,950
بمجرد ما تجيني العينة، يستحسن نعملها dilution، نعمل

24
00:01:42,950 --> 00:01:47,370
تخفيف، ليش بدّي أعمل تخفيف للعينة؟ مش إنه أخد العين

25
00:01:47,370 --> 00:01:52,190
مباشرة وأزرعها، لأنه ممكن لو أخدت مباشرة أو زرعتها

26
00:01:52,190 --> 00:01:56,190
هيكون عندي عدد الكولونيات كثير كبير عندي في الطبق

27
00:01:56,190 --> 00:02:01,150
الصعب أنه أنا أعدّه، فإيه الجواب؟ to dilute bacteria

28
00:02:01,150 --> 00:02:04,170
in the sample، مشان أخفف البكتيريا في العينات هي 

29
00:02:04,170 --> 00:02:08,170
واحدة الشغلة الثانية to avoid saying لحتى ما يطلع

30
00:02:08,170 --> 00:02:14,790
معي النتيجة to numerous to count TNTC لو طلع العدد

31
00:02:14,790 --> 00:02:18,950
صعب جداً أنه أنا أعدّ أكثر من 250 كولوني في الطبق

32
00:02:18,950 --> 00:02:24,810
بسميها to numerous to count، طيب أنا قلت بدي أخفف 

33
00:02:24,810 --> 00:02:28,950
العينة بمجرد ما تصلني بدي أخففها، معناته بحتاج إلى

34
00:02:28,950 --> 00:02:34,090
diluent، شغلات بخفف فيها، عندي ثلاث أنواع لـ diluent 

35
00:02:34,090 --> 00:02:37,510
أول شيء الـ normal saline وهذا بدنا نستخدمه بشكل

36
00:02:37,510 --> 00:02:41,970
كبير في ما عملنا، normal saline هو ملح طعام مع 

37
00:02:41,970 --> 00:02:46,720
distilled water، هي هيك بس محلول ملح اسمه، التركيز

38
00:02:46,720 --> 00:02:52,260
اللي بيلزمني 85 من 100%، لاحظوا أنه هذا التركيز ما

39
00:02:52,260 --> 00:02:56,280
بعمل shrinking أو swallowing للبكتيريا، ما بيخليها

40
00:02:56,280 --> 00:03:01,600
تتقلص أو أنها تنتفخ، كيف بدي أحضر 85 من 100% normal 

41
00:03:01,600 --> 00:03:09,420
saline، على الميزان بأوزن 85 من 100 جرام NaCl بحط

42
00:03:09,420 --> 00:03:15,260
عليها 100 مل distilled water، طيب فيما لو كنت محتاجة إني

43
00:03:15,260 --> 00:03:19,340
أحضر فيه ألف مل distilled water، بحط الألف تحت المية

44
00:03:19,340 --> 00:03:23,540
وطرفين في وسطين وهيك بيصير عندي الـ weight للـ NACL

45
00:03:23,540 --> 00:03:28,960
8.5 جرام، الـ daily wanted الثاني هو الـ peptone

46
00:03:28,960 --> 00:03:35,550
الـ peptone هي البروتينات الصغيرة، النشأات من وين صار

47
00:03:35,550 --> 00:03:39,710
في تكسير جزء للبروتينات، partial hydrolysis of

48
00:03:39,710 --> 00:03:44,510
proteins، بتعطيني peptone، فهي الـ peptone بتكون عندي

49
00:03:44,510 --> 00:03:48,950
على شكل powder، التركيز اللي راح يلزمني من الـ peptone

50
00:03:48,950 --> 00:03:55,850
1 من 10%، كيف بدي أحضر 1 من 10% peptone؟ بقول لي على 

51
00:03:55,850 --> 00:04:01,710
الميزان بدي أوزن 1 من 10، 0.1 جرام من الـ 

52
00:04:01,710 --> 00:04:06,170
powder بحطها في flask وبحط عليها 100 مل distilled 

53
00:04:06,170 --> 00:04:10,430
water، طيب لو بدي أحضر في 1000 مل distilled water

54
00:04:10,430 --> 00:04:15,690
طرفين في وسطين وبطلع معي الـ peptone 1 جرام، الـ

55
00:04:15,690 --> 00:04:19,620
daily wanted third هو الـ peptone saline، هو عبارة عن 

56
00:04:19,620 --> 00:04:24,360
peptone زائد normal saline، طب كيف بدي أحضر الـ peptone

57
00:04:24,360 --> 00:04:30,240
saline؟ بحط 0.1 جرام من الـ peptone، 85 من 100

58
00:04:30,240 --> 00:04:34,620
جرام NaCl، والاتنين بحط عليهم 100 مل distilled water

59
00:04:35,230 --> 00:04:39,630
بأخلط الـ 0.1 مع الـ 85 من 100 بحط عليهم

60
00:04:39,630 --> 00:04:44,230
100 ml distilled water، قلت ليش بحتاج الـ diluent؟ 

61
00:04:44,230 --> 00:04:47,790
لأن هي بتعملي تخفيف للـ analytical unit لحتى ما 

62
00:04:47,790 --> 00:04:51,950
يطلع معي to numerous to count، لما نرجع للجامعة إن

63
00:04:51,950 --> 00:04:54,790
شاء الله بدّي نشتغل المعمل هذا على عينات الـ yogurt

64
00:04:54,790 --> 00:04:59,270
أو اللبن السائل، بتجيني أو بدي أشتريها من الـ .. 

65
00:04:59,270 --> 00:05:02,790
من الـ supermarket، بتكون عندي علبة فيها 100 مل من 

66
00:05:02,790 --> 00:05:07,470
الـ yogurt، تمام، 100 مل هي .. هي بمثابة الـ sample 

67
00:05:07,470 --> 00:05:10,170
unit، لسه بدي أخد منها الـ analytical unit اللي هي 

68
00:05:10,170 --> 00:05:15,330
25 مل، بدنا إياها، قبل اللي أخد الـ 25 ml، قلنا لازم أضمن

69
00:05:15,330 --> 00:05:19,350
هي تكون عينة ممثلة، يعني بدّي أعمل mix للـ Meat Meal

70
00:05:19,350 --> 00:05:25,130
بعملها mix عادي برجها باستخدام تيب معقّم، بسحب 25 ml

71
00:05:25,130 --> 00:05:28,210
من اللي جرت، بحطها في flask مغسول بالماء والصابون

72
00:05:28,210 --> 00:05:32,090
والـ distilled water، أنا هيك صار عندي عينتي لسه 

73
00:05:32,090 --> 00:05:36,410
مركزة كده يعني بدي أخففها باستخدام Normal Saline

74
00:05:36,410 --> 00:05:42,720
225 ml Normal Saline، قداش صار عندي التخفيف dilution

75
00:05:42,720 --> 00:05:45,480
بيساوي الـ sample على الـ sample زائد الـ diluent

76
00:05:45,480 --> 00:05:52,480
بيساوي 25 على 25 زائد 225، 1 إلى 10 أو 10 أس سالب 1

77
00:05:54,070 --> 00:05:59,730
فهيك خففت العينة 1 إلى 10، بقول لي الأفضل نبدأ

78
00:05:59,730 --> 00:06:04,250
بتخفيف 1 إلى 10، بغض النظر عن الكميات يعني قبل

79
00:06:04,250 --> 00:06:07,710
شوية أنا هيني حضرت تخفيف 1 إلى 10 من خلال 25

80
00:06:07,710 --> 00:06:13,170
sample، 225 من الـ diluent، بقدر كمان إنه أحضر 

81
00:06:13,170 --> 00:06:17,010
1 إلى 10 باستخدام 10 sample أو 90 من

82
00:06:17,010 --> 00:06:21,830
الـ diluent، اللي هي بتصير 10 على 10 زائد، بقدر

83
00:06:21,830 --> 00:06:27,330
كمان إنه أحضر 1 إلى 10 من خلال 11 sample و99 من

84
00:06:27,330 --> 00:06:31,450
الـ diluent، فهي أول نقطة إنه بدي أبدأ بتخفيف 1

85
00:06:31,450 --> 00:06:35,070
إلى 10، النقطة الثانية بيقول لي يفضل إنه أمشي

86
00:06:35,070 --> 00:06:39,910
مضاعفات الـ 10، يعني أول شيء بعمل تخفيف 1 إلى 10

87
00:06:39,910 --> 00:06:44,090
بعد هيك بعمل serial dilution، تخفيف 10 أس سالب

88
00:06:44,090 --> 00:06:47,430
2 أو 1 إلى 100، 10 أس سالب 3 أو 1 إلى 1000 وهكذا

89
00:06:47,430 --> 00:06:53,120
هكذا، شغلنا بيكون على شكل جروبات، لكل جروب عنده

90
00:06:53,120 --> 00:06:56,720
أربع تيوبات، كل تيوب فيه 9 مل normal saline،

91
00:06:56,720 --> 00:06:59,780
بدي أوحد الـ diluent وبدي أغيّر في محتوى

92
00:06:59,780 --> 00:07:03,140
البكتيريا، فالـ diluent كلهم في كل التيوبات هتكون

93
00:07:03,140 --> 00:07:08,310
عنده واحدة 9 مل، شو بدي أعمل؟ بدي أخد من الـ

94
00:07:08,310 --> 00:07:11,910
flask 1 مل، بدي أحطه على التيوب الأول، التيوب 

95
00:07:11,910 --> 00:07:15,050
الأول بأخد منه 1 مل، بحطه على التيوب الثاني، 

96
00:07:15,050 --> 00:07:17,790
التيوب الثاني 1 مل على التيوب الثالث وعلى

97
00:07:17,790 --> 00:07:21,290
الرابع، بالآخر فبسحب 1 مل من الرابع أو بكبّه

98
00:07:24,250 --> 00:07:29,490
قلنا إنه للفلاسك تخفيفه 1 إلى 10 بأخد منه 1

99
00:07:29,490 --> 00:07:32,610
مل بدي أحطه على أول التيوب، كيف بدي أخد الـ 1 مل

100
00:07:32,610 --> 00:07:37,030
بأشيل السلفان عن الفلاسك بعقم الفوهة على اللهب

101
00:07:37,030 --> 00:07:42,250
فبسحب 1 مل باستخدام تيب معقّم، بعقم الفوهة ثاني

102
00:07:42,250 --> 00:07:46,270
أو بسكر بالسلفان، بروح على أول تيوب بافتح عنه 

103
00:07:46,270 --> 00:07:50,930
القطن سواب، بعقم، بحط فيه الـ 1 مل، بعقم ثاني و

104
00:07:50,930 --> 00:07:56,890
بسكر، تمام، هيك قداش صار عندي الـ dilution في التيوب

105
00:07:56,890 --> 00:08:01,550
الأول، التيوب الأول لحاله تخفيفه صار 1 مل حطينا

106
00:08:01,550 --> 00:08:04,670
عليه، دي هي الـ sample و9 مل من الـ diluent، صار 1

107
00:08:04,670 --> 00:08:09,390
على 9، صار 1 إلى 10، بس أنا هاي الـ 1 مل كنت ماخدها

108
00:08:09,390 --> 00:08:14,470
من الـ flask لتخفيفه 1 إلى 10، معناته الـ total 

109
00:08:14,470 --> 00:08:18,930
dilution للتيوب رقم 1، تخفيفه في تخفيف التيوب اللي

110
00:08:18,930 --> 00:08:24,270
قبله، 1 إلى 10 في 1 إلى 10، صار تخفيف للـ tube الأول 10

111
00:08:24,270 --> 00:08:29,470
أس سالب 2، بالـ marker بكتب عليها 10 أس سالب 2، أنا 

112
00:08:29,470 --> 00:08:35,630
حطيت 1 مل، تمام، هل بينفع أخد الـ 1 مل مباشرة وأحطه 

113
00:08:35,630 --> 00:08:40,250
على الـ tube الثاني؟ طبعاً لا، لازم أعمل mix، بعمل mix

114
00:08:40,250 --> 00:08:44,850
مظبوط باستخدام جهاز اسمه الـ vortex، بحطه على الـ

115
00:08:44,850 --> 00:08:49,880
vortex، بيعمل mix للعينة، بعدين بروح أفتح الـ cotton

116
00:08:49,880 --> 00:08:53,860
swab على الـ tube الأول، بعقم الفوهة، بأخد 1 مل

117
00:08:53,860 --> 00:08:58,600
بعقم ثاني وبسكر، وبروح على الـ tube الثاني بحط 

118
00:08:58,600 --> 00:09:04,540
عليه الـ 1 مل، صار عندي الـ volume لـ أول الـ tube صار

119
00:09:04,540 --> 00:09:08,040
فيه بس 9 مل، لأن أنا سحبت منه مل وأديته على الـ 

120
00:09:08,040 --> 00:09:11,970
tube الثاني، طيب، التيوب الثاني صار فيه 9 مل من الـ

121
00:09:11,970 --> 00:09:15,430
Normal Saline و1 مل اللي أخدته من التيوب رقم 1،

122
00:09:15,430 --> 00:09:20,170
يعني صار فيه 10 مل، قداش الـ Concentration أو الـ

123
00:09:20,170 --> 00:09:24,710
Dilution، 1 على 9، 1 إلى 10، بس أنا هاي الـ 1

124
00:09:24,710 --> 00:09:29,110
ماخده من التيوب، تخفيفه 10 أس سالب 2 أصلاً، فبالتالي تخفيف

125
00:09:29,110 --> 00:09:33,940
التيوب الثاني في تخفيف التيوب اللي قبله، صار 1

126
00:09:33,940 --> 00:09:37,160
إلى 10 في 1 إلى 100، صار تخفيفه 10 أس سالب 3

127
00:09:37,160 --> 00:09:41,200
أو 1 إلى 1000، فبكتب عليه بالـ marker 1 إلى 1000، بعدين 

128
00:09:41,200 --> 00:09:43,260
بروح أخد 1 ml من الـ tube الثاني على الـ tube

129
00:09:43,260 --> 00:09:47,740
الثالث، صار عند الـ volume في الـ tube الثاني صار فيه

130
00:09:47,740 --> 00:09:52,360
شو؟ 9 ml، فبضطر أخد أخد 1 ml بديّه في آخر tube

131
00:09:52,360 --> 00:09:55,000
حيصير عندي إنه 9 ml و1 ml جبناها من الـ

132
00:09:55,000 --> 00:09:59,540
tube الثالث، شو بدي أعمل؟ بعمل mix وبعدين بتخلص من

133
00:09:59,540 --> 00:10:05,730
1 ml، هاي اسمها الـ serial dilution، تخفيف أي

134
00:10:05,730 --> 00:10:10,410
تيوب هو تخفيفه مضروب تخفيف التيوب اللي قبله، بعد

135
00:10:10,410 --> 00:10:14,850
هيك من كل تخفيف بروح أخد 100 microliter أو 0.1 

136
00:10:14,850 --> 00:10:20,850
مل، هي هي وبزرعها على طبق فيه nutrient agar، بتكون

137
00:10:20,850 --> 00:10:25,910
عندي الـ media solid متصلبة وجاهزة، باستخدام tip

138
00:10:25,910 --> 00:10:30,470
معقّم، بأخد 100 micro من كل تيوب وبحطه على الطبق

139
00:10:30,470 --> 00:10:34,380
لقباله، وبكتب بالـ marker 10 أس سالب 2، 10

140
00:10:34,380 --> 00:10:38,180
أس سالب 3، 10 أس سالب 4، طبعاً بحطه في النص 

141
00:10:38,180 --> 00:10:41,180
الـ 100 microliter بحطه في النص، بعدين بروح أجيب ال

142
00:10:41,180 --> 00:10:45,560
spreader أو الـ قلشاب، بعقمه كيف قلنا، بنعقم في

143
00:10:45,560 --> 00:10:49,780
الكحول، وبعدين بمرره على اللهب، بحطه على عينتي، و

144
00:10:49,780 --> 00:10:53,040
بقفرده على الطبق كمان

145
00:10:54,680 --> 00:10:59,720
صار عندي أربع تخفيفات أو أربع تيوبات، كل تيوب فيه 

146
00:10:59,720 --> 00:11:03,780
له قبلات على التخفيف اللي له، طب احنا قلنا بنعمل 

147
00:11:03,780 --> 00:11:08,660
marker على الـ ... للتيوب على  ظهره، بكتب عشرة أقصر

148
00:11:08,660 --> 00:11:13,280
بتنين، عشر أقصر، بتلاتة، تمام، بقى بتركه شوية، بعد فترة

149
00:11:13,280 --> 00:11:17,920
بقلبه بحيث أنه تكون الغطاية لتحت، inverted position

150
00:11:17,920 --> 00:11:22,180
أو بسميها upside down، بقلبه وبحطه في الـ incubator

151
00:11:22,180 --> 00:11:28,950
هو مقلوب، بخليه 24 hour على درجة حرارة 37، طيب ليش 

152
00:11:28,950 --> 00:11:32,050
بصبر عليها شوية؟ طب أنا كان بإمكاني أنه أزرع و

153
00:11:32,050 --> 00:11:36,450
أقلبه مباشرة، لو قلبته على طول، فكل اللي أنا حاطيته

154
00:11:36,450 --> 00:11:39,690
أو كل اللي زرعته هينزل تاني على الغطاء، ومعناته مش 

155
00:11:39,690 --> 00:11:44,650
راح يتكون عندي كلونيات خالص، احنا قلنا بدي نزرع 

156
00:11:44,650 --> 00:11:48,030
اليوم على الـ Nutrient Agar، طيب لو أنا كنت حابة أنه 

157
00:11:48,030 --> 00:11:51,430
أنمي نوع واحد من البكتيريا والآخر مثلا الـ staph

158
00:11:51,430 --> 00:11:54,220
aureus، شو اللي راح يختلف عندي في التقنية بتاعت

159
00:11:54,220 --> 00:11:58,280
اليوم؟ راح أعمل تخفيف للعينة عادي جدا باستخدام

160
00:11:58,280 --> 00:12:01,420
Normal Saline، راح أعمل Serial Dilution عادي جدا 

161
00:12:01,420 --> 00:12:05,170
عادي جدا، لكن الاختلاف اللي هيكون فقط في الـ Media

162
00:12:05,170 --> 00:12:08,750
في الوسط اللي راح أستخدمه، لإن بستخدم الـ Media حسب 

163
00:12:08,750 --> 00:12:12,130
نوع البكتيريا اللي بدي أنميها، فلو بدي أنمي جميع 

164
00:12:12,130 --> 00:12:14,950
أنواع البكتيريا، بستخدم General Media، ما فيش فيها 

165
00:12:14,950 --> 00:12:17,750
Inhibitors، لو بدي أنمي نوع معين من البكتيريا 

166
00:12:17,750 --> 00:12:21,090
بستخدم Media بحيث أنها تعمل Inhibition لأي نوع 

167
00:12:21,090 --> 00:12:26,010
ثاني، طيب، ممكن تجينا عينات لحمة، شو بدي أعمل فيها؟

168
00:12:26,010 --> 00:12:29,190
أو كيف بدي أشتغل عينات اللحمة؟ أولا من ناحية الـ

169
00:12:29,190 --> 00:12:31,610
Sample، you know، أنت بدي أخد من أكثر من مكان، 

170
00:12:31,610 --> 00:12:38,040
بعدين؟ بأحطها في الـ «blender» أو الـ «stomacher» 

171
00:12:38,040 --> 00:12:41,240
حتى أطحنها من solid إلى liquid، بحط عليها الـ

172
00:12:41,240 --> 00:12:46,100
«diluent»، لكن إلا يعني ما تظل عندي جزيئات كثير 

173
00:12:46,100 --> 00:12:49,960
صغيرة، فباجي أزرع منها على الطبق، فبفكر هذه

174
00:12:49,960 --> 00:12:52,440
الجزيئات إنها كولونيات، لكن هي بالأساس بتكون 

175
00:12:52,440 --> 00:12:56,220
particles من اللحمة، فهي بيسميها «interfering 

176
00:12:56,220 --> 00:13:00,450
particles»، شغلات ممكن تتدخل معي مع عد الكولونيات، كيف

177
00:13:00,450 --> 00:13:04,410
بدي أتخلص منها؟ بقول لي عندي طريقتين لأتخلص من

178
00:13:04,410 --> 00:13:08,550
الـ interfering particles، الطريقة الأولى أن ممكن أعمل

179
00:13:08,550 --> 00:13:14,230
طبقين لكل تخفيف لـ tube، الأول بحط له طبقين، باخد 100 

180
00:13:14,230 --> 00:13:18,850
micro على أول طبق وبزرع، بعدين باخد كمان 100 micro 

181
00:13:18,850 --> 00:13:21,630
على الطبق الثاني وبزرع، هم الاثنين تخفيفهم عشرة 

182
00:13:21,630 --> 00:13:26,590
أضعاف بإثنين، لكن الاختلاف اللي يصير، في طبق بحطه في 

183
00:13:26,590 --> 00:13:29,770
الثلاجة أو طبق بحطه في الـ incubator، احنا عارفين 

184
00:13:29,770 --> 00:13:32,630
لو بدنا نمي البكتيريا ونوفر لها الظروف من ناحية 

185
00:13:32,630 --> 00:13:37,150
الحرارة، بدي أحطها في الـ incubator، لو حطيت الطبق

186
00:13:37,150 --> 00:13:41,390
في الثلاجة، مش راح تنمو البكتيريا، في الطبق هذه 

187
00:13:41,390 --> 00:13:45,750
اللي في الثلاجة، لو لقيت أي شيء على الـ media، 

188
00:13:45,750 --> 00:13:48,490
معناته هذه، على الأكيد بدها تكون interfering

189
00:13:48,490 --> 00:13:53,450
particles، لأن البكتيريا ما بتنمو في الثلاجة، تمام؟ 

190
00:13:54,080 --> 00:13:58,820
فبروح بحدد مكان الـ interfering particles، حجمها، 

191
00:13:58,820 --> 00:14:02,480
عددها وبقارنهم مع الـ plate اللي كان في ال

192
00:14:02,480 --> 00:14:07,820
incubator وبأطرحهم من بعض، الطريقة الثانية ممكن بعد 

193
00:14:07,820 --> 00:14:11,360
ما أزرع البكتيريا وأطلعها وأطلعها من الـ incubator

194
00:14:11,360 --> 00:14:16,040
قبل اللي قاعد لسه، شو بعمل؟ بأضيف 2 مل من مادة اسمها

195
00:14:16,040 --> 00:14:25,410
2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride، هي المادة 

196
00:14:25,410 --> 00:14:29,310
عندها القدرة إنها ترتبط بالبكتيريا وتلونها للون 

197
00:14:29,310 --> 00:14:32,930
أحمر، فباجي عندي هناك في الطبق، بتطلع اللي لونها 

198
00:14:32,930 --> 00:14:36,650
أحمر بدها تكون high colonies، فبعدها اللي مش ملونة 

199
00:14:36,650 --> 00:14:40,330
هي بدها تكون interfering particles، طيب شو سبب 

200
00:14:40,330 --> 00:14:45,110
اللون الأحمر اللي عندها؟ بقول لي الـ TTC تيجي 

201
00:14:45,110 --> 00:14:50,150
البكتيريا بتعمل لها reduction، اختزال، بتحولها إلى 

202
00:14:50,150 --> 00:14:53,670
مادة اسمها الـ Formazan وهي لونها أحمر، يعني الـ

203
00:14:53,670 --> 00:14:58,330
TTC بيصير لها reduction بوسط البكتيريا بتتحول إلى 

204
00:14:58,330 --> 00:15:04,470
Formazan وهي لونها أحمر، لكن في مشكلة بتواجهني لما 

205
00:15:04,470 --> 00:15:08,090
أستخدم الـ TTC أنه ما بقدر أستخدم الـ colonies 

206
00:15:08,090 --> 00:15:13,390
المعادلة بالـ TTC for isolation and identification 

207
00:15:13,390 --> 00:15:17,170
of bacteria، لو عندي نوع بكتيريا وبدي أعرف شو هي 

208
00:15:17,170 --> 00:15:21,810
البكتيريا بالضبط، شو اسمها؟ ما بقدر أجري عليها ال

209
00:15:21,810 --> 00:15:26,390
biochemical test، ما بنفع طول ما هي فيها TTC، ما 

210
00:15:26,390 --> 00:15:30,680
بنفعليش؟ لأن البكتيريا أو الـ colonies هتكون فقدت 

211
00:15:30,680 --> 00:15:35,200
بعضًا من خصائصها وبالتالي هتعطيني نتائج غير صحيحة 

212
00:15:35,200 --> 00:15:38,060
فمشان أشتغل الـ biochemical test أو ال

213
00:15:38,060 --> 00:15:41,400
identification بشكل عام، لازم أنها تكون الـ colonies

214
00:15:41,400 --> 00:15:45,660
fresh، مش معالجة خالص، يعني ما فيش عليها أي مادة، هيك

215
00:15:45,660 --> 00:15:49,040
تقريبًا بنكون خلصنا المحاضرة، وحاليًا بدي نمشي على ال

216
00:15:49,040 --> 00:15:50,060
slides، على السريع