1 00:00:02,020 --> 00:00:06,380 السلام عليكم ورحمة الله وبركاته معملنا بعنوان 2 00:00:06,380 --> 00:00:09,320 Enumeration of Staphylococcus Aureus in Foods 3 00:00:09,320 --> 00:00:14,300 هنعدّ Staphylococcus Aureus في عينة الغذء معناته هنشتغل 4 00:00:14,300 --> 00:00:17,740 نفس الشغل المرة الماضية اللي كان عنوانه باللغة العربية 5 00:00:17,740 --> 00:00:20,840 Clinic Count أو Total Viable Count لكن الاختلاف 6 00:00:20,840 --> 00:00:24,460 هيكون فقط في الميديا المستخدمة المعمل الماضي كنت 7 00:00:24,460 --> 00:00:27,980 بدي أعدّ جميع أنواع البكتيريا بغض النظر عن نوعها 8 00:00:27,980 --> 00:00:32,670 لهيك كنا بنستخدم General Media زي الـ Nutrient Agar 9 00:00:32,670 --> 00:00:37,550 ما فيها Selective Agent ما فيها أي Inhibitors اليوم 10 00:00:37,550 --> 00:00:42,030 معنيّة بعدّ Staphylococcus Aureus معناته الميديا حتكون 11 00:00:42,030 --> 00:00:46,990 Selective Media يعني Select the organism 12 00:00:46,990 --> 00:00:51,110 that will grow on it بتختاري أو بتختار إيش هي الـ 13 00:00:51,110 --> 00:00:54,970 organism اللي بإمكانها تنمو على هذه الـ media و 14 00:00:54,970 --> 00:00:58,390 بتعمل Inhibition لأنواع ثانية أنا بحكي بتعمل 15 00:00:58,390 --> 00:01:01,370 Inhibition، ما بتعمل Death، إيش المقصود فيها 16 00:01:01,370 --> 00:01:06,070 Inhibition؟ Inhibition يعني بتثبت نموّ البكتيريا 17 00:01:07,800 --> 00:01:11,760 كمان في المعمل هنسمع كلمة Differential Media أو 18 00:01:11,760 --> 00:01:15,820 Differential Agent Differential معناته بتميّز ع 19 00:01:15,820 --> 00:01:21,060 سبيل المثال لو عندي Media بتنمّي لـ Staphylococci بجميع 20 00:01:21,060 --> 00:01:24,180 الـ Species لها و بتعمل Inhibition لأنواع ثانية 21 00:01:24,180 --> 00:01:27,540 طب أنا عندي لـ Staphylococci فيه عندي Aureus Staphylococcus 22 00:01:27,540 --> 00:01:31,020 Coccus Epidermidis طب كيف بدّي أميّز Staphylococcus Aureus عن 23 00:01:31,020 --> 00:01:35,320 الـ Epidermidis هي بسمّيها الـ Differential إشي بيمّيز 24 00:01:35,860 --> 00:01:39,400 في المقصود فيها it makes the organism different الـ 25 00:01:39,400 --> 00:01:42,320 organism اللي أنا بأدور عليه بتخليه مختلف عن 26 00:01:42,320 --> 00:01:46,280 التاني وليكن مثلًا من خلال اللون بأميّز بينهم مثلًا 27 00:01:46,280 --> 00:01:50,160 إذا أعطتني لون أصفر على Media MSA معناته هاي Staphylococcus 28 00:01:50,160 --> 00:01:52,880 Aureus إذا أعطتني لون أحمر معناته هاي 29 00:01:52,880 --> 00:01:58,900 Staphylococcus Epidermidis وهكذا فاللي هيكون عند 30 00:01:58,900 --> 00:02:01,980 الاختلاف فقط في الـ Media يعني بدّي أجيب Flask بدّي 31 00:02:01,980 --> 00:02:06,960 أحط عليها 25 مل من عينتي بنشتغليهم على الـ Milk 32 00:02:06,960 --> 00:02:11,120 الـ Milk بحاجة إلى تخفيف قولنا ما بنفع أخده وأسرع 33 00:02:11,120 --> 00:02:13,820 مباشرة على الطبق لأنه هيك هيأتيني Too Numerous To 34 00:02:13,820 --> 00:02:18,320 Count شو بعمل؟ بعمل أول شيء تخفيف 1 لـ 10 كيف بتعمل 35 00:02:18,320 --> 00:02:23,240 تخفيف 1 لـ 10 وأنا عندي عينة 25؟ بحتاج لـ 225 مل 36 00:02:23,240 --> 00:02:28,470 من الـ Normal Saline تمام بعملها Mix بعدين بيكون في 37 00:02:28,470 --> 00:02:32,850 عندي أربعة من الـ Tubes كل واحد فيه تسعة مل Normal 38 00:02:32,850 --> 00:02:36,410 Saline بيروح بعمل Serial Dilution باخد واحد مل 39 00:02:36,410 --> 00:02:40,530 من الـ Flask على أول Tube بعمل Mix واحد مل من أول 40 00:02:40,530 --> 00:02:43,650 Tube على الثاني وعلى الثالث وعلى الرابع في الأخير 41 00:02:43,650 --> 00:02:49,960 بتخلص من واحد مل هذا هو بيكون شغلنا لليوم وين 42 00:02:49,960 --> 00:02:53,680 بيكون موجود لـ Staphylococcus Aureus؟ بيقول بيكون 43 00:02:53,680 --> 00:02:56,720 موجود في الـ Naturally Contaminated Meats في 44 00:02:56,720 --> 00:03:00,240 اللحوم، في الـ Fish، في الـ Poultry، الدواجن، في 45 00:03:00,240 --> 00:03:03,140 الـ Vegetables وفي الـ Cereals المقصود فيها الحبوب 46 00:03:03,140 --> 00:03:06,680 برضه بيكون موجود في الـ Dairy Products هي منتجات 47 00:03:06,680 --> 00:03:11,020 الألبان وبرضه Artificially Contaminated Foods كمان 48 00:03:11,020 --> 00:03:15,810 بقدر أعدّ Staphylococcus إذا كانت موجودة في الـ 49 00:03:15,810 --> 00:03:19,110 Food في الـ Food Ingredient مكونات الطعام في الـ 50 00:03:19,110 --> 00:03:23,250 Environmental Samples عينات من البيئة Certain 51 00:03:23,250 --> 00:03:27,190 Staphylococci Produce Enterotoxin مش كلّ 52 00:03:27,190 --> 00:03:30,550 Staphylococcus بتطلق التوكسين Certain في نوع معيّن 53 00:03:30,550 --> 00:03:33,450 منها، السلالات معيّنة من الـ Staphylococcus Aureus 54 00:03:33,450 --> 00:03:38,390 Strains معينة قلنا الـ Staph، الـ Staphylococcus 55 00:03:38,390 --> 00:03:43,660 هاي اللي بسمّيها الـ Genus Aureus، الـ Species اللي 56 00:03:43,660 --> 00:03:48,360 بعد الـ Aureus هيكون Strains فبيقول لي في Strains معيّن 57 00:03:48,360 --> 00:03:51,920 من Staphylococcus Aureus بتطلّع الـ Enterotoxin إيش 58 00:03:51,920 --> 00:03:56,500 المقصود بالـ Enterotoxin؟ هو التوكسين شغله بيكون في 59 00:03:56,500 --> 00:04:01,880 الـ Intestine Enterotoxin شغله في الـ Intestine بيعمل Food 60 00:04:01,880 --> 00:04:06,400 Poisoning فبالتالي بقدر أسمّي هاي الـ Strains 61 00:04:06,400 --> 00:04:12,090 Spoilage Organism هذا التعريف معاكم في أول معمل، 62 00:04:12,090 --> 00:04:15,390 إيش هو الـ Spoilage Organism؟ اللي هو الـ Organism 63 00:04:15,390 --> 00:04:20,070 who create undesirable characteristics in food، 64 00:04:20,070 --> 00:04:22,910 بيعطينا خصائص غير مرغوب فيها في الـ Food من ناحية 65 00:04:22,910 --> 00:04:31,450 اختلاف الـ Texture في الـ Smell، في الـ طعم، طيب 66 00:04:32,820 --> 00:04:36,040 احنا عارفين في عندنا نوعين من التوكسين وهذا مرة 67 00:04:36,040 --> 00:04:39,160 معاكم في الـ Essential Microbiology أنواع التوكسين 68 00:04:39,160 --> 00:04:41,980 بتطلّعها البكتيريا إمّا إنها تكون Endotoxin أو 69 00:04:41,980 --> 00:04:48,400 Exotoxin إيش الاختلاف بيناتهم؟ الـ Endotoxin بتطلّع 70 00:04:48,400 --> 00:04:53,240 البكتيريا لما تموت Until Death Of Cell، بتموت 71 00:04:53,240 --> 00:04:56,780 الخلية، بعدين بتطلّع منها التوكسين، فهذا بنسمّيه 72 00:04:56,780 --> 00:04:59,840 Endotoxin من أيّ نوع من البكتيريا بتطلّع 73 00:04:59,840 --> 00:05:02,420 الـ Endotoxin، بتطلّع Gram-Negative Bacteria 74 00:05:03,630 --> 00:05:09,510 بتكون مصبوغة باللون الأحمر طيب الـ Exotoxin بتطلّع 75 00:05:09,510 --> 00:05:14,370 والخلية لسه عايشة Viable Cell خلية على قيد الحياة 76 00:05:14,370 --> 00:05:18,670 اللي بيصير الخلية بتضلّ تتكاثر تتكاثر بتصل عندي 77 00:05:18,670 --> 00:05:21,890 عدد معيّن أو Concentration معيّن بعد هيك بتروح بتطلّع 78 00:05:21,890 --> 00:05:26,730 التوكسين الغالب اللي بيطلّع الـ Exotoxin هي الـ Gram 79 00:05:26,730 --> 00:05:31,270 -Positive Bacteria طيب الـ Enterotoxin هاد بدّي أحطّه 80 00:05:31,270 --> 00:05:35,030 لأيّ نوع من الـ Endotoxin لـ Exotoxin هاد بيكون من ضمن الـ 81 00:05:35,030 --> 00:05:39,130 Exotoxin لإنه قلنا هاد بيطلّع من الـ Staph Aureus 82 00:05:39,130 --> 00:05:42,150 والـ Staph Aureus هي الـ Gram-Positive فبالتالي 83 00:05:42,150 --> 00:05:46,890 الـ Enterotoxin هو من ضمن الـ Exotoxin This 84 00:05:46,890 --> 00:05:51,230 Ability To Produce Enterotoxin Is Limited To Those 85 00:05:51,230 --> 00:05:55,360 Strains That Are Coagulase Positive فبيقول ليه؟ أيّ 86 00:05:55,360 --> 00:05:57,520 نوع من أنواع Staphylococcus اللي بتطلّع 87 00:05:57,520 --> 00:06:04,100 الـ Enterotoxin هي اللي بتكون لها Coagulase لما بدّي 88 00:06:04,100 --> 00:06:08,320 أجي أعمل Biochemical Test فأفحص هل هي البكتيريا 89 00:06:08,320 --> 00:06:12,040 عندها Coagulase أو لأ لو لقيت عندها الـ Coagulase، 90 00:06:12,040 --> 00:06:15,560 معناته High، بتطلّع كمان الـ Enterotoxin ثاني، 91 00:06:15,560 --> 00:06:19,260 الشيء اللي لسه فيه Staphylococcus Aureus عندها إنزيم اسمه 92 00:06:19,260 --> 00:06:23,960 Nuclease، Thermonuclease (TNase) هو Heat Stable Nuclease Heat Stable 93 00:06:23,960 --> 00:06:27,520 يعني بتحمّل درجات الحرارة العالية لاحظوا فيه اختلاف 94 00:06:27,520 --> 00:06:31,420 بين كلمة Heat Stable وبين Heat Labile Heat Labile 95 00:06:31,420 --> 00:06:36,130 معناته بتتكسر مع درجات الحرارة العالية فاللي صار 96 00:06:36,130 --> 00:06:39,530 عندي لحدّ الآن Staphylococcus Aureus بتطلّع الـ 97 00:06:39,530 --> 00:06:42,750 Enterotoxin اللي هو من ضمن الـ Exotoxin بتعمل Food 98 00:06:42,750 --> 00:06:46,870 Poisoning فهي Spoilage Organism عندها Coagulase و 99 00:06:46,870 --> 00:06:50,530 عندها TNase أو Heat Stable Nuclease This Method 100 00:06:50,530 --> 00:06:53,530 Determines The Presence Of Staphylococcus Aureus كيف بدنا 101 00:06:53,530 --> 00:06:57,790 نحدّد أو بدنا نعدّ وجود Staphylococcus Aureus من خلال 102 00:06:57,790 --> 00:07:02,230 الـ Plating Known Quantities Of Food Sample Volume 103 00:07:02,230 --> 00:07:06,370 Plate يعني أداش باخد Volume من الـ Tubes من كل 104 00:07:06,370 --> 00:07:09,110 تخفيف وبروح أحطّه على الطبق اللي فيه الـ Media 105 00:07:09,110 --> 00:07:11,270 بتحفظهم All The Stuff Or استعمل انهي شيء 106 00:07:11,270 --> 00:07:15,560 للأنواع الثانية بعد ما أزرعه وراح أحطّه في الـ 107 00:07:15,560 --> 00:07:19,000 Incubator After Incubation, Presumptive 108 00:07:19,000 --> 00:07:22,040 Staphylococcus Aureus Are Selected And Subjected 109 00:07:22,040 --> 00:07:25,620 To Confirmatory Tests بيقول لي Okay أنا هاي بحطّ 110 00:07:25,620 --> 00:07:28,980 أول شيء Media وبنمّي عليها البكتيريا اللي بتطلّع 111 00:07:28,980 --> 00:07:32,700 عندنا ما بكون متأكدة 100% إنه هاي على الأكيد 112 00:07:32,700 --> 00:07:36,990 Staphylococcus Aureus بحاجة إنه أعمل Confirmatory 113 00:07:36,990 --> 00:07:40,990 Test فحص تأكيدي زي مثلًا Coagulase Test زي مثلًا الـ 114 00:07:40,990 --> 00:07:44,450 Biochemical Test فلمّا أزرعها على الطبق لسه هاد 115 00:07:44,450 --> 00:07:47,430 أول مرة بنسمّيها Presumptive Test Presumptive 116 00:07:47,430 --> 00:07:52,330 يعني Screening Test مش متأكدة 100% فبروح بعمل 117 00:07:52,330 --> 00:07:54,770 Selection لهيّ الكولونيز وبأشتغل عليها 118 00:07:54,770 --> 00:07:58,130 Confirmatory Test From The Result Of This Test بعد 119 00:07:58,130 --> 00:08:01,690 ما أشتغل عليها ومن النتائج بقدر أعدّ Listها في 120 00:08:01,690 --> 00:08:06,170 Aureus Per Gram Or Ml من خلال القانون Concentration 121 00:08:06,170 --> 00:08:09,970 بساوي N على S في D الـ N هو الـ Number Of Colonies 122 00:08:09,970 --> 00:08:14,430 الـ S هو الـ Volume Plated أداش باخد Volume من كل 123 00:08:14,430 --> 00:08:17,550 التيوب وبحطّه على الطبق شرط أساسي تكون الوحدة 124 00:08:17,550 --> 00:08:23,650 بالمِل الـ D هي الـ Dilution فالـ Concentration 125 00:08:23,650 --> 00:08:29,170 للبكتيريا حتكون الوحدة اللي له كونيه Colony Forming Unit 126 00:08:29,170 --> 00:08:34,010 CFU Per Gram أو Per Ml حسب الحالة الفيزيائية 127 00:08:34,010 --> 00:08:38,650 للمادة لو بحكي مثلًا عن سلطة حتكون Per Gram لو 128 00:08:38,650 --> 00:08:44,300 بحكي عن Milk Per Ml تمام The Numbers Present May 129 00:08:44,300 --> 00:08:46,560 Indicate A Potential For The Presence Of 130 00:08:46,560 --> 00:08:49,740 Enterotoxin إيش بقدر أستفيد من الـ Concentration 131 00:08:49,740 --> 00:08:52,980 اللي طلع معي بعد ما عوضت في القانون بروح بأقارن 132 00:08:52,980 --> 00:08:57,140 طبعًا الـ Standards المعايير العالمية بتكون حاطّالي 133 00:08:57,140 --> 00:09:01,140 قيمة لو زاد عدد الـ Concentration إن البكتيريا High 134 00:09:01,140 --> 00:09:06,130 عن عدد معيّن Had معناته البكتيريا حتطلّع الـ Enterotoxin 135 00:09:06,130 --> 00:09:09,710 معناته حتعمل Food Poisoning وهذا الـ Food غير صالح 136 00:09:09,710 --> 00:09:13,010 للهيوم الـ Consumption فبروح بأقارن الـ Concentration 137 00:09:13,010 --> 00:09:16,250 اللي طلع معاه مع الـ Concentration اللي حاطّه الـ 138 00:09:16,250 --> 00:09:21,170 Standards وبقى أشوف هل فيه Enterotoxin أو لا لو 139 00:09:21,170 --> 00:09:23,490 العدد أكثر من اللي حاطّته الـ Standard معناته فيه 140 00:09:23,490 --> 00:09:26,890 Enterotoxin لو أقل بكثير معناته لأ مافيها 141 00:09:26,890 --> 00:09:30,900 Enterotoxin وبتالي بقدر أكل من الـfood كمان شغل 142 00:09:30,900 --> 00:09:33,340 ثاني بقدر استفيدها من خلال الـ concentration لـ 143 00:09:33,340 --> 00:09:38,060 البكتيريا also indicate a lack of adherence to 144 00:09:38,060 --> 00:09:41,760 good hygienic practice بشوف إذا كان فيه التزام 145 00:09:41,760 --> 00:09:45,200 بمعايير النظافة أو لأ كيف؟ شو علاقة معايير النظافة 146 00:09:45,200 --> 00:09:48,300 بالـ Staph aureus؟ بقولي الـ Staph aureus موجودة 147 00:09:48,300 --> 00:09:52,320 في جسم الإنسان بشكل طبيعي على الـ skin وفي النازل 148 00:09:52,320 --> 00:09:56,860 cavity في تجويف الأنف فعلى سبيل المثال لو كنت أنا في 149 00:09:56,860 --> 00:10:03,220 مصنع لـ .. لليوغورت مثلا روحت بدي أشوف قداش فيها 150 00:10:03,220 --> 00:10:05,720 staff areas لقيت أن الـ staff areas ال 151 00:10:05,720 --> 00:10:08,540 concentration في هذا الـ food أعلى بكثير من اللي 152 00:10:08,540 --> 00:10:12,300 حطته الـ standard معناته الشخص هذا اللي كان بيشتغل 153 00:10:12,540 --> 00:10:16,000 ما كان لابس الـ gloves أو صار فيه تلامس بين الجلد 154 00:10:16,000 --> 00:10:18,740 وبين الـ food فراحت انتقلت الـ Staph Aureus من 155 00:10:18,740 --> 00:10:22,540 جلده لـ الفود فمعناته ما كان فيه التزام بمعيار 156 00:10:22,540 --> 00:10:28,760 النظافة طيب، في عندي ميديات بقدر أستخدمها لأنمي 157 00:10:28,760 --> 00:10:33,040 عليها الـ Staph Aureus وبعد هيك أعد الكولونيز و 158 00:10:33,040 --> 00:10:37,960 أطبق عليها الـ confirmatory test في ميديا اسمها الـ 159 00:10:37,960 --> 00:10:43,910 Bird Barker Agar Bird Barker Agar هي تعتبر ميديا 160 00:10:43,910 --> 00:10:47,810 selective and differential media selective قلنا 161 00:10:47,810 --> 00:10:51,510 بتعمل select لأنواع معينة بحيث أنها تنمو على هذه 162 00:10:51,510 --> 00:10:54,130 الميديا وبتعمل inhibition لأنواع المتبقية 163 00:10:54,130 --> 00:10:57,570 differential لو نام عندي أكثر من نوع تقدر أنها 164 00:10:57,570 --> 00:11:02,290 تتميز بين الأنواع المختلفة طيب الـ bird barker agar 165 00:11:02,290 --> 00:11:05,590 بيقول لي هي بتيجي لي على شكل powder الـ bottles بيكون 166 00:11:05,590 --> 00:11:11,000 جواه powder بقرا الـ instruction اللي على الـ 167 00:11:11,000 --> 00:11:13,900 bottles بقى أشوف قداش بحتاج لـ powder قداش بحط 168 00:11:13,900 --> 00:11:16,720 عليه distilled water كلهم بحطهم في الـ flask على 169 00:11:16,720 --> 00:11:18,940 الـ hot plate وبعدين بحطهم في الـ autoclave for 170 00:11:18,940 --> 00:11:23,520 sterilization لحظة في كلمة «base» المقصود بالكلمة 171 00:11:23,520 --> 00:11:28,100 «base» أنه في شغلات بدي أضيفها على الـ media بعد 172 00:11:28,100 --> 00:11:29,540 ما تطلع من التعقيم 173 00:11:32,040 --> 00:11:36,020 تمام طب ليش مو أنا عمالي بأحضر الـ media بإمكاني 174 00:11:36,020 --> 00:11:39,620 أحط الشغلات هاي معها وأدخلهم كلهم في الـ 175 00:11:39,620 --> 00:11:43,680 autoclave وكلهم هي كانوا بيتعقموا؟ بقول لي لأ أول ما 176 00:11:43,680 --> 00:11:47,320 تشوف كلمة base معناته هاي المواد بدي أضيفها بعد ما 177 00:11:47,320 --> 00:11:50,620 تطلع الـ media من التعقيم لو ضفتها ودخلتها في 178 00:11:50,620 --> 00:11:56,460 التعقيم في الـ autoclave هتكسر المواد هاي تمام هاي 179 00:11:56,460 --> 00:11:59,080 المواد اللي بنضيفها على الـ media بعد ما تتعقم 180 00:11:59,080 --> 00:12:04,540 بنسميها الـ supplement فالـ supplements اللي بنضيفها 181 00:12:04,540 --> 00:12:09,200 في الـ Bird Barker Agar ميديا أول شيء هنضيف الـ egg 182 00:12:09,200 --> 00:12:16,480 يوك صفار البيض صفار البيض شو دوره في الـ ميديا هاي 183 00:12:16,480 --> 00:12:20,100 بقول لـ صفار البيض زي ما هو معروف فيها مادة اسمها 184 00:12:20,100 --> 00:12:26,200 الليستين فلو اللي كان نمت عندي Staph Aureus فالـ 185 00:12:26,200 --> 00:12:30,860 Staph Aureus عندها إنزيم اسمه الليستيناز الليستينيز 186 00:12:30,860 --> 00:12:36,640 يعني إنزيم بيكسر الليستين لما يكسّر الليستين 187 00:12:36,640 --> 00:12:40,900 بيصير حوالين الـ colonies clear zone منطقة بتكون 188 00:12:40,900 --> 00:12:46,280 clear هي عند الميديا بقصدها على الطبق من ضمن 189 00:12:46,280 --> 00:12:51,120 مكوناتها الـ egg yolk اللي هو صفار البيض بقضيفه بعد 190 00:12:51,120 --> 00:12:54,360 ما تطلع الميديا من الـ autoclave صفار البيض من ضمن 191 00:12:54,360 --> 00:12:58,960 مكوناته الليستين فطلعت عند الـ staph aureus على شكل 192 00:12:58,960 --> 00:13:03,890 colony الكولوني هي أو إن البكتيريا هي عندها إنزيم 193 00:13:03,890 --> 00:13:08,130 بتروح تطلع هات الإنزيم حوالين الكولوني فبروح بيكسر 194 00:13:08,130 --> 00:13:11,190 الليستين اللي حوالين الكولوني فبلاحظ فيه منطقة بتكون 195 00:13:11,190 --> 00:13:16,230 عاملة زي الهالو وبتكون منطقة clear هذه أول مادة 196 00:13:16,230 --> 00:13:19,530 بقضيفها الـ egg yolk المادة الثانية بقضيفها على الـ 197 00:13:19,530 --> 00:13:24,190 media بعد ما تطلع من الـ Autoclave 1% بوتاسيوم 198 00:13:24,190 --> 00:13:31,360 تليوريد شو الهدف من الـ بوتاسيوم تليوريد؟ الـ 199 00:13:31,360 --> 00:13:34,220 Potassium Telluride يُعتبر كـ Selective and 200 00:13:34,220 --> 00:13:40,080 Differential Agent Selective Agent عارفين كيف إنها 201 00:13:40,080 --> 00:13:44,400 بتنمي تسمح إنه اللي يلمع هاي الميديا فقط لـ Staff 202 00:13:44,400 --> 00:13:49,650 Aureus الـ Staphylococcus وبتعمل Inhibition للأنواع 203 00:13:49,650 --> 00:13:52,550 الثانية غير الـ Staphylococcus هي معناها Selective 204 00:13:52,550 --> 00:13:55,710 Agent طيب، كيف هي الـ Differential Agent؟ كيف 205 00:13:55,710 --> 00:13:59,390 بتميز الـ Staph Aureus عن غيرها من أنواع أو الـ 206 00:13:59,390 --> 00:14:05,630 Species من الـ Staphylococcus؟ بقول لي الميديا 207 00:14:05,630 --> 00:14:10,350 فيها 1% بوتاسيوم تليوريد لو اللي كان نامي عندي هي 208 00:14:10,350 --> 00:14:14,950 Staph Aureus فالـ staff أو البكتيريا يجب تعمل reduction 209 00:14:14,950 --> 00:14:20,130 لـ telluride اللي في الميديا reduction 210 00:14:20,130 --> 00:14:25,300 اختزال لما تختزل الـ Telluride بتروح تكون مركب 211 00:14:25,300 --> 00:14:29,360 لونه أسود فاللون الأسود هذا بلون الـ colonies إلى 212 00:14:29,360 --> 00:14:33,180 لون أسود فلو لقيت الـ colonies لونها أسود معناته 213 00:14:33,180 --> 00:14:36,980 عندي بكتيريا staphylococcus aureus راحت اشتغلت على 214 00:14:36,980 --> 00:14:40,200 الـ Telluride اللي في الـ media عملت له reduction 215 00:14:40,200 --> 00:14:43,900 حولت الـ Telluride إلى مركب لونه أسود وبالتالي 216 00:14:43,900 --> 00:14:47,240 ميزات الأنواع اللي نامي عندي على الطبق من خلال 217 00:14:47,240 --> 00:14:54,730 اللون «بيرت باركر أجار بيز» «it's a selective» حطوا 218 00:14:54,730 --> 00:14:57,650 جانبها كمان «and differential media» 219 00:14:59,690 --> 00:15:03,330 for isolation and presumptive identification طيب، 220 00:15:03,330 --> 00:15:06,530 إيش يعني presumptive؟ معناته الـ bert barker ما 221 00:15:06,530 --> 00:15:10,690 بقدر أجزم إن هاي اللي نمت عندي هي Staphylococcus 222 00:15:10,690 --> 00:15:14,910 Aureus لازم أعمل confirmatory test فالـ bert barker 223 00:15:14,910 --> 00:15:19,470 أجار هي screening media screening يعني بحتاج أعمل 224 00:15:19,470 --> 00:15:22,710 بعد كده confirmatory test أعمل biochemical أو بعمل 225 00:15:22,710 --> 00:15:27,100 serology تمام فهي Presumptive Identification of 226 00:15:27,100 --> 00:15:30,720 Coagulase Positive Staphylococci أول ما تشوفوا 227 00:15:30,720 --> 00:15:34,380 Coagulase Positive Staphylococci عطول هنعرف 228 00:15:34,380 --> 00:15:37,940 المقصود فيها Staphylococcus aureus لأن هي الوحيد 229 00:15:37,940 --> 00:15:42,710 اللي عندها Coagulase enzyme هذه الميديا استخدمت 230 00:15:42,710 --> 00:15:47,190 كثيرًا لاكتشاف Staphylococcus aureus هذه الميديا 231 00:15:47,190 --> 00:15:50,550 بستخدمها لأكشف عن الـ Staph Aureus الموجودة سواء 232 00:15:50,550 --> 00:15:54,110 بالطعام، بالتجارب، بالمثالات البيئية 233 00:15:56,950 --> 00:16:01,350 طيب Coagulase Positive Staphylococci المقصود فيها 234 00:16:01,350 --> 00:16:04,430 زي ما قلنا الـ Staph Aureus can grow and 235 00:16:04,430 --> 00:16:08,190 reproduce in cosmetic products برضه الـ Staph 236 00:16:08,190 --> 00:16:11,870 Aureus ممكن نلاقيها في مستحضرات التجميل قبل أربع 237 00:16:11,870 --> 00:16:16,210 سنوات بالجامعة الإسلامية في بنات كان بحث تخرجهم عن 238 00:16:18,340 --> 00:16:22,600 إنهم يروحوا لكوافير يشوفوا عندهم في المستحضرات 239 00:16:22,600 --> 00:16:26,580 اللي بيستخدموها للعرايس هل فيها Staph Aureus أو لا 240 00:16:26,580 --> 00:16:30,640 فأخذوا عدد مسحة من الإسفنجة من الباودر من شغلات 241 00:16:30,640 --> 00:16:34,080 عندهم كثير وبعد هيك زرعوها على ميديا عملوا عليها 242 00:16:34,080 --> 00:16:37,220 الـ biochemical test for identification وبالفعل طلع 243 00:16:37,220 --> 00:16:41,850 Staph Aureus موجودة في الـ cosmetic products these 244 00:16:41,850 --> 00:16:45,010 products are tested for the presence of coagulase 245 00:16:45,010 --> 00:16:48,570 بص في Staphylococcus aureus راحوا أخذوا مسحات منها عملوا 246 00:16:48,570 --> 00:16:51,870 عليها فحوصات ونموها على ميديات خاصة بالـ Staph 247 00:16:51,870 --> 00:16:57,590 Aureus وبالفعل لقوها موجودة على الشغلات هاي هاي 248 00:16:57,590 --> 00:17:00,690 بقول لي بالنسبة للمكونات بتاعة الميديا الـ Bird 249 00:17:00,690 --> 00:17:05,170 Barker Agar enzymatic digest of casein هيكون فيه 250 00:17:05,170 --> 00:17:09,570 إنزيمات بتكسر مادة الـ casein Beef Extract مستخلص من 251 00:17:09,570 --> 00:17:15,130 اللحوم البقرية Yeast Extract مستخلص من الخميرة 252 00:17:15,130 --> 00:17:19,110 ليثيوم كلوريد جليسين حمض أميني الصوديوم بيروفيت 253 00:17:19,110 --> 00:17:25,770 وكمان في الأجار مهم جدا نعرف إيش الفائدة لكل مكوّن 254 00:17:25,770 --> 00:17:28,990 طبعا هذا كله موجود بالـ slide الثانية الـ Enrichment 255 00:17:28,990 --> 00:17:31,610 أو الـ Supplement هاي شغلات بقضيفها على الميديا 256 00:17:31,610 --> 00:17:35,170 بعد ما تطلع من الـ Autoclave قلنا بنضيف الـ 257 00:17:35,170 --> 00:17:39,930 Chicken، Egg Yolk، صفار البيض وبنضيف 1% بوتاسيوم 258 00:17:39,930 --> 00:17:45,510 تليوريد بالنسبة للـ Enzymatic Digest of Casein 259 00:17:45,510 --> 00:17:49,690 والـ Beef Extract الهدف منهم هدول يعتبروا مصادر 260 00:17:49,690 --> 00:17:55,420 للكربون والنيتروجين للبكتيريا جوا الميديا مصادر 261 00:17:55,420 --> 00:18:00,970 الكربون والنيتروجين في بيرت باركر أجار Yeast 262 00:18:00,970 --> 00:18:04,910 Extract الهدف من الـ Yeast Extract أنه بيزود 263 00:18:04,910 --> 00:18:09,150 البكتيريا بـ B Complex Vitamins الفيتامينات 264 00:18:09,150 --> 00:18:13,170 المختلفة لها الـ B اللي هي B12 وB6 في أنواع ثانية 265 00:18:13,170 --> 00:18:17,770 طيب شو الهدف من الـ B Complex Vitamins؟ Stimulate 266 00:18:17,770 --> 00:18:21,670 bacterial growth بتحفز نمو البكتيريا الـ 267 00:18:21,670 --> 00:18:24,590 Glycine والصوديوم بيروفيت هدول بيحفظوا من نمو 268 00:18:24,590 --> 00:18:29,570 الاستافيلوكوكس طيب، إيش هو الـ Selective Agent في 269 00:18:29,570 --> 00:18:34,170 الـ Bird Park الأجار؟ شيئين، Selective Agent يعني 270 00:18:34,170 --> 00:18:38,830 هدول اثنين بينموا لستافيلوكوكس وبيعملوا Inhibition 271 00:18:38,830 --> 00:18:42,590 لأنواع ثانية غير لستافيلوكوكس فالـ Selective Agent 272 00:18:42,590 --> 00:18:48,090 في الميديا الليثيوم كلوريد 1% بوتاسيوم تليورايد 273 00:18:48,090 --> 00:18:51,830 شو بيعمل؟ Suppressing Growth، لاحظوا بحكي كلمة 274 00:18:51,830 --> 00:18:56,290 Suppressing أو Inhibition بتعمل inhibition أو 275 00:18:56,290 --> 00:18:59,490 suppression لـ الـ organism other than 276 00:18:59,490 --> 00:19:04,650 Staphylococcus يعني بتنمي لـ species المختلفة من 277 00:19:04,650 --> 00:19:07,290 الـ Staphylococcus فقط والبقية بتعملهم inhibition 278 00:19:07,290 --> 00:19:14,110 طيب إيش هو الـ differential agent لـ الـ coagulase 279 00:19:14,110 --> 00:19:16,770 بُست في Staphylococcus المقصود فيها اللي هو أشياء 280 00:19:16,770 --> 00:19:21,260 بتتميز لـ Staphylococcus aureus هيكون في عندي 281 00:19:21,260 --> 00:19:24,740 البوتاسيوم تليوريت قلنا كـ selective 282 00:19:24,740 --> 00:19:28,980 and differential agent explain how قلنا selective 283 00:19:28,980 --> 00:19:32,580 بتعمل inhibition للجميع الأورجينيزم عدا 284 00:19:32,580 --> 00:19:37,240 الاستافيلوكوكس قلنا الاستافيلوكوكس differential 285 00:19:37,240 --> 00:19:40,460 أوريس بتعمل reduction للتليوريت بتحوله إلى مركب 286 00:19:40,460 --> 00:19:44,100 بيعطي اللون الأسود للكلونيز الـ egg yolk emulsion 287 00:19:44,100 --> 00:19:48,490 برضه هاد باعتبره كـ differential agent كيف؟ من خلال 288 00:19:48,490 --> 00:19:52,530 الـ clear zone إنه لو كان نامي عنده الاستفيلوكو 289 00:19:52,530 --> 00:19:55,590 كاتوريت بتطلع الـ enzyme بروح يكسر الـ lecithin اللي في 290 00:19:55,590 --> 00:19:58,310 الـ egg yolk وبالتالي هيظهر الـ clear zone حوالين الـ 291 00:19:58,310 --> 00:20:01,630 colonies الاستفيلوكو القايدة that contain 292 00:20:01,630 --> 00:20:04,690 الـ enzyme هي break down the egg yolk and cause 293 00:20:04,690 --> 00:20:12,380 clear zone around the colonies ممكن كمان نلاحظ 294 00:20:12,380 --> 00:20:18,080 أوباكزون لون معتم حوالين الكلونيز سببه بيكون ناميا 295 00:20:18,080 --> 00:20:21,480 برضه Staph aureus هذه الـ Staph aureus عندها إنزيم 296 00:20:21,480 --> 00:20:25,140 اسمه ليبايز بيروح إنزيم الـ lipase بيشتغل على 297 00:20:25,140 --> 00:20:29,260 الليبيد، بيكسره، بيطلع منه الـ fatty acid هذه الـ 298 00:20:29,260 --> 00:20:32,560 fatty acid بيصيلها precipitation، بتترسب فلما 299 00:20:32,560 --> 00:20:37,850 تترسب، بيصير أوباكزون لون معتم حوالين الكلونيز may 300 00:20:37,850 --> 00:20:43,330 form due to lipase activity هاي بقوللي بالنسبة لها 301 00:20:43,330 --> 00:20:45,670 reduction of potassium telluride is a 302 00:20:45,670 --> 00:20:48,050 characteristic of coagulase positive الـ تفكير 303 00:20:48,050 --> 00:20:53,150 الكوكاي and cause blackening of colonies دائما في 304 00:20:53,150 --> 00:20:58,290 أي ميديا إيش الفائدة من الـ agar هي solidifying 305 00:20:58,290 --> 00:21:03,370 agent هي اللي بتخلي الميديا إنها تتصلم بالنسبة لها 306 00:21:03,370 --> 00:21:09,140 الشغل زي ما قلته بيكون في عندي الفلوسك بتحط فيه 25 307 00:21:09,140 --> 00:21:13,780 مل من الـ milk 225 مل من الـ normal saline بعملهم 308 00:21:13,780 --> 00:21:17,920 mix و بغطيه بالسولفان بعد هيك هيكون في عندي 4 309 00:21:17,920 --> 00:21:23,740 إيتيوبز كل واحد فيه 9 مل normal saline إيه اللي 310 00:21:23,740 --> 00:21:29,740 بدي أعمله بروح أخد 1 مل من الفلوسك لتخفيف 1 لـ 10 و 311 00:21:29,740 --> 00:21:33,570 بروح أحط على أول إيتيوبز هيك أول الـ tube صار تخفيفه 312 00:21:33,570 --> 00:21:37,730 1 لـ 10 لكن الـ total dilution 1 لـ 10 اللي هو 313 00:21:37,730 --> 00:21:43,010 تخفيفه في تخفيف اللي أخدت منه 1 لـ 10 في 1 لـ 10 صار 314 00:21:43,010 --> 00:21:47,050 1 لـ 100 أقصى لـ 2 فبأكتب بالـ marker على الـ tube 10 315 00:21:47,050 --> 00:21:51,090 أقصى لـ 2 قبل اللي أاخد واحد من الـ tube الأول على 316 00:21:51,090 --> 00:21:54,190 الـ tube الثاني لازم أعمل mix عشان أضمن اللي واحد 317 00:21:54,190 --> 00:21:57,670 من اللي أنا أخدته من الـ flask اتوزع في كل الـ tube 318 00:21:58,430 --> 00:22:01,950 شو بعمل؟ بعمل mix من خلال الـ vortex بحطه على الـ 319 00:22:01,950 --> 00:22:04,730 vortex بعد هيك بروح أخد 1 مل من أول تيوب على 320 00:22:04,730 --> 00:22:09,010 التيوب الثاني سارتخفيف للتيوب الثاني كله 10 أسار 321 00:22:09,010 --> 00:22:13,110 ب3 اللي بعده 10 أسار ب4 والأخير 10 أسار ب5 وضروري 322 00:22:13,110 --> 00:22:17,590 أتخلص من 1 مل من آخر تيوب بعد هيك بروح أخد من كل 323 00:22:17,590 --> 00:22:23,350 تخفيف 100 مايكرو بأزرع على الطبق ثم بعد ما أزرع 324 00:22:23,350 --> 00:22:28,610 بحطه في الـ incubator درجة حرارة 37 لمدة 24 ساعة و 325 00:22:28,610 --> 00:22:32,990 بعد هيك بشوف الـ colonies اللي عندي لو كان العدد 326 00:22:32,990 --> 00:22:39,350 واقع من 25 لـ 250 بعوب في القانون لو كان أكثر من 327 00:22:39,350 --> 00:22:43,390 250 بحكي عنه too numerous to count لو كان أقل من 328 00:22:43,390 --> 00:22:48,950 25 بحكي عنه too few to count الـ result examinable 329 00:22:48,950 --> 00:22:53,690 having 25 لـ 250 colonies counting colonies typical 330 00:22:53,690 --> 00:22:58,010 of Staphylococcus aureus طيب، Coagulase بوظيفة 331 00:22:58,010 --> 00:23:02,110 الاستفيلوكوكاي المقصود فيها لـ Staph Aureus الشكل 332 00:23:02,110 --> 00:23:05,270 الـ Coagulase لإلها على الـ media Bird Parker هيكون 333 00:23:05,270 --> 00:23:10,450 Black لونها أسود، سبب اللون الأسود نتيجة إنها عملت 334 00:23:10,450 --> 00:23:14,150 reduction للتليورايت حولته إلى مركب أعطاه اللون 335 00:23:14,150 --> 00:23:18,850 الأسود Shiny، لامع، Convex، الكون يكون شكلها محدب 336 00:23:20,050 --> 00:23:23,710 with entire margin بيكون الحدود لهاي الـ colonies 337 00:23:23,710 --> 00:23:28,690 متساوية بتكون regular لإن في أنواع تانية ممكن تنمو 338 00:23:28,690 --> 00:23:30,970 غير الـ staff course بيكون شكلها irregular أو مثلا 339 00:23:30,970 --> 00:23:34,790 بتكون شكلها وافي أنا بهمني أطلع على الـ colonies اللي 340 00:23:34,790 --> 00:23:40,910 بتكون الحدود لإلها منتظمة بيكون لونها أسود، لامعة 341 00:23:40,910 --> 00:23:45,990 ومحدبة حواليها الـ Clear zone ممكن كمان نلاحظ الـ 342 00:23:45,990 --> 00:23:49,510 opaque zone إيش سبب الـ Clear zone قلنا إنه 343 00:23:49,510 --> 00:23:52,970 البكتيريا عندها الـ lecithinase بتروح تكسر الـ lecithin 344 00:23:52,970 --> 00:23:56,450 حوالين الـ colonies بتعطيهم الـ clear zone إيش سبب 345 00:23:56,450 --> 00:23:59,530 الـ opaque zone البكتيريا بيكون عندها الـ lipase بتروح 346 00:23:59,530 --> 00:24:02,810 تكسر الـ lipid اللي في الـ media بترسب الـ fatty acid 347 00:24:02,810 --> 00:24:08,320 وبالتالي هيصير لون معتم opaque Coagulase نيجاتف 348 00:24:08,320 --> 00:24:12,640 استفيله ككاى المقصود فيها الاستفيله كوكس سترينز 349 00:24:12,640 --> 00:24:18,460 عدى الاستفاريس produce poor or no growth لو بدأت 350 00:24:18,460 --> 00:24:22,180 أجي أنميها على الـ bird parker بقول لي ممكن أنها ما 351 00:24:22,180 --> 00:24:27,860 تنمو أو ممكن أن يكون لها نمو لكن ضعيف طيب لما تنمو 352 00:24:27,860 --> 00:24:33,970 هيكون شكل الكيونس أسود برضه ممكن يكون فيه clear أو 353 00:24:33,970 --> 00:24:37,690 opaque zone لكن هذا نادر لما يتواجد عند الـ 354 00:24:37,690 --> 00:24:39,970 Coagulase Negative في السفينة الكوكاية مع أن 355 00:24:39,970 --> 00:24:44,270 الكلام الـ colonies اللونها أسود ممكن نلاحظها لـ Staph 356 00:24:44,270 --> 00:24:47,570 Aureus و استفيلوكوكس strains other than Staph 357 00:24:47,570 --> 00:24:51,270 Aureus معناه الكلام ما بقدر أجزم أن هاي هي استفيل 358 00:24:51,270 --> 00:24:54,670 الكوكس Aureus لازم أعمل confirmatory test معناه 359 00:24:54,670 --> 00:24:59,050 الكلام الـ Bird Parker أجار هي screening media not 360 00:24:59,050 --> 00:25:04,870 confirmatory media نفس الأشي كمان بيقولّي the 361 00:25:04,870 --> 00:25:08,330 majority of other organisms are inhibited or grow 362 00:25:08,330 --> 00:25:13,980 poorly احنا قلنا بتنمي لستافيلوكوكس بالـ strands 363 00:25:13,980 --> 00:25:17,640 بتاعونها وبتعمل inhibition لجميع الأنواع التانية 364 00:25:17,640 --> 00:25:21,940 غير الاستافيلوكوكس طيب، بقولي هاي الأنواع التانية 365 00:25:21,940 --> 00:25:25,120 بسها inhibition ممكن ما تنمو خالص أو ممكن تنمو، 366 00:25:25,120 --> 00:25:29,320 بيكون نموها poor كمان، فيما لو نمت، هيكون لونها 367 00:25:29,320 --> 00:25:33,310 أسود، light to brown black with no clear or opaque 368 00:25:33,310 --> 00:25:36,350 zone معنى الكلام ممكن لو أشوف اللون الأسود ممكن 369 00:25:36,350 --> 00:25:39,210 تكون أنها أنواع تانية غير الـ Staphylococcus 370 00:25:39,210 --> 00:25:44,030 aureus أو غير الـ Staphylococcus بشكل عام فهي 371 00:25:44,030 --> 00:25:46,950 Screening test وده أشي بيأكد أنها Screening not 372 00:25:46,950 --> 00:25:50,950 confirmatory بالنسبة للصورة اللي عندي بيحكيلي 373 00:25:50,950 --> 00:25:56,670 Black Colonies سببها ناتج أنه البكتيريا عملت 374 00:25:56,670 --> 00:26:00,090 reduction لـ Telluride فبالتالي 375 00:26:01,700 --> 00:26:06,320 عطت مركب لون أسود فلوّنت الـ colonies الـ opaque 376 00:26:06,320 --> 00:26:09,560 zone حوالين الـ colonies سبب الـ opaque zone أن 377 00:26:09,560 --> 00:26:13,900 البكتيريا عندها ليباس كسّر الليبيد فعمل 378 00:26:13,900 --> 00:26:17,460 precipitation للفاتي أسد وهذا عمل الـ opaque zone 379 00:26:17,460 --> 00:26:21,880 الـ clear zone سببها البكتيريا عندها الـ lecithinase 380 00:26:21,880 --> 00:26:26,080 بتكسر الـ lecithin اللي في الـ egg yolk وبتعمل clear 381 00:26:26,080 --> 00:26:30,020 zone طيب، إحنا قلنا إن الـ Bird Parker أجار high 382 00:26:30,020 --> 00:26:35,680 screening media فبالتالي لازم أخد هاي الـ colonies اللي 383 00:26:35,680 --> 00:26:38,920 طلعت معي لونها أسود بدي أتأكد هل هي Staph Aureus 384 00:26:38,920 --> 00:26:43,360 أو إنها نوع ثاني فبروح بعمل confirmatory test 385 00:26:43,360 --> 00:26:47,880 فحوصات تأكيدية أهم فحص بعمله اللي هو من ضمن الـ 386 00:26:47,880 --> 00:26:52,020 biochemical test هو فحص الـ coagulase و هاد الفحص 387 00:26:52,020 --> 00:26:54,940 مسؤول عن التجلد هتاخدوه معاكم بالتفصيل في الـ 388 00:26:54,940 --> 00:26:58,930 essential microbiogen احنا قلنا الـ Staph Aureus هي 389 00:26:58,930 --> 00:27:03,570 الوحيدة من ضمن الـ Staph اللي بيكون عندها إنزيم 390 00:27:03,570 --> 00:27:07,490 الـ Coagulase فبقى أشتغله لو لاقيت موجود معناته 391 00:27:07,490 --> 00:27:11,690 هاي على الأكيد Staphylococcus Aureus ممكن فحص ثاني 392 00:27:11,690 --> 00:27:15,090 اللي هي Staphylococcus الـ Enterotoxin S بروح أدور 393 00:27:15,090 --> 00:27:19,750 على الـ Enterotoxin B هذا بمثابة أنتجن بشوف هل 394 00:27:19,750 --> 00:27:23,650 البكتيريا عندها Enterotoxin B أو لا باستخدام الـ 395 00:27:23,650 --> 00:27:28,810 PCR اللي هي الـ Real-time PCR الشغل التالي التالتة 396 00:27:28,810 --> 00:27:33,950 Latex Agglutination Kits هاد فحص السيرولوجيا كيف 397 00:27:33,950 --> 00:27:37,250 فحص السيرولوجيا هاد بيكون؟ أنا بدي أشوف موجود 398 00:27:37,250 --> 00:27:40,850 Staph Aureus أو لا فهي الـ Staph Aureus بمثابة 399 00:27:40,850 --> 00:27:45,770 أنتجن الشركة المصنعة بتكون محضرالي Antibody لهاد 400 00:27:45,770 --> 00:27:51,730 الانتجن فبيكون في عندي زي هي Card الـ Card هي بروح 401 00:27:51,730 --> 00:27:58,500 أحط عليه الـ Drop من الـ Antibody بيكون عندي colonies 402 00:27:58,500 --> 00:28:01,200 من الـ Staph Aureus اللي بدي أفحص هل هي Staph 403 00:28:01,200 --> 00:28:04,680 Aureus أه أو لا بحطهم مع بعض وبعد كده بالـ 404 00:28:04,680 --> 00:28:08,100 Applicator بأمزجهم بعملهم Mix و Rotation بحركهم 405 00:28:08,100 --> 00:28:13,200 بإيدي بأستنى عليهم فترة لو ظهر عندي Agglutination 406 00:28:13,200 --> 00:28:18,410 أو ظهر على شكل حبيبات معناته الـ Antigen لنفس الـ 407 00:28:18,410 --> 00:28:22,190 Antibody ارتبطوا في بعض فطل عندي حبيبات أو 408 00:28:22,190 --> 00:28:26,510 agglutination طيب لو كان عندي مثلا استفيله كوكاس 409 00:28:26,510 --> 00:28:30,050 Epidermidis روحت أنا حطيته Antibody للـ Staph 410 00:28:30,050 --> 00:28:33,570 Aureus عملتلهم mix استنيت عليهم أكيد مش راح يطلع 411 00:28:33,570 --> 00:28:38,050 معي هذا الـ agglutination ليش؟ لأن الـ Antibody مش 412 00:28:38,050 --> 00:28:43,730 لنفس الـ Antigen في ميديا ثانية عندنا برضه للـ staff 413 00:28:43,730 --> 00:28:47,330 areas اسمها Manitoulin Salt Agar الـ media هي أنا 414 00:28:47,330 --> 00:28:50,530 شرحتها المعمل الماضي اللي كنت بحكي فيه عن أهمية 415 00:28:50,530 --> 00:28:55,470 أنه نضبط الـ pH للـ food Manitoulin Salt Agar 416 00:28:55,470 --> 00:28:59,610 بنرمزلها MSA هي الـ media برضه selective and 417 00:28:59,610 --> 00:29:03,430 differential media Selective medium used for 418 00:29:03,430 --> 00:29:06,530 isolation of pathogenic Staphylococcus يعني 419 00:29:06,530 --> 00:29:10,270 Selective انتقائية للـ Staphylococcus بتنمي الـ 420 00:29:10,270 --> 00:29:13,330 Staphylococcus وبتعمل Inhibition للأنواع التانية 421 00:29:13,330 --> 00:29:17,870 غير الـ Staphylococcus the medium contain Mannitol 422 00:29:17,870 --> 00:29:22,550 Phenol Red Indicator 7.5% Sodium Chloride هذه 423 00:29:22,550 --> 00:29:29,100 مكونات الميديا اسمها مانيتول Salt Agar فيها مانيتول 424 00:29:29,100 --> 00:29:33,560 هو بمثابة سكر عندها الـ Salt أهم شيء ما يميزها 425 00:29:33,560 --> 00:29:36,920 فيها high concentration of salt 7.5% احنا قلنا 426 00:29:36,920 --> 00:29:40,980 الطبيعي البكتيري بتتحمل 85% من 100% هذا كان الـ 427 00:29:40,980 --> 00:29:48,360 normal saline NaCl هاي 7.5% NaCl فهذا 7.5% NaCl هو 428 00:29:48,360 --> 00:29:54,540 selective agent فبيقول لي اللي بتحمل التركيز العالي 429 00:29:54,540 --> 00:29:59,480 هاد من الملح بيعيش اللي ما بتحمل فبيسيله 430 00:29:59,480 --> 00:30:04,000 Inhibition فمعناته 7.5% NaCl هو selective agent 431 00:30:04,000 --> 00:30:07,140 بينمي الاستفيلوكوكس وبيعمل Inhibition لأنواع 432 00:30:07,140 --> 00:30:12,020 ثانية أخرى دان استفيلوكوكس طيب بالنسبة لـ 433 00:30:12,020 --> 00:30:17,480 Mannitol هاد differential agent نمت عندي أنواع 434 00:30:17,480 --> 00:30:23,630 مختلفة من الاستفيلوكوكس تمام؟ نمت عندي أكثر من 435 00:30:23,630 --> 00:30:27,690 نوع كيف بدي اميزهم عن بعض من خلال مين منهم بتعمل 436 00:30:27,690 --> 00:30:33,190 fermentation وبتغير لون الـ pH Indicator فبقول لي 437 00:30:33,190 --> 00:30:37,450 الـ Staph Aureus فقط هي اللي بتعمل fermentation 438 00:30:37,450 --> 00:30:41,490 لسكر المانيتول دائما أي fermentation لأي سكر 439 00:30:41,490 --> 00:30:45,330 بيطلع عنه acid زي ما قلنا في المعمل الماضي الـ 440 00:30:45,330 --> 00:30:50,350 Medium فيها pH Indicator اسمه Phenol Red لون 441 00:30:50,350 --> 00:30:54,970 الميديا بالأساس بيكون لونها أحمر لو البكتيريا عملت 442 00:30:54,970 --> 00:30:59,010 fermentation للسكر، طلعت منه acid، يعني هيقل الـ 443 00:30:59,010 --> 00:31:03,710 pH، الـ acid هيلون الميديا إلى لون أصفر، لما يصير 444 00:31:03,710 --> 00:31:06,290 لون الميديا أصفر، لون الـ colonies أصفر، معناته هي 445 00:31:06,290 --> 00:31:10,250 البكتيريا عملت fermentation طيب، لو البكتيريا ما 446 00:31:10,250 --> 00:31:14,510 بتعمل fermentation لـ mannitol، مش راح تكون acid، 447 00:31:14,510 --> 00:31:17,570 هتظل alkaline، alkaline معناه اللون هيظل أحمر 448 00:31:21,130 --> 00:31:25,670 تمام يعني selective agent 7.5% NaCl الـ 449 00:31:25,670 --> 00:31:28,670 differential كله من الـ Mannitol و الـ pH 450 00:31:28,670 --> 00:31:33,130 Indicator مهم أنكم تكونوا عارفين الـ Phenol Red 451 00:31:33,130 --> 00:31:37,410 هو الـ pH Indicator اللي بنستخدمه في الـ MSA إيش هو 452 00:31:37,410 --> 00:31:40,690 selective agent؟ high salt concentration شو بتعمل؟ 453 00:31:40,690 --> 00:31:43,150 inhibit the growth of most bacteria other than 454 00:31:43,150 --> 00:31:47,670 Staphylococci the high salt content doesn't kill 455 00:31:47,670 --> 00:31:51,310 gram-negative bacteria احنا قلنا ما بتعمل kill، ما 456 00:31:51,310 --> 00:31:54,030 بتعمل death، إنها بتعمل inhibition or suppressing 457 00:31:54,030 --> 00:31:58,310 يعني بتثبط من نمو البكتيريا، بتظل موجودة لكن ما 458 00:31:58,310 --> 00:32:03,470 بتنمو طيب On Mannitol salt agar, pathogenic 459 00:32:03,470 --> 00:32:06,450 Staphylococcus aureus produce small colonies كيف 460 00:32:06,450 --> 00:32:08,950 بيكون شكل الـ colonies في الـ ... في الـ Mannitol salt 461 00:32:08,950 --> 00:32:13,650 agar؟ بتكون صغيرة، الحجم صغير وبيكون حواليها 462 00:32:13,650 --> 00:32:17,890 yellow zones إيش سبب الـ yellow zones؟ سببها إن 463 00:32:17,890 --> 00:32:20,890 البكتيريا عملت fermentation للمانيتول فغيرت لون الـ pH 464 00:32:20,890 --> 00:32:24,650 إلى اللون الأصفر السبب في هذا التغيير في اللون 465 00:32:24,650 --> 00:32:27,590 الأصفر هو أن الـ Staph Aureus فرمنت المانيتول 466 00:32:30,900 --> 00:32:36,600 Change the color للبيئة إلى اللون yellow أدرس تفيلو 467 00:32:36,600 --> 00:32:40,440 كوكس don't ferment Mannitol احنا قلنا بس لـ Staph 468 00:32:40,440 --> 00:32:42,680 Aureus هي بتعمل fermentation Staph Aureus 469 00:32:42,680 --> 00:32:45,620 Epidermis ما بتعمل fermentation للمانيتول لكنها 470 00:32:45,620 --> 00:32:50,600 بتتحمل إنها تنمو على 7.5% NaCl هلاحظ في Colonies 471 00:32:50,600 --> 00:32:53,980 لكن هاي الـ Colonies ما تلونت للون أصفر ليش؟ لأنها 472 00:32:53,980 --> 00:32:58,460 ما بتعمل fermentation للمانيتول بالتالي حيظل لون 473 00:32:58,460 --> 00:33:01,800 الـ colonies و لون الـ media red to pink the growth 474 00:33:01,800 --> 00:33:04,340 of other types of bacteria is generally inhibited 475 00:33:04,340 --> 00:33:08,000 حيصير Inhibition لنمو الأنواع الثانية غير الـ 476 00:33:08,000 --> 00:33:12,960 Staphylococcus فاللي حيصير عندي لـ Staph aureus هل 477 00:33:12,960 --> 00:33:16,980 هي بتحمل 7.5% NaCl أهم ما يميز لـ Staph aureus 478 00:33:16,980 --> 00:33:21,460 إنها بتحمل 7.5% NaCl برضه كمان عندها Coagulase 479 00:33:21,460 --> 00:33:25,690 عندها الـ DNase وعندها الـ Enterotoxin بتعمل food 480 00:33:25,690 --> 00:33:28,470 poisoning هذه كلها شغلات مميزة للـ Staph aureus 481 00:33:28,470 --> 00:33:32,490 كمان هي من ضمن الـ gram positive بتعمل 482 00:33:32,490 --> 00:33:35,510 fermentation برضه للمانيتول أو هذا كمان ميزه 483 00:33:35,510 --> 00:33:39,550 لها لما تعمل fermentation هيصير حواليها yellow 484 00:33:39,550 --> 00:33:42,770 zone هيتلون الـ media لون أصفر بدل ما هي لون أحمر 485 00:33:42,770 --> 00:33:46,090 الاستفيلوكوكس ايبيديرملس معناته هي من ضمن ال 486 00:33:46,090 --> 00:33:49,150 Staph معناته بتتحمل هي الـ concentration العالية 487 00:33:49,150 --> 00:33:53,130 NaCl لكن ما بتعمل fermentation للمانيتول وبالتالي 488 00:33:53,130 --> 00:33:57,870 هيظل لونها أحمر Micrococcus luteus هي جرام 489 00:33:57,870 --> 00:34:01,810 positive لكن مش من ضمن الـ Staph Aureus مش من 490 00:34:01,810 --> 00:34:08,670 ضمنها معناته مش هتتحمل الـ concentration لـ الـ salt 491 00:34:08,670 --> 00:34:12,750 معناته مش راح تنمو خالص مش هلاحظ أي Colonies عندي 492 00:34:12,750 --> 00:34:17,850 فبالتالي برضه ما بتعمل fermentation للمانيتول 493 00:34:17,850 --> 00:34:23,170 ليش؟ لأنها ما بتنمو على high الـ medium هي عند كيف 494 00:34:23,170 --> 00:34:26,290 بيكون شكل الاستفيلوكوكس اوريوس الاستاف قلنا 495 00:34:26,290 --> 00:34:29,370 هتنمو على هاي الميديا Mannitol Salt Agar لأنها 496 00:34:29,370 --> 00:34:32,750 بتحمل 7.5% NaCl كمان بتعمل fermentation 497 00:34:32,750 --> 00:34:36,290 للمانيتول هتغير اللون إلى لون الأصفر الاستفيلوكوكس 498 00:34:36,290 --> 00:34:40,090 الكوكس Epidermis هي من ضمن الاستاف معناته هتنمو 499 00:34:40,090 --> 00:34:45,030 لكن ما بتعمل fermentation هيظهر اللون أحمر Micro 500 00:34:45,030 --> 00:34:49,170 coccus Luteus هي مش من ضمن الاستاف لا هتنمو ولا 501 00:34:49,170 --> 00:34:54,260 هتعمل fermentation وهيك بنكون خلصنا المعمل