هنا عندنا جدول بيقارن بين أنواع الـOxidizing agent
المستخدم نقارن بين الـBendix solution و الـ Fehling solution
و الـTollens reagent أولا يجي من ناحية
المكونات الـBendix بيتكون من كبريتات في ألكالاين
كوبريك دوّب في ألكالاين كوبرتات الـFehling بيتكون من
كبريتات في ألكالاين تارترات الـTolens بيتكون من
silver nitrate في أكي واساسمان طيب color of
solution إيش لون الـReagent بيكون؟ لون الـReagent
في حالة الـBendix بيكون ديپ بلو وفي حالة الـ
Fehling برضه ديپ بلو بيكون لونهم أزرق حكينا بسبب
وجود الكوبر هو اللي بيعطي الـReagent اللون الأزرق
الـTulens بيكون colorless مالهوش لون طيب، بعد
التفاعل color after reaction with reducing sugar
بعد التفاعل الأكسدة والاختزال، إيش هيصير اللون؟
الـBendix والـFehling بيتحول لونهم إلى brick-red
بريسيبيتيت بتاعه اللي هو راسب لونه أحمر، طوبي،
ليتكون الكوبر أكسيد أما الـTolens، بيتحول إلى لون
silver mirror form اللي هو بيكون لون فضي وعمل زي
المرايا بسبب تكون الـAg الفضه الـ Species being
reduced مين هي المكونات اللي هيصير لها اختزال؟
السكر هو اللي هيختزل غيره، فالـ Oxidizing agent هو
اللي هيصير له اختزال، مين اللي هيصير له اختزال هو
الـ Oxidizing agent في حالة الـ Bendect solution
الكوبر هو اللي هيصير له اختزال هيتحول من Cupric Ion
إلى Cuprous Ion ونفس الشيء بالنسبة للـ Fehling هو
الـ Cupric Ion هيتحول إلى Cuprous Ion في حالة الـ
Tollens هي الفضة هي اللي هتختزل من Ag+ إلى Ag
طيب، species being oxidized مين اللي هيصيرله
أكسدة؟ السكر هو اللي هيصيرله أكسدة في كل الحالات
لأن هو بيختزل غيره و بيصيرله أكسدة فال reducing
sugar oxidized too حسب نوعه، هيتأكسد إما
لكربوكسيلات أو هيدروكسيل كربوكسيلات في الثلاث حالات
اللي بيصيرله أكسدة هو السكر هنا لصورة يوتيوب نوعتتش
باستخدام tool insert agent وبعد التفاعل كيف بيكون
اللون حاجة أنها بيكون silver mirror form اللي هو
لون فضي بس شكله زي المرايا هيك لامع فهذا هو نوعتتش
كيف هيك شكله فحوصاتنا لليوم هي فحوصات qualitative
test للكشف عن وجود السكريات تمام، هي فحوصات
qualitative للكشف عن وجود الـCarbohydrate أول فحص
نتعرف عليه هو الـBindect Test الـBindect، الـ
objective منه أو هو ولا إيش هذا الفحص to detect
the presence of reducing sugar distinguished
between reducing and non-reducing sugar وفحص خاص
للكشف عن الـreducing sugar عن السكريات المختزلة
فبيميز من الـreducing و الـnon-reducing شغل مثلا
أعطيتك سكر وحكيتلك هل هذا reducing او non
-reducing كيف بدك تقرر فيه؟ بدك تشتغل فحص الـ
Benedict طيب على أي مبدأ بيشتغل الـprinciple
بيشتغل على مبدأ أن هذا الـReagent يحتوي على كوبر
كبريتات على كوبر كبريتات الكوبر هذا الموجود في كوبر
كبريتات يعمل كـOxidizing agent بيروح بيؤكسد السكر
والسكر بيشتغل كـReducing agent بيعمل اختزال للكوبر
فالـPrinciple كيف هتكون على شكل المعادلات زي ما
أخدنا في المعمل الأول لو بدنا نعملها أنه عندي سكر
على فرض أنه ألدهيد هو إما هيكون ألدهيد أو
كيتون نعمل معادلة للألدهيد لحال ومعادلة
للكيتون لحال هو ألدهيد زائد الكوبر كايون اللي موجود
في الكوبر كبريتات في وجود alkaline media alkaline pH
بيعطينا الناتج الألدهيد هيصير له oxidation
تحول إلى كربوكسيلات طب والكوبر كايون هيصير له
reduction إلى كوبر اكسيد بيرسب على شكل كوبر
أكسيد لونه brick red أحمر طوبي فإذا الناتج أعطاني
لون اتحول اللون إلى brick red إذا هذا reducing
sugar إذا ما أعطانيش إذا non-reducing sugar لو بدك
تعمل معادلة ثانية للكيتون، الكيتون زائد
كوبر كبريتات اللي هو الـCupric Ion في وجود alkaline
media الكيتون بدي يصير له oxidation بس بدي يتحول
إلى هيدروكسيل كربوكسيلات طيب، والـCupric Ion
بيرسب، بيصير له reduction، بيرسب على شكل Cuprous
Oxide لونه بريك ريد بريسيبيتيت بيحكيلي the color of
بريسيبيتيت بتعتمد شدة اللون بتعتمد على تركيز
reducing sugar كده ش في كمية من هذا السكر خطوات
إجراء التجربة هاي أني بحط واحد من من السكر اللي
موجود عندي مثلا عندي عدة سكريات سكر جلوكوز،
فركتوز، سكروز، لاكتوز، ملتوز، ودول بدكشف عنهم،
كل واحد بشتغلوا بتيوم بحط واحد من من هذا السكر
واضيف عليه واحد من من الـBindex Reagent من
الـReagent وبحطهم في الـwater bath لمدة خمس دقائق
بعدين بطلع إذا اتحول اللون إلى brick red إلى لون
أحمر إذا هذا reducing sugar إذا ما تغيرش اللون
إذا هو non-reducing sugar أو إنه طلع لون ثاني غير
الـbrick red هو non-reducing sugar الفحص الثاني
اسمه Barfoed Test Barfoed Test هذا إيش الـ
objective منه؟ to distinguish between mono and
disaccharide بيفرق من السكريات الأحادية والثنائية
يعني لو عندي سكر مش عارف هل هو mono ولا
disaccharide بستخدم فحص الـBarfoed Test عشان
أفرقه هل هو mono ولا disaccharide كيف الـprinciple
طريقة شغله الـprinciple إنه الـParfoed reagent
اللي أنا بستخدمه بيتكون main coverage إيه طبعا عند
الـReagent بيحتوي على Cupric Ion فأنا بحط السكر،
السكر هذا نوعيا هيكون ألدهيد يا كيتو مثلا
ألدهيد، نيجي نكتب معادلة ألدهيد الـAldehyde
زائد الـCupric Ion اللي موجود في الـReagent
بيتحول، بيطلع عندي الناتج الـAldehyde بتحول
لكربوكسيلات وCuprous Oxide أما إذا كان كيتون كيتون
باضيف عليه الـReagent اللي هو الـCupric Ion
بتحول الكيتون إلى Hydroxyl Carboxylate والـCupric
Ion بتحول إلى Cuprous Oxide اللون في الآخر في
المعادلتين اللون بيكون brick red إذا اتحول إلى لون
brick red بيكون هذا monosaccharide بيحكي في الـ
Parfoed reagent react with monosaccharide to
produce cuprous oxide faster rate than
disaccharide الـParfoed reagent بيتفاعل مع
الإتنين، مع الـmonosaccharide ومع الـ
disaccharide بيعطيني لون ولكن تفاعله مع الـ
monosaccharide أسرع من تفاعله مع الـdisaccharide
فاحنا لما نشتغل نحطه وقت معين لواجهة هذا بيسمح
بتفاعل فقط الـmonosaccharide لو تأخرنا عليه ممكن
الـdisaccharide يتفاعل كمان فاحنا بدنا نحطه بس
لواجهة تفاعل الـmonosaccharide وبعد هيك بطلع إذا
تغير اللون يعني هذا monosaccharide الـPrinciple
للبارفويدز زي الـبين ديكتس ولكن بدون وجود وسط
قاعد، لا تحتاج إلى وجود وسط قاعدي كيف طريقة العمل؟
أحط واحد مل من السكر اللي موجود عندي على واحد مل
من الـReagent ثم بحطه في الـwater bath لمدة عشر دقائق
بطلع من الـwater bath اللي تكون عندي red
precipitate اللون الأحمر، الراسب اللون الأحمر، إذا
ده mono-saccharide إذا ما تكونش، إذا هو di
-saccharide أو سكر آخر فحص الثالث هو فحص الـBial's أو
اسمه ثاني orcinol test Bial's or orcinol هذا خاص
للكشف عن الـPentose objective for the detection of
pentose it distinguishes between pentose and
hexose بيفرق بين الخماسي والسداسي هو للكشف عن الـ
Pentose عن الخماسي فبيفرق بين الخماسي والسداسي كيف
الـPrinciple أنا بستخدم Bial's reagent Bial's reagent
اللي هو شو مكوناته هذا الـBial's Region واحد من
عشرة في المية أورسينول Concentrated HCl واحد من
عشرة في المية فرّيك كلوريد FeCl3 H2O إن هذا الـ
Concentrated HCl بيعمل الـdehydration للسُكّر
قلت الـBial's بيفرق بين الـPentose و الـHexose
كيف بدي أتفاعل الـPrinciple بحط Bial's بحط السُكّر
أنا مثلا Pentose و بحط عليه الـBial's reagent
المكونات الثلاث طبعا كلهم مخلطين بيتحول السُكّر
إلى حاجة اسمها Furfural فيرفورال و أورسينول
اللي ضال عندنا بتحول السكر إلى فيرفورال فيرفورال
مع أورسينول في وجود فرّيك ايون من الفرّيك كلوريد جاي
بتكون عندي لون blue to green لون أخضر مزرق أو
precipitate على شكل هذا اللون اللي هو أخضر مزرق
بيطلع عندي إذا طلع هذا اللون إذا الموجود بنتوز
بيحكي لي إذا طولت عليه شويه يصير اللون براون بتكون
لون براون precipitate لون راسب لونه بني بيكون
الموجود hexose فلو بدك تلخص معادلة الـBial's على
شكل معادلة، تلخص الـPrinciple على شكل معادلة، أنه
الـPentose، هذا الفحص كان للـPentose، الـ
Pentose في وجود HCl، أول حاجة بتشتغل من الريجنت
اللي هو الـHCl، بيعمل dehydration للسكر، فبينتج
عنه، بيتحول إلى Furfural زائد Orcinol زائد Ferric
Chloride إذا أنا عند الـPentose في وجود HCl
بيعطيني Furfural زائد Orcinol زائد Ferric Chloride هدول
الثلاث مع بعض هالـثلاث بيتفعلوا بيعطوني Complex
لونه blue to green Complex لونه blue to green كيف
خطوات العمل بحط واحد مل من السكر على واحد ونصف مل
من الـBial's reagent وبعملهم خلط mix واحد مل من
السكر على واحد ونصف مل من الـReagent بعد هيك
بسخنها على اللهب مش في الـwater bath هي على اللهب
بسخنها لحد ما تغلي بعد ما تغلي بحطها بالراكد تبرد
إذا اتحول اللون إلى blue to green is positive إذا
السكر اللي موجود عندي بنتوز إذا ما تحولش إذا
negative الفحص اللي بعده اسمه Seliwanoff's أو Resorcinol Test Seliwanoff's أو Resorcinol Test إيش
الهدف من هذا الفحص for detection of ketoses يكشف
عن الـketoses السكر اللي يحتوي على كيتون اجرام
الـPrinciple Seliwanoff's Test to distinguish between
hexose with a ketone group and hexose with
aldehyde group هو الكشف بيفرق بين اللي عنده
ألدهيد عن اللي عنده كيتون ويكون hexose يكون
سداسي هذا الفحص لو اشتغلتي مع كيتوز، مع كيتوز اللي
عنده كيتون جروب، بيعطيكي لون Red، هيعطيكي لون أحمر
وبيتكون بسرعة، it's formed rapidly، إذا اتكون لون
أحمر بسرعة، إذا اللي موجود كيتون، طيب الألدهوز
بتعطيني light pink color و بتاخد واجهة أطول، واجهة
أطول، longer time إذا اتكون عندي اللون البنك وبوجهة
أطول لما يتكون إذا اللي موجود عندي الـAldose
الـKetohexose يعني هو سداسي وعنده ketone group زي
بتعملها على شكل معادلة بحكي كيتوهيكسوز في وجود HCl
بيعطيني Hydroxyl Methyl Furfural بيتفاعل مع
الرسورسينول بيعطيني Colored Complex كيف خطوات إجراء
التجربة؟ بحط تلاتة مل من العينة على drop واحدة من
السكر بعدين بحطه في الـ water bath لمدة تلاتة مل
بعدين بلاحظ إذا اتكون عندي اللون الأحمر إذا هذا
positive وهذا عبارة عن كيتوز إذا ما اتكونش إذا
negative آخر فحص هو الـ Bennedict's Test فحص الـ
Bennedict's الـ objective منه يستخدم للكشف عن الـ
reducing sugar يعني زيه زي أول فحص اللي هو الـ
Benedict's Test للكشف عن الـ reducing sugar زي أول
فحص اللي هو الـ Benedict's Test كيف الـ principle أنه
عندي Bicric Acid اللي هو اسمه تاني اتنين اربع ستة
Trinitrophenol Bicric Acid هو اتنين اربع ستة
Trinitrophenol أو الـ TMP بيجي هذا الـ bicric acid
بيتفعل مع الـ Reducing Sugar وبيصير لو واحد فيهم
أكسدة وواحد فيهم اختزال وبيتكون عندي الـ Red Color
جاي من وين هذا الـ Red Color من عملية اختزال
الـ Bicric Acid إلى Sodium Bicaramide الـ Red color زي
من حدوث reduction للـ Bicric Acid لأنه بيصيبله
اختزال، بتحول لـ Sodium Bicaramide فلو بدك تكتب
معادلة للـ Principle للـ Bicric Acid أن عندي
Aldehyde زائد Bicric Acid في وجود أنيونات، في وجود
قاعدة الـ Aldehyde بيصير له oxidation بيتأكسد إلى
حاجة اسمها الـ Carboxylate حكينا الـ Bicric Acid
بيصير له reduction إلى أيش؟ إلى Sodium Bicaramate
Sodium Bicaramate هذا له لون أحمر، طب إذا كيتون مش
Aldehyde؟ الكيتون زائد الـ Bicric Acid في وجود
أنيونات OH الكيتون إيش هيصير له oxidation إلى
هيدروكسلكربوكسيلات والـ Bicric Acid بيصير له
reduction إلى صوديوم بكرامات لونه red إذا اتكون
اللون الأحمر إذا هو Reducing Sugar إذا ما اتكونش
إذا هو Non-reducing Sugar كيف خطوات العمل بحط واحد
مل من السكر على 1 مل من الـ Bicric Acid على نص مل
من الـ NaOH من القاعدة و بعدين بحطه في الـ
Water Bath لمدة 5 دقائق، لمدة 5 دقائق إذا ظهر بعد
ما طلع من الـ Water Bath كان اللون Red إذا هو
عبارة عن Reducing Sugar إذا اللون ما اتكونش اللون
الأحمر إذا هو Non-Reducing Sugar بهيك بنكون خلصنا
تجارب الفحص و الكشف عن السكريات مطلوب منكم تكتبولي
الـ principle لكل فحص على شكل معادلة زي ما عملنا في
فحص qualitative test of amino acid