السلام عليكم ورحمة الله وبركاته معملنا بعنوان
Enumeration of Staphylococcus Oreases in Foods
هنعدل Staph Oreases في عينة الملك معناته هنشتغل
نفس الشغل المرة الماضية اللي كان العنوان Arabic
Clinic Count أو Total Viable Count لكن الإختلاف
هيكون فقط في الميديا المستخدمة المعمل الماضي كنت
بدي أعد جميع أنواع البكتيرا بغض النظر عن نوعها
لهيك كنا بنستخدم General Mediaزي للـ Nutrient Agar
مافيها Selective Agent مافيها أي Inhibitors اليوم
معنية بعادلة Staff Aureus معناته الميديا هتكون
Selective Selective Media يعني Select the organism
that will grow on itبتنطقي أو بتختار إيش هي ال
organism اللي بإمكانها تنمو على هذه ال media و
بتعمل inhibition لأنواع تانية أنا بحكي بتعمل
inhibition، ما بتعمل death، إيش المقصود فيها
inhibition؟ Inhibition يعني بتثبت نمو البكتيريا
كمان في المعمل هنسمع كلمة differential media أو
differential agent differential معناته بتميز ع
سبيل المثال لو عندى media بتنمي لستافيلو ككس بجميع
ال species لإلها و بتعمل inhibition لأنواع تانية
طب أنا عندى لستافيلو ككس فيه عندي arias لستافيلو
ككس epidermidis طب كيف بدى أميز لستافيو arias عن
ال epidermidis هى بسميها ال differential إشي بيميز
في المقصود فيها it makes the organism different ال
organism اللي أنا بأدور عليه بتخليه مختلف عن
التاني و ليكن مثلا من خلال اللون بأميز بينهم مثلا
إذا أعطتني لون أصفر على media MSA معناته هاي Staph
Aureus إذا أعطتني لون أحمر معناته هاي
Staphylococcus Epidermis و هكذافاللي هيكون عند
الإختلاف فقط في الـ media يعني بدي أجيب إفلاسك بدي
أحط عليها 25 مل من عينتي بنشتغليهم على الـ milk
الـ milk بحاجة إلى تخفيف قولنا ما بنفع أخده وأسرع
مباشرة على الطبق لإنه هيك هيأتيني two numerous to
count شو بعمل؟ بعمل أول إشي تخفيف 1 ل 10 كيف بتعمل
تخفيف 1 ل 10 و أنا عندي عينة 25؟ بحتاج لـ 225 مل
من الـ normal salineتمام بعملها mix بعدين بيكون في
عندي أربعة من ال tubes كل واحد فيه تسعة mil normal
saline بيروح أعمالهم cereal dilution باخد واحد mil
من ال flask على أول tube بعمل mix واحد mil من أول
tube على التاني وعلى التالت وعلى الرابع في الأخير
بتخلص من واحد milهذا هو بيكون شغلنا لليوم وين
بيكون موجود لاستفيد الكوكس اوريس؟ بيقول بيكون
موجود في الـ Naturally Contaminated Meats في
اللحوم، في الـFish، في الـPoultry، الدواجن، في
الـVegetables وفي الـCereals المقصود فيها الحبوب
برضه بيكون موجود في الـDairy Products هي منتجات
الألبان وبرضه Artificially Contaminated Foods كمان
بقدر أعدالـ Staphylococcus إذا كانت موجودة في الـ
food في الـ food ingredient مكونات الطعام في الـ
environmental samples عينات من البيئة certain
Staphylococci produce enterotoxin مش كل
Staphylococcus بتطلّق التكسين certain في نوع معين
منها، السلالات معينة من الـ Staphylococcus aureus
strains معينة قلنا الـ Staph، الـ Staphylococcus
هاي اللي بسميها الـ genus aureus، الـ speciesاللي
بعد الارياز هيكون strains فبقول لي في strains معين
مستفيل الككاسارياز بتطلع الـ Enterotoxin إيش
المقصود بالـ Enterotoxin؟ هو التكسين شغله بيكون في
الانتستن Enterotoxin شغله في الانتستن بيعمل food
poisoning فبالتالي بقدر أسمي هاي الـ strains
spoilage organismهذا التعريف معاكم في أول معمل،
إيش هو الـ Spoilage Organism؟ اللي هو الـ organism
who create undesirable characteristics in food،
بيعطينا خصائص غير مرغوب فيها في الـ food من ناحية
اختلاف الـ texture في الـ smell، في الـ الطعم، طيب
احنا عارفين في عندنا نوعين من التكسين وهذا مرة
معاكم في الـEssential Microbiology أنواع التكسين
بتطلعها البكتيريا إما إنها تكون Endotoxin أو
Exotoxin إيش الإختلاف بيناتهم؟ الـEndotoxin بتطلع
البكتيريا لما تموت until death of cell، بتموت
الخلية، بعدين بتطلع منها التكسين، فهذا بنسميه
Endotoxin من أي نوع من البكتيريا بتطلع
الـEndotoxin، بتطلع milligram، negative bacteria
بتكون مصبوغة باللون الأحمر طيب الـ Exotoxin بتطلع
و الخلية لسه عايشة viable cell خلية على قيد الحياة
اللي بيصير الخلية بتضلها تتكاثر تتكاثر بتصل لعندي
عدد معين أو concentration معين بعد هيك بتروح تطلع
التكسينالغالب اللي بيطلع الـ Exotoxin هي الـ Gram
-positive بكتيريا طيب الـ Enterotoxin هاد بدي أحطه
لأي نوع من الاندو لإكزو هاد بيكون من ضمن الـ
Exotoxin لإنه قلنا هاد بيطلع من الـ Staph aureus
والـ Staph aureus هي الـ Gram-positive فبالتالي
الـ Enterotoxin هو من ضمن الـ Exotoxin this
ability to produce Enterotoxin is limited to those
strainsthat are coagulase positive فبقول ليه؟ أي
نوع من أنواع الاستفادة من الكوكسا اللي بتطلع
الانتروتوكسين هي اللي بتكون لها coagulase لما بدي
أجي أعمل biochemical testفأفحص هل هي البكتيريا
عندها Coagulase أو لأ لو لقيت عندها الـ Coagulase،
معناته high، بتطلع كمان الـ Enterotoxin تاني،
الشيء اللي لسه فيه الكوكسوريس عندها أنزيم اسمه
nucleus، TNS هو Heat Stable Nucleus Heat Stable
يعني بتحمل درجات الحرارة العالية لاحظوا فيه اختلاف
بين كلمة Heat Stable وبين Heat Labile Heat Labile
معناته بتكسر مع درجات الحرارة العاليةفاللي صار
عندى لحد تلان لستaphylococcus aureus بتطلع الـ
Enterotoxin اللي هو من ضمن الـ Exotoxin بتعمل food
poisoning فهي spoilage organism عندها Coagulase و
عندها TNA أو Heat Stable Nuclease this method
determines the presence of Staph Aureus كيف بدنا
نحدد أو بدنا نعد وجود Staph Aureus من خلال
ablating known quantities of food sampleVolume
Blade يعني أداش باخد volume من ال tubes من كل
تخفيف و بروح أحطه على الطبق اللي فيه ال media
بتحفظ them all ال stuff or استعمل انهي باشي
للانواع التانية بعد ما أزرعهوراح أحطه في الـ
Incubator After incubation, presumptive
Staphylococcus albicans are selected and subjected
to confirmatory tests بيقول لي okay أنا هاي بحط
أول إشي ميديا وبنمي عليها البكتيريا اللي بطلع
عندنا ما بكون متأكدة 100% إنه هاي على الأكيد
Staphylococcus aureusبحاجة إنه أعمل confirmatory
test فحص تأكيدي زي مثلا Astrology زي مثلا ال
biochemical test فلمّا أزرحها على الطبق لسه هاد
أول مرة بنسميها pre-sumptive test pre-sumptive
يعني screening test مش متأكدة 100% فبروح بعمل
selection لهيئو الكيونيز و بأشتغل عليها
confirmatory test from the result of this test بعد
ما أشتغل عليها و من النتائج بقدر أعد listها في
Aries Perigram or MELمن خلال القانون Concentration
بساوي N على S في D الـ N هو الـ number of colonies
الـ S هو الـ volume بليتد أداش باخد volume من كل
التيوب و بحطه على الطبق شرط أساسي تكون الوحدة
بالمل الـ D هي ال dilution فال concentration
للبكتيرياهتكون الوحدة اللي له كونه forming unit
CFU بير إجرام أو بير مل حسب الحالة الفيزيائية
لالمادة لو بحكي مثلا عن سلطة هتكون بير إجرام لو
بحكي عن ملك بير ملتمام The numbers present may
indicate a potential for the presence of
enterotoxin إيش بقدر أستفيد من ال concentration
اللي طلع معي بعد ما عوضت في القانون بروح أقارن
طبعا ال standards المعايير العالمية بتكون حطالي
قيمة لو زاد عدد ال concentration إن البكتيريا high
عن عدد had معناته البكتيرياهتطلع الـ Enterotoxin
معناته هتعمل food poisoning وهذا ال food غير صالح
للهيوم ال consumption فبروح بقارن ال concentration
اللي طلع معاه مع ال concentration اللي حطاه ال
standards و بقى أشوف هل في Enterotoxin أو لا لو
العدد أكتر من اللي حطته ال standard معناته في
Enterotoxin لو أقل بكتير معناته لأ مافيها
Enterotoxin و بتالي بقدر أكل من ال foodكمان شغل
تاني بقدر استفيدها من خلال الـ concentration لـ
البكتيريا also indicate a lack of adherence to
good hygienic practice بشوف إذا كان فيه التزام
بمعايير النظافة أو لأ كيف؟ شو علاقة معايير النظافة
بالـ Staph aureus؟ بقولي الـ Staph aureus موجودة
في جسم الإنسان بشكل طبيعي على ال skinوفي النازل
cavity في تجويف الأنف فعسابي المثال لو كنت أنا في
مصنع ل .. لليوغورت مثلا روحت بدي أشوف قداش فيها
staff areas لقيت أن ال staff areas ال
concentration في هذا ال food أعلى بكتير من اللي
حطته ال standard معناته الشخص هذا اللي كان بيشتغل
ما كان لابس لـ gloves أو صار فيه تلامس بين الجلد
وبين الـ food فراحت انتقلة الـ Staph Aureus من
جلده لأ الفود فمعناته ما كان فيه اتزام معيار
النظافة طيب، في عندي ميديات بقدر استخدمها لانمي
عليها الـ Staph Aureus و بعد هيك أعد الكولونز و
أطبق عليها ال confirmatory test في ميديا اسمها ال
Bird Barker AgarBird Barker Agar هي تعتبر ميديا
selective and differential media selective قلنا
بتعمل select لأنواع معينة بحيث أنها تنمو علي هذه
الميديا وبتعمل inhibition لأنواع المتبقية
differential لو نام عندي أكتر من نوع تقدر أنها
تتميز بين أنواع المختلفة طيب ال bird barker agar
بيقوللي هي ابتجيلي على شكل powder ال bottles بيكون
جواته powder بقرا ال instructionاللي على الـ
bottles بقى أشوف قداش بحتاج إلى powder قداش بحط
عليه distilled water كلهم بحطهم في الـ flask على
الـ hot plate وبعدين بحطهم في الـ autoclave for
sterilization لحظة في كلمة «base» المقصود بالكلمة
«base» أنه في شغلات بدي أضيفها على الـ media بعد
ما تطلع من التعقيم
تمام طب ليش مو أنا عمالي بأحضر الـ media بإمكاني
أحط الشغلات هاي معها و أدخلهم كلهم في الـ
autoclave و كلهم هي كانوا بتعقم؟ بقوللي لأ أول ما
تشوف كلمة base معناته هاي المواد بدي أضيفها بعد ما
تطلع ال media من التعقيم لو ضفتها ودخلتها في
التعقيم في الـ autoclave هتكسر المواد هاي تمام هاي
المواد اللي بنضيفها على ال media بعد ما تتعقم
بنسميها الـ supplementفالـ Sublimates اللي بنضيفها
في ال Bird Barker Agar ميديا أول اشي هنضيف ال egg
يوك صفار البيض صفار البيض شو دوره في ال ميديا هاي
بقول لصفار البيض زي ما هو معروف فيها مادة اسمها
الليستين فلو اللي كان نمت عند Staph Aureus فال
Staph Aureus عندها أنزيم اسمه الليستينازالليستينيز
يعني إنزين بيكسّر الليستين لما يكسّر الليستين
بيصير حوالين الـcolony's clear zone منطقة بتكون
clear هي عند الميديا بقصبها على الطبق من ضمن
مكوناتها الـegg yolk اللي هو صفار البيض بقضيفه بعد
ما تطلع الميديا من الـautoclave صفار البيض من ضمن
مكوناته الليستين فطلعت عند الـstaph aureus على شكل
colonyالكوني هي أو ان البكتيريا هي عندها انزيم
بتروح تطلع هات الانزيم حوالين الكوني فبروح بكسر
الاتنين اللي حوالين الكوني فبلاحظ فيه منطقة بتكون
عاملة زي الهالو وبتكون منطقة clear هذه أول مادة
بقضيفها ال egg yolk المادة التانية بقضيفها على ال
media بقى ان تطلع من ال Autoclave 1% بتاسيوم
تليوريد شو الهدف من ال بتاسيوم تليوريد؟الـ
Potassium Telluride يُعتبر كـ Selective and
Differential Agent Selective Agent عارفين كيف إنها
بتنمي تسمح إنه اللي يلمع هاي الميديا فقط لـ Staff
Aureusالـ Staphylococcus وبتعمل Inhibition للأنواع
التانية غير الـ Staphylococcus هي معناها Selective
Agent طيب، كيف هي الـ Differential Agent؟ كيف
بتميز الـ Staph Aureus عن غيرها من أنواع أو الـ
Species من الـ Staphylococcus؟ بقول لي الميديا
فيها 1% بتاسيوم تليوريد لو اللي كان نامي عندى هي
Staph Aureusفالـ staff أو الرسم يجب تعمل reduction
للـ tell you right اللي في الميديا reduction
اختزاللمّا تختزل الـ Telluride بتروح تكون مركّب
لونه أسود فاللون الأسود هذا بلون الـ colonies إلى
لون أسود فلو لاقيت ال colonies لونها أسود معناته
عندي بكتيريا staphylococcus aureus راحت اشتغلت على
الـ Telluride اللي في الـ media عملتله reduction
حولت الـ Telluride إلى مركّب لونه أسود وبالتالي
ميزات الأنواع اللي نامي عندي على الطبق من خلال
اللون«بيرت باركر أجار بيز» «it's a selective» حطوا
جانبها كمان «and differential media»
for isolation and presumptive identification طيب،
إيش يعني presumptive؟ معناته الـbert barker ما
بقدر أجزم إن هاي اللي نمت عندى هي استفيله كوكس
اوريس لازم أعمل confirmatory test فالbert barker
أجار هي screening media screening يعني بحاجة أعمل
بعد كده confirmatory test أعمل biochemical أو بعمل
serologyتمام فهي Presumptive Identification of
Coagulase Positive Staphylococci أول ما تشوفوا
Coagulase Positive Staphylococci عطول هنعرف
المقصود فيها Staphylococcus aureus لأن هي الوحيد
اللي عندها Coagulase enzymeهذه الميديا استخدمت
كثيرًا لتكتشف أستافيلو ككس أورياس هذه الميديا
بستخدمها لأكشف عن الـ Staph Aureus الموجودة سواء
بالطعام، بالتجارب، بالمثالات البيئية
طيب Coagulase Positive Staphylococci المقصود فيها
زي ما قولنا الـ Staph Aureus can grow and
reproduce in cosmetic products برضه الـ Staph
Aureus ممكن نلاقيها في مستحضرات التجميل قبل أربع
سنوات بالجامعة الإسلامية في بنات كان بحث تخرجهم عن
إنهم يروحوا لكوافيرات يشوفوا عندهم في المستحضرات
اللي بيستخدموها للعرايس هل فيها Staph Aureus أو لا
فأخدوا عد مسحة من الاسفنجة من الباودر من شغلات
عندهم كتير وبعد هيك زرعوها على ميديا عملوا عليها
ال biochemical test for identification وبالفعل طلع
Staph Aureus موجودة في ال cosmetic productsthese
products are tested for the presence of coagulase
بص في استفيري كوكاي راحوا أخدوا مسحات منها عاملوا
عليها فحوصات و نموها على ميديات خاصة بالـ Staph
Aureus و بالفعل لقوها موجودة على الشغلات هاي هاي
بقولي بالنسبة للمكونات بتاعة الميديا ال Bird
Barker Agar enzymatic digest of casein هيكون فيه
أنزمات بتكسر مادة ال caseinBeef Extract مستخلص من
اللحوم البقرية Yeast Extract مستخلص من الغميرة
ليثيوم الكلورايد لجليسين حمض أمين السوديوم بيروفيت
وكمان في الأجار مهم جدا نعرف أش الفايدة لكل مكوّن
طبعا هاد كله موجود بال slide التانيةالـ Enrichment
أو الـ Supplement هاي شغلات بقضيفها على الميديا
بعد ما تطلع من الـ Autoclave قولنا بنضيف الـ
Chicken، Egg Yolk، سفارق البيض و بنضيف 1% بوتاسيوم
تليوريد بالنسبة للـ Enzymatic Digest of Casein
والـ Beef Extract الهدف منهم هدول يعتبروا مصادر
للكاربون والنيتروجين للبكتيريا جوا الميديامصادر
الكربون والنيتروجين في بيرت باركر أجارYeast
Extract الهدف من الـ Yeast Extract أنه بيزود
البكتيريا بـ B Complex Vitamins الفيتامينات
المختلفة لها الـ B اللي هي B12 وB6 في أنواع تانية
طيب شو الهدف من الـ B Complex Vitamins؟ Stimulate
bacterial growth بتحفظ من نمو البكتيريا الـ
Glycine والسوديوم بيروفيت هدول بيحفظوا من نمو
الاستافيلوكوكسطيب، إيش هو الـ Selective Agent في
الـ Bird Park الأجار؟ شغلتين، Selective Agent يعني
هدول أتنين بينموا لستفيلوا ككس وبيعملوا Inhibition
لأنواع تانية غير لستفيلوا ككس فالـ Selective Agent
في الميديا الليثيوم إكلورايد 1% بوتاسيوم تليورايد
شو بيعمله؟ Suppressing Growth، لاحظوا بحكي كلمة
Suppressing أو Inhibitionبتعمل inhibition أو
subversion لـ ال organism other than
Staphylococcus يعني بتنمي لل species المختلفة من
ال Staphylococcus فقط والبقية بتعملهم inhibition
طيب إيش هو ال differential agent ل ال coagulase
بُست في Staphylococcus المقصود فيها اللي هو أشياء
بتتميز لStaphylococcus aureusهيكون في عندي
البوتاسيوم تليوريت البوتاسيوم قولنا كـ selective
and differential agent explain how قولنا selective
بتعمل inhibition للجميع الأورجينيزم عدا
الاستافيلوكوكس differential قولنا الاستافيلوكوكس
اوريس بتعمل reduction للتليوريت بتحوله إلى مركب
بيعطي اللون الأسود لالكلونز ال egg yolk emulsion
برضه هاد باعتبره ك differential agent كيف؟من خلال
الـ clear zone إنه لو كان نامي عنده الاستفيلوكو
كاتوريت بتطلع الاسثنايز بروح يكسر الاسثين اللي في
ال egg yolk وبالتالي هيظهر ال clear zone حوالين ال
colonists الاستفيلوكو القايدة that contain
الاسثنايز هي break down the egg yolk and cause
clear zone around the colonistsممكن كمان نلاحظ
أوباكزون لون معتم حوالين الكلونز سببه بيكون ناميا
برضه Staph aureus هذه ال Staph aureus عندها أنزيم
اسمه ليبايز بيروح أنزيم ال ليبايز بيشتغل على
الليبد، بيكسره، بيطلع منه ال fatty acid هذه ال
fatty acid بيصيلها precipitation، بتترسب فلما
تترسب، بيصير أوباكزون لون معتم حوالين الكلونزmay
form due to lipase activity هاي بقوللي بالنسبة لها
reduction of potassium telluride is a
characteristic of coagulates positive التفكير
الكوكاي and cause blackening of kidneys دائما في
أي ميديا إيش الفائدة من الأجار هي solidifying
agent هي اللي بتخلي الميديا إنها تتصلم بالنسبة لها
الشغل زي ما قلتهيكون في عندى الفلوسك بتحط فيه 25
مل من الـ milk 225 مل من الـ normal saline بعملهم
mix و بغطيه بالسولفان بعد هيك هيكون في عندى 4
إيتيوبز كل واحد فيه 9 مل normal saline إيه اللي
بدي أعمله بروح أخد 1 مل من الفلوسك لتخفيف 1 ل 10 و
بروح أحط على أول إيتيوبزهك أول الـ tube صار تخفيفه
1 ل 10 لكن الـ total dilution 1 ل 10 اللي هو
تخفيفه في تخفيف اللي أخدت منه 1 ل 10 في 1 ل 10 صار
1 ل 110 أقصى ل 2 فبأكتب بال marker على ال tube 10
أقصى ل 2 قبل اللي أاخد واحد من ال tube الأول على
ال tube التاني لازم أعمل mix عشان أضمن اللي واحد
من اللي أنا أخدته من ال flask اتوزع في كل ال tube
شو بعمل؟ بعمل mix من خلال الـ vortex بحطه على الـ
vortex بعد هيك بروح أخد 1 مل من أول تيوب على
التيوب التاني سارتخفيف للتيوب التاني كله 10 أسار
ب3 اللي بعده 10 أسار ب4 والأخير 10 أسار ب5 وضروري
أتخلص من 1 مل من آخر تيوب بعد هيك بروح أخد من كل
تخفيف 100 مايكرو بأزرع على الطبق ثم بعد ما أزرع
بحطه في الـ incubator درجة حره 37لمدة 24 ساعة و
بعد هيك بشوف ال colonies اللي عندي لو كان العدد
واقع من 25 ل 250 بعوب في القانون لو كان أكتر من
250 بحكي عنه too numerous to count لو كان أقل من
25 بحكي عنه too few to count ال result examinably
having 25 ل 250 colonies counting colonies typical
of Staphylococcus aureusطيب، Coagulase بوظيفة
استفيل الكوكايل المقصود فيها لـ Staph Aureus الشكل
الـ Coagulase لإلها على الميديا Bird Barker هيكون
Black لونها أسود، سبب اللون الأسود نتيجة إنها عملت
reduction للتليورايت حولته إلى مركب أعطاه اللون
الأسود Shiny، لامع، Convex، الكون يكون شكلها محدب
with entire margin بيكون الحدود لهاي الـ Q&A
متساوية بتكون regular لإن في أنواع تانية ممكن تنمو
غير ال staff course بيكون شكلها irregular أو مثلا
بتكون شكلها وافي أنا بهمني أطلع على الـ Q&A اللي
بتكون الحدود لإلها منتظمة بيكون لونأسود، لامعة
ومحدبة حواليها الـ Clear zone ممكن كمان نلاحظ الـ
opaque zone إيش سبب الـ Clear zone قلنا إنه
البكتيريا عندها الاثيثينايز بتروح تكسر الاثيثين
حوالين ال الكليناز بتعطيهم ال clear zone إيش سبب
ال opaque zone البكتيريا بيكون عندها ال light base
بتكسر ال lipid اللي في ال media بترسب الفاتي أسد
وبالتالي هيصير لون معتم opaqueCoagulase نيجاتف
استفيله ككاى المقصود فيها الاستفيله ككس استرينز
عدى الاستفاريس produce poor or no growth لو بدأت
أجي أنميها على ال bird parker بقول لي ممكن أنها ما
تنمو أو ممكن أن يكون لها نمو لكن ضعيف طيب لما تنمو
هيكون شكل الكيونس أسود برضهممكن يكون فيه clear أو
back soon لكن هذا نادر لما يتواجد عند الـ
Coagulase Negative في السفينة الكوكاية مع أن
الكلامالـ cones اللونها أسود ممكن نلاحظها لـ Staph
Aureus وستفيل الككس strains other than Staph
Aureus معناه الكلام ما بقدر أجزم أن هاي هي استفيل
الككس Aureus لازم أعمل confirmatory test معناه
الكلام الـ Bert Barker أجار هي screening media not
confirmatory media نفس الأشي كمان بيقولّي the
majority of other organisms are inhibited or grow
poorly احنا قلنابتنمي لستافيلوككس بالـ strands
بتاعونها وبتعمل inhibition لجميع الأنواع التانية
غير الاستافيلوككس طيب، بقولي هاي الأنواع التانية
بسها inhibition ممكن ما تنمو خالص أو ممكن تنمو،
بيكون نموها بور كمان، فيما لو نمت، هيكون لونها
أسود، light to brown blackwith no clear or opaque
zone معنى الكلام ممكن لو أشوف اللون الأسود ممكن
تكون أنها أنواع تانية غير الـ Staphylococcus
aureus أو غير الـ Staphylococcus بشكل عام فهي
Screening test وده أشي بيأكد أنها Screening not
confirmatory بالنسبة للصورة اللي عندي بيحكيلي
Black Colonism سببها ناتج أنه البكتيريا عملت
reduction لـ Telluride فبالتالي
عطت مركّب لون أسود فلوّنت الكولوناز الـ opaque
zone حوالين الكولوناز سبب الـ opaque zone أن
البكتيريا عندها ليباس كسّر الليبد فعمل
precipitation للفاتي أسد وهذا عمل الـ opaque zone
الـ clear zone سببها البكتيريا عندها الليستينياز
بتكسر الليستين اللي في الـ egg yolk وبتعمل clear
zone طيب، إحنا قلنا إن الـ Burt Barker أجار high
screeningmedia فبالتالي لازم أخد هاي الكونيز اللي
طلعت معي لونها أسود بدي أتأكد هل هي Staph Aureus
أو إنها نوع تاني فبروح بعمل confirmatory test
فحوصات تأكيدية أهم فحص بعمله اللي هو من ضمن ال
biochemical test هو فحص ال coagulase وهات فحص
مسئول عن التجلد هتاخدوه معاكم بالتفصيل في ال
essential microbiogenأحنا قلنا الـ Staph Aureus هي
الوحيدة من ضمن الـ Staph اللي بيكون عندها انزيم
الـ Coagulase فبقى أشتغله لو لاقيت موجود معناته
هاي على الأكيد Staphylococcus Aureus ممكن فحص تاني
اللي هي Staphylococcus الـ Enterotoxin S بروح أدور
على الـ Enterotoxin B هذا بمثابة أنتجن بشوف هل
البكتيريا عندها Enterotoxin B أو لأ باستخدام الـ
PCR اللي هي الـ Real-time PCRالشغل التالي التالتة
Latex Agglutination Kits هاد فحص السيرولوجيا كيف
فحص السيرولوجيا هاد بيكون؟ أنا بدي أشوف موجود
Staph Aureus أو لا فهي الـ Staph Aureus بمثابة
أنتجن الشركة المصنعة بتكون امحضرالي Antibody لهاد
الانتجن فبيكون في عندى زي هي Card ال Card هاي بروح
أحط عليهالـ Drop من الـ Antibody بيكون عندي كولونز
من الـ Staph Aureus اللي بدي أفحص هل هي Staph
Aureus أه أو لأ بحطهم مع بعض وبعد كده بالـ
Applicator بأمزجهم بعملهم Mix و Rotation بحركهم
بإيدي بأستنى عليهم فترة لو ظهر عندي Agglutination
أو ظهر على شكل حبيبات معناته الـ Antigenلنفس الـ
Antibody ارتبطوا في بعض فطل عندى حبيبات أو
agglutination طيب لو كان عندى مثلا استفيله كوكاس
Epidermidis روحت انا حطيته Antibody للـ Staph
Aureus عملتلهم mix استنيت عليهم أكيد مش راح يطلع
معى هذا الـ agglutination ليش؟ لأن الـ Antibody مش
لنفس الـ Antigen في ميديا تانية عندنابرضه لل staff
areas اسمها Manitoulin Salt Agar الميديا هي أنا
شرحتها المعمل الماضي اللي كنت بحكي فيه عن أهمية
أنه نضبط ال BH لل food Manitoulin Salt Agar
بنرمزلها MSA هي ال media برضه selective and
differential mediaSelective medium used for
isolation of pathogenic Staphylococcus يعني
Selective انتقائية للـ Staphylococcus بتنمي الـ
Staphylococcus وبتعمل Inhibition للأنواع التانية
غير الـ Staphylococcus The medium contain Manitol
Phenol Red Indicator 7.5% Sodium Chloride هذه
مكونات الميديااسمها مانيتول Salt Agar فيها مانيتول
هو بمثابة سكر عندها الـ Salt أهم إشي ما يميزها
فيها high concentration of salt 7.5% احنا قلنا
الطبيعي البكتيري بتتحمل 85% من 100% هذا كان الـ
normal saline NACL هاي 7.5% NACL فهذا 7.5% NACL هو
selective agentفبيقول لي اللي بتحمل التركيز العالي
هاد من الملح بيعيش اللي ما بتحمل فبيسيله
Inhibition فمعناته 7.5% in ACL هو selective agent
بينمي الاستفيل الككس وبيعمل Inhibition لأنواع
تانية أخرى دان استفيل الككس طيب بالنسبة لـ
Manitoulin هاد differential agent نمت عندي أنواع
مختلفة من الاستفيلCoccas تمام؟ نمت عندى اكتر من
نوع كيف بدي اميزهم عن بعض من خلال مين منهم بتعمل
fermentation و بتغير لون الـ BH Indicator فبقوللي
الـ Staph Aureus فقط هي اللى بتعمل fermentation
لسكر الإلمانيتول دائما اى fermentation لأى سكر
بيطلع عنه acid زى ما قلنا المعمل الماضى الـ
Medihive فيها BH Indicator اسمه Phenol Redلون
الميديا بالأساس بيكون لونها أحمر لو البكتيريا عملت
fermentation للسكر، طلعت منه acid، يعني هيقل الـ
pH، الـ acid هيلون الميديا إلى لون أصفر، لما يصير
لون الميديا أصفر، لون الكونس أصفر، معناته هي
البكتيريا عملت fermentation طيب، لو البكتيريا ما
بتعمل fermentation لـ mannitol، مش راح تكون acid،
هتظلها alkaline، alkaline معناه اللون هيظل أحمر
تمام يعني selective agent 7.5% NACL الـ
differential كله من الـ Manitoulin و الـ pH
Indicator مهم أنكم تكونوا عارفين الفينون الـ Red
هو الـ pH Indicator اللي بستخدم في الـ MSA إيش هو
selective agent؟ high salt concentration شو بتعمل؟
inhibit the growth of most bacteria other than
StaphylococciThe high salt content doesn't kill
gram-negative bacteria احنا قلنا ما بتعمل kill، ما
بتعمل death، انها بتعمل inhibition or suppressing
يعني بتثبت من نمو البكتيريا، بتظلها موجودة لكن ما
بتنموطيب On Manitoul salt agar, pathogenic
staphylococcus aureus produce small colonies كيف
بيكون شكل ال colonies في ال .. في ال Manitoul salt
agar؟ بتكون صغيرة، ال size صغيرة وبيكون حواليها
yellow zones إيش سبب ال yellow zones؟ سببها إن
البكتيريا عمل fermentation للمنطول فغيرت لون ال بي
أدش إلى اللون الأصفر السبب في هذا التغيير في اللون
أصفر هو أن الستاف أوريس فرمنت المنطول
Change ال color للبيئات لللون ال yellow أدرس تفيلو
ككس don't ferment Manitol أحنا قلنا بس لـ Staph
Aureus هي بتعمل fermentation Staph Aureus
Epidermis مابتعمل fermentation لأ المانيتل لكنها
بتتحمل إنها تنمو على 7.5% NACL هلاحظ في كيلونيز
لكن هاي الكيلونيز ماتلونت للون أصفر ليش؟ لإنها
مابتعمل fermentation لأ المانيتلفالتالي حيظل لون
الـ cones و لون الـ media red to pink the growth
of other types of bacteria is generally inhibited
حيصير inhibition لنمو الأنواع التانية غير الـ
Staphylococcus فاللي حيصير عندي لـ Staph aureus هل
هي بتحمل 7.5 مئة NACL أهم ما يميز لـ Staph aureus
أنها بتحمل 7.5 مئة NACL برضه كمان عندها Coagulase
عندها الـ TNAsوعندها الـ Enterotoxin بتعمل food
poisoning هذه كلها شغلات مميزة للـ staff أو الريسو
كمان هي من ضمن الـ gram positive بتعمل
fermentation برضه لإلماناته أو الهاد كمان ميزل
لإلها لما تعمل fermentation هيصير حواليها yellow
zone هيتلون ال media لون أصفر بدل ما هي لون أحمر
الاستفيلة خوكاس إيبيديرملس معناته هي من ضمن ال
staff معناته بتتحمل هي ال concentration العالمية
NACA لكنما بتعمل fermentation للمانيتال وبالتالي
هيظل لونها أحمر micrococcus lotus هي إجرام
positive لكن مش من ضمن الـ Staph Aureus مش من
ضمنها معناته مش هتتحمل ال concentration لـ ال salt
معناته مش راح تنمو خالص مش هلاحظ أي كولينز قنامي
عندى فبالتالي برضه ما بتعمل fermentation للمانيتال
ليش؟ لإنها ما بتنمو على high ال mediaهي عند كيف
بيكون شكل الاستافيل الكوكس Oreous الاستاف قلنا
هتنمو على هاي الميديا Monitor Salt Agar لإنها
بتحمل 7.5 ميقن ACL كمان بتعمل fermentation
للمانيتور هتغير اللون إلى لون الأصفر الاستافيل
الكوكس Ipidermis هي من ضمن الاستاف معناته هتنمو
لكن ما بتعمل fermentation هيظهر اللون أحمر Micro
-Koekas Lotus هي مش من ضمن الاستاف لا هتنمو ولا
هتعمل fermentationوهيك بنكون خلصنا المعمل