اليوم إن شاء الله بنحكي في معمل جديد اسمه ال
chromatography الـ chromatography هي تقنية لفصل
الخليط من المواد إلى مكوناتها عندي خليط من المواد
من المواد لأفصل كل مكون على حدة في البداية
نحكي مقدمة عن هذه الطريقة و كيف تم اكتشافها في
عندنا عالم اسمه Michael Tswett هاد عالم روسي استخدم
هذه التقنية لفصل أصباغ النباتات وورقة النباتات
تحتوي على عدة أنواع من الأصباغ قام في فصل هذه
الأصباغ بطريقة أطلق عليها اسم chromatography حكى
أن chromatography تعني written color
chromatography تعني written color معناها الكتابة
بالألوان لأن هو استخدم هذه الطريقة لفصل أصباغ
النباتات فأطلق عليها إن هي الكتابة بالألوان إنها
تستخدم للمواد الملونة لأن هو فصل مواد ملونة فصل
أصباغ يحكي لإن معظم المواد المحيطة فينا هي حوالينا
هي عبارة عن خليط من مادتين أو أكثر most materials
in our surroundings are a mixture of two or more
compounds إن معظم المكونات في الهواء الجوي أو
حوالينا في أي مكان هي عبارة عن خليط هذا الخليط إما
بيكون homogeneous أو heterogeneous الخليط إما بيكون
خليط متجانس homogenous أو خليط غير متجانس
heterogeneous إيش يعني homogenous are uniform in
composition؟ homogenous معناه خليط متجانس إنه
عبارة عن عدة مكونات ولكن يظهر كمادة واحدة زي مثلا
الهواء الجوي اللي حوالنا يحتوي على عدة أنواع من
الغازات لكن هل مبين كل غاز؟ لأ مبين إن هو مكون
واحد heterogeneous إن الـ mixture are not uniform
إنّه عندنا خليط من عدة مكونات لكن مبين إن هذا يحتوي
على أكثر من مادة زي مين؟ زي الزيت مع الميه تخلط
الزيت مع الميه مبين وبيفصلوا لطبقتين فمبين ان هو
عبارة عن أكثر من مادة عبارة عن مادتين واضحين مش
متجانسين هي مثال مكتوب أن الـ air هو عبارة عن
homogeneous mixture أما الـ oil في الـ water لما
يكون زيت مع مي فهو heterogeneous غير متجانس بيحكي
لي سواء الخليط كان homogeneous أو heterogeneous
نقدر نفصله نعمل separated by physical method بطرق
فيزيائية عدة، إذا سواء الخليط كان عندي متجانس أو
غير متجانس بقدر أفصل مكوناته باستخدام عدة طرق في
طرق فيزيائية كيف بدأ يختار الطريقة؟ احنا عندنا عدة
طرق للـ separation كيف بدأ يختار الطريقة المناسبة
لفصل الخليط بناء على الـ type of mixture على نوع
الخليط على الـ difference in the chemical
properties على الخصائص الكيميائية للمكونات مثلا أنا
هختار طريقة الفصل بناء على نوع الخليط أو بناء على
الخصائص الكيميائية يعني مثلا من طرق الفصل مثلا
عندنا الـ centrifugation الـ centrifugation يمكن
أخذناه بالمقدمة أن استخدام جهاز centrifuge بيفصل
بناءً على الكثافة الدم مثلا نفصله باستخدام هذا
الجهاز باستخدام الـ centrifuge مثلا زي ما استخدمنا
isolation زي ما عزلنا الكازين من الحليب هي هذه
طريقة فصل أن أنا بس أخدت الكازين من كل مكونات
الحليب كانت الطريقة اسمها isolation مثلا عملية
precipitation أني أرسب مكون وأسيب الباقي وفي عندنا
تقنية chromatography وفي عندنا مثلا الـ evaporation
التبخر أعمل تبخر زي مثلا مي مع ملح ببخر المي وبخلي
الملح مثلا الـ extraction استخلاص أعمل استخلاص
للمادة كل هذول طرق للفصل اليوم احنا الطريقة اللي
بدنا ناخدها هي الـ chromatography بحكي للـ
chromatography مستخدمة بشكل واسع لفصل الـ mixture
of compounds into individual components لفصل الخليط
إلى مكوناته إنّه بيخلي كل مادة لحال هذه التقنية
مستخدمة بشكل واسع لفصل الخليط إيش معنى
chromatography؟ chromatography لأن في البداية
استخدموها لفصل الألوان، لأصباغ النباتات، فأطلقوا
عليها أنها مستخدمة لـ separation of color، لفصل
الألوان، ولكن في الوقت الحالي today الـ
chromatography تعني فصل الـ color والـ colorless
substance إنّها تستخدم للمواد الملونة وغير
الملونة، فإنّ هي قديما أول ما اكتشفت التقنية كانت
فقط بيعتقدوا إنّها للمواد الملونة، ولكن في اليوم
الحاضر هي المواد الملونة وغير الملونة الـ
chromatography هي طريقة فيزيائية physical method
for separation of mixture to its components
لمكوناته بناء على two phases باستخدام two phases طوران
حاجة بنسميها stationary phase وحاجة بنسميها الـ
mobile phase إذن هي تقنية فيزيائية أو طريقة
فيزيائية لفصل الخليط إلى مكوناته باستخدام two phases
الـ mobile phase والـ stationary phase إيش هو الـ
stationary phase الـ stationary phase هو عبارة عن
الجزء الصلب بيكون solid مدعم بـ glass بجزاز أو
بتكون عبارة عن paper عن ورقة إذا الـ stationary
phase هو الطور الساكن هو الطور الساكن بيكون عبارة
عن طبعا ورقة ممكن تكون صلبة هي ورقة صلبة تكون مدعمة
من الخلف بزجاج أو ألمنيوم عشان تحميها من التكسر
وممكن تكون عبارة عن porous material هي مادة مثقبة الـ stationary phase هي مادة
مثقبة porous material ليش؟ عشان تسمح بدخول السائل The
sample is carried by a particular solvent called
mobile phase كنت أنا كيف تقنيتها دي بيكون في عندي
ورقة اسمها stationary phase هذا الطور الساكن هاي
بحط عليها العينات الخليط اللي أنا بدي أفصله بحط
نقطة من الخليط اللي أنا بأفصله على الـ stationary
phase على الطور الساكن في عندي حاجة اسمها الـ
mobile phase الـ mobile phase هو الطور المتحرك
بيكون عبارة عن غاز أو liquid أو سائل وجدت الورقة
الـ stationary phase اللي أنا حطيت عليها الخليط
بقى حطها بغمرها في الـ mobile phase بغمر الورقة في
الـ mobile phase بيبدأ الـ mobile phase اللي هو
عبارة عن سائل أنّه يمر عبر هذه الورقة زي مثلا الـ
tissue paper لما تحطيها بمي بتتبلل بالمي بيمر المي
عبر الـ tissue paper وهان هيك الـ stationary phase
هي الورقة بيكون عليها الخليط أنا حاطة نقطة من
الخليط عليها وبغمرها في الـ mobile phase اللي هو
عبارة عن سائل بيمر السائل في هذه الورقة طول ما هو
بيمشي السائل بيفصل معاه الخليط لمكوناته على هيئة
نقاط كل .. كل مكون من هذه المكونات بيعطينا نقطة
في مكان معين فالـ Mobile phase هو عبارة عن الـ
solvent اسمه ممكن نحكي عنه الـ solvent أو الـ eluent
هو بيكون liquid أو gas الـ mobile phase بنبقى
الستاشنري stationary phase الستاشنري فيس هو جزء
الصلب بيكون عبارة عن ورقة ممكن وهي صلب بتكون
مدعمة بجلاس أو ألمنيوم الـ mobile phase عبارة عن
solvent اللي you want liquid أو غاز بيكون سائل أو
غاز بغمر الـ stationary phase في الـ mobile phase
بيحكي لي بعدين الـ mobile phase بيمر عبر الـ
stationary phase هيبدأ يمر داخل الـ stationary
phase الورقة أنا لما أغمرها في السائل بيمشي السائل
فيها للأعلى فبيمر الـ mobile phase عبر الـ
stationary phase طب في عندنا عدة مصطلحات، في عندنا
حاجة بنسميها affinity affinity هي المحبة معناها أو
التجاذب affinity تعني المحبة أو التجاذب هي
attraction or force between .. natural attraction
or force between two مواد هو التجاذب الطبيعي
للمواد مع بعضها البعض تجاذب طبيعي للمواد مع
بعضها البعض مثلًا المي والسكر هاد بولر وهاد بولر
بيدوبوا ببعض يعني هما محببين لبعض فهما نفس الخصائص
فبيدوبوا ببعض لذن الـ affinity هي التجاذب الطبيعي
للمواد مع بعضها البعض adsorption في إن adsorption
و absorption adsorption هي adhesion or stickness
of substance to the surface of another substance
والتصاق مادة على سطح مادة أخرى التصاق مادة على سطح
مادة أخرى التصاق المادة بس على السطح بدون اختراق
التركيب الداخلي للمادة هاي الـ absorption absorption
التصاق مادة على سطح مادة أخرى absorption معناها أن
المادة تخترق التركيب الداخلي للمادة الأخرى مش
التصاق فقط على السطح وإنما اختراق التركيب الداخلي
للمادة فيها نوعين رابط يوتيوب هاي بوضح الفرق بين
الـ absorption والـ absorption إذا حبين تطلعوا عليه
هنا توضيح لتقنية الـ chromatography نيجي أول شي على
اليسار في عندنا هنا الورقة البيضاء هذه الورقة هي الـ
stationary phase لذن الورقة هي الطور الساكن اللي
حكينا عنها إنّها stationary phase بتكون solid بتكون
مدعمة هلقيت؟ الخليط أنا وإنه بدي أحطه .. المكونات ..
عندي خليط عندي كيتوب مليانة فيها خليط من المكونات
وبدي أفصلها بأخد منها نقطة بحطها على هذه الورقة
على الـ stationary phase في موقع معين تمام؟ وبعدين
بأخد هذه الورقة اللي صار عليها الخليط بغمرها في
داخل الـ mobile phase الـ mobile phase هو الجزء الأزرق
اللي تحت احنا هلقيت بالصورة اللي على الشمال
الورقة البيضاء هي الـ stationary phase الطور الساكن
حطيت عليها نقطة من هذا الخليط والخليط كان عبارة
عن عدة مكونات هي تحت ملونة في منها أصفر وأحمر و
أزرق إنّها تحتوي على عدة مكونات
الجزء الأزرق اللي تحت هو عبارة عن liquid عن سائل لا
جاتش بدي يسير بدي أُمر هذا السائل عبر الـ stationary
phase بيسير يمشي فيه عبر خاصية الـ capillary
action الخاصية الشعرية لأن الـ stationary phase
حكينا إنّها مادة مثقبة porous material فبيمر السائل
الـ mobile phase عبرها وبيصعد للأعلى وبيظل يمشي طيب
كيف ده تفصل المواد طول ما هو بيمشي بيفصل الخليط
لعدد مكوناته كل واحدة بتوقف في مكان بناء على إيش؟
بناء على الـ polarity وبناء على الـ solubility كيف؟
إن الورقة اللي أنا بستخدمها الـ stationary phase
بيكون إلها خصائص يعني ممكن تكون polar أو ممكن تكون
non-polar على اعتبار مثلا الـ stationary phase هذه
اللي استخدمتها هي polar والـ mobile phase برضه
بيكون إله خصائص إذا الـ stationary phase كان polar
إذا الـ mobile phase non-polar تمام أنا بدي أعتبر الـ
stationary phase هنا إن هو polar والـ mobile phase
non-polar اجت من اللي بيمشي الـ mobile phase هو
اللي بيصعد الـ stationary phase سابتة مدام الـ
mobile phase اللي بيصعد هو non-polar فالمواد اللي
في الخليط إذا كانت non-polar هتمشي مع الـ mobile
phase لفوق تمشي معاه إذا كانت polar هتقف لتحت عند
الـ stationary phase هتظلها سابتة تحت ومش هتمشي
لأنّها بتحب الـ stationary phase هي خصائصها polar زي
الـ stationary phase إذا هتوجه فتحت وتضل ملزقة
فيه في الـ stationary phase مش هتمشي مع الـ mobile اللي
تكون خصائصها زي الـ mobile phase مثلا non-polar زيه 179 00:12:52,50
عدة مكونات صار كل مكون لحاله عملت له quantify كمي
أنه أنا عرفت هذا الخليط مكون من كم من مادة يحتوي
على كم من مادة يعني هو فصل لعدة مواد كل واحد في
منطقة مثلا الأصفر هي مادة أحمر مادتين ودوائر
السودة هي ثلاث مواد والمستطيلات هي أربع مواد إذا
هذا الخليط يتكون من أربع مواد هنا التفصيل للي
توحكناه كله تقنية الـ separation is based on the fact
that different solid absorbed different substances to
different extreme depending on polarity أنه عندنا
مادة بتكون بورص اللي هي عبارة عن stationary phase
بتكون بورص material مادة مثقبة أنا هحط عليها القليل
اللي أنا بدي أفصله وهيتم الفصل أو أنها تلتصق في
هذه الـ stationary phase المكون إذا لتصق في ال
stationary phase أو أنه يمشي مع الـ mobile phase
وما يلزجش بناء على إيش؟ بناء على الـ polarity على
القطبية إذا الـ stationary polar إذا المواد ال
polar هتضلها لزجة فيه والمواد الـ non-polar هتطلع
لفوق إذا الـ stationary non-polar إذا المواد الـ
non-polar بتضلها لزجة فيه و الـ polar بيطلع لفوق
mixture to be separated is first applied to an
immovable porous solid إذا المكتشر الخليط اللي أنا
بدي أفصله وين بحطه أول شيء بالبداية بحطه على ال
stationary ولا على الـ mobile لأ بأسقطه في ال
stationary phase في البرة ال solid material اللي
هي المادة المثقبة اللي بتكون عبارة عن ورقة حكاية
أو ألمنيوم أو سليكا اللي هي اسمها stationary phase
the component of the mixture then get washed
وبعدين بغمرها حكاية البر الستاشنريال اللي هي ال
stationary phase بغمرها في الـ solvent اللي بنسميه
mobile phase بعدين الـ mixture بيصير له separated by
different بناء على إيش؟ بناء على الـ attraction،
بناء على الـ polarity مع الـ stationary phase و ال
mobile phase، بناء على أي مبدأ، بناء على مبدأ
like dissolves like لذن بعد ما أحط المواد على ال
stationary phase بغمرها في الـ mobile phase بيبدأ
يصعد الـ mobile phase عبر الـ stationary phase
وهيمشي معاه مواد هتمشي معاه مكونات الخليط بناء على
إيش، بناء على الـ polarity، بناء على الـ affinity،
بناء على الـ attraction التجاذب بينها وبين الـ Face
إذا هي والله متحبة و Affinity وقوة تجاذب عالية
وخصائصها الـ Polarity نفس خصائص الـ Stationary إذا
هتظلها ملزجة في الـ Stationary مش هتصعد للأعلى إذا
خصائصها و الـ Affinity و التجاذب قوي مع الـ Mobile
Face إذا هي هتصعد مع الـ Mobile Face للأعلى if the
stationary phase is polar إذا الـ stationary كانت
polar إذا أن الـ polar component المكونات اللي
بتكون موجودة في الخليط كانت polar هي هتلزج في ال
stationary phase مش هتطلع لفوق و الـ non-polar هي
اللي هتطلع أسرع للأعلى لكن لو الـ stationary phase
is non-polar إذا الـ non-polar هي اللي هتتجاذب مع
الـ stationary و تضلها تحت و الـ polar هو اللي هيصعد
للأعلى بقوة أعلى أو بواجهة أقل الـ separation
depends on several factors عملية الفصل بتعتمد على
عدة عوامل عملية الفصل بتعتمد على عدة عوامل في
عندنا عاملين رئيسيين وفي عندنا الثالث أول عامل هي
solubility solubility with mobile phase أول عامل الـ
solubility with mobile phase اللي مكتوب هنا الـ
solvent الـ solvent معناه الـ mobile phase إذا كان
بيدوب في الـ mobile phase له نفس خصائص الـ mobile
phase إذا هو هيصعد للأعلى العامل الثاني ال
attraction between compound and silica اللي هي قوة
التجاذب بين المادة اللي موجودة في الخليط والسيليكا
اللي هي الـ stationary phase الـ attraction يعني
التجاذب مع الـ stationary phase إذا هي متجاذبة أو
حابة للـ stationary إذا هتظلها في الأسفل إذا أول
عاملين رئيسيين يعتمد عليهم تقنية الفصل هي
solubility with mobile phase والـ Attraction with
stationary phase وهذا هو نفسه الـ principle لما
أعمل اليوم أنه أنا بدي أعمل فصل لخريطة من مكونات
من عدة مكونات بناء على إيش بده يفصل، بناء على أي
مبدأ، بناء على مبدأ الـ solubility with mobile phase
أنه مدى الذائبية مع الـ mobile phase و الـ attraction
مع الـ stationary phase ومدى التجاذب مع الـ
stationary phase والله إذا هي متجاذبة مع ال
stationary phase هتضلها لتحت ومش هتطلع إذا هي
solubility مع الـ mobile phase اللي هي عالية
وذائبة في الـ mobile phase إذا هتصعد للأعلى ثالث
عامل هو الـ structure of compound ليه الحجم؟ الثالث
عامل يقصد فيه الـ size حجم المادة اللي موجودة في
الخليط اللي بدي أفصلها إذا حجمها كبير هتمشي ببطء
هتكون بطيئة في المشي وبالتالي مش هتمشي كثير هتكون
ملزقة لتحت أكثر لكن إذا كان حجمها صغير هتمشي أسرع
إيش مميزات الـ chromatography الـ advantage of
chromatography أول حاجة كان separate complex
mixture with greater precision أنها بتفصل خليط من
عدة مكونات بدقة عالية بتفصل خليط بدقة عالية يعني
لو في مادتين متشابهات ولكن بيختلفوا زي البروتين
مثلا هو عبارة عن سلسلة من أحماض أمينية لو في عندي
نوعين من البروتين هما نفس سلسلة أحماض الأمينية بس
بيختلفوا بحمض أميني واحد بتقدر تفصلوا هذه التقنية
تفصلهم عن بعض Can purify any soluble or volatile
substance if the right adsorbent material, carrier
fluid and operating condition are employed بتقدر
تعمل تنقية لأي خليط من أي مواد، من عدة مواد تقدر
تنقي الخليط، أنه تخلي كل مكون لحاله، بشرط أن
أستخدم الـ stationary phase المناسب، الـ mobile
phase المناسب والتقنيات والخطوات إجراء التجربة
الصحيحة exact quantitative analysis is done even
from a trace compound بقدر أعمل منها quantitative
analysis اللي هو تحليل كمي أعرف كمية or small
material consumption اللي هو هذه التقنية بتستهلكش
مواد كثيرة، مواد بسيطة the quantitation has a broad
linearity range لها مدى واسع، لها مدى واسع من
المواد اللي تقدر تفصلها sixth analyze of several
compounds can be done during one run بقدر أفصل
أكثر من خليط مرة واحدة يعني بجيب الـ stationary
phase اللي بده أحط عليه الخليط بقى بحط خليط في
مكان بحط نقطة من هذا الخليط في مكان ثاني نقطة من
الخليط الثاني في نفس الورقة بقدر أفصل عدة خليط عدة
أنواع من الخليط ممكن خليط اثنين ثلاثة في نفس ال
stationary phase في نفس التقنية في نفس المرة ال
chromatography is a fast analysis method هي طريقة
سريعة وآخر شيء أنه حاليا صارت instrumentation
صارت عبارة عن أجهزة صارت automation بدل ما نعملها
بشكل يدوي أتمت تقنية الفصل باستخدام أجهزة
في عندنا سؤال is this a pure substance or mixture؟
أنه هل المادة اللي عندي هي مادة عبارة عن مادة نقية
بتتكون من مكون واحد ولا هي عبارة عن خليط كيف
بتعرف؟ أنا أعطيتك مادة وحكيت لك عرفيها هل هي pure
substance ولا mixture؟ كيف بدك تعرفي؟ بيحكي لي
بنشتغل تقنية الـ chromatography بشكل عام، هذا ملخص
للـ slide هاي أنه أنا بدي أشتغل تقنية ال
chromatography هنكتب للـ TLC TLC هو نوع من أنواع
الكروماتوجرافي هنتعرف عليه لقدام هي اختصارها thin
layer chromatography TLC Thin Layer Chromatography
بشكل عام أنا كيف بده يعرف بده يجاوب عليها ده
السؤال هل هي pure مادة نقية ولا خليط بدي أشتغل
تقنية الـ chromatography وأشتغلها بعد ما يفصل الخليط
أو يمشي الـ mobile phase عبر الـ stationary phase
إذا أعطاني نقطة واحدة أنه في مكان واحد نقطة واحدة
إذا هذه pure substance مادة نقية لأنه ما أعطانيش
غير مكون واحد إذا أعطاني أكثر من نقطة في أكثر من
مكان فهذا معناه أنه كان mixture كان عبارة عن خليط
وفصل إلى عدة مكونات وبالتالي أنا بقدر أعرف ال
number of components in a mixture بقدر أعرف عدد
مكونات الخليط كيف بده يعرف عدد مكونات الخليط؟ لأنه
بعد ما يفصل كم نقطة أعطاني مثلا إذا أعطاني ثلاثة
إذا هو عبارة عن ثلاثة مكونات إذا أعطاني بس نقطتين
إذا هو عبارة عن مكونين طيب are these compounds
identical؟ السؤال الثاني أنه بيحكي لي أن أنا أعرف
هل هذول المواد identical شبه بعض أنه عندك مادتين و
مش عارفين هل هم نفس المادة محطوطين في مكانين ولا
هم مادتين مختلفتين كيف بدك تعرفي؟ برضه بيحكي لي
الإجابة أني بدي أشتغل الـ chromatographic technique
بدي أشتغل تقنية الـ chromatography بأخذ من المادة
الأولى و بحطها على الـ stationery phase والمادة
الثانية و بحطها برضه على الجانب الثاني في نفس
الورقة كل واحدة في مكان و بحطها في الـ mobile phase
بغمرها و بيبدأ يفصل بيحكي لي إذا فصلوا النقطتين
مقابل بعض في نفس المكان مقابل بعض إذا هم نفس
المادة إذا فصلوا كل واحدة في مكان إذا هم مادتين
مختلفتين إذا أنا هشتغل الاثنين و أعملهم فصل إذا تم
الفصل في نفس المكان إذا هو عبارة عن identical
substance أما إذا فصلوا كل واحدة في مكان بيكونوا
مواد مختلفة وكيف كمان بدي أعرف الزيادة؟ نحسب حاجة
الـ retention factor هنتعرف عليه لقدام لكن أنا
بشكل عام كيف بدي أعرف هل هي identical ولا لأ نفس
المادة أشتغل تقنية الـ chromatography إذا فصل
المكونين جنب بعض في نفس المكان على الورقة مقابل
بعض إذا هم نفس المادة إذا كل واحدة في مكان إذا هم
مادتين مختلفتين types of chromatography أقسام ال
chromatography لجهة الـ chromatography مقسم إلى
قسمين بناء على الـ stationary و بناء على الـ mobile
phase الـ chromatography مقسم إلى جزئين بناء على ال
stationary إليه تقسيم و بناء على الـ mobile إليه
تقسيم بناء على الـ mobile phase فيه نوعين إما
بستخدم الـ mobile phase يكون gas، غاز أو يكون
liquid بناء على الـ stationary phase في منه column
على شكل عمود وفي منه planar على شكل سطح مستوي
إذا بناء على الـ stationary phase في منه اثنين
column عمود أو planar مستوي و الـ planar في منه
thin layer chromatography وفي منه paper
chromatography هنا جدول بيوضح أنه أو أنه ملخص هاي
الـ slide المطلوب منها أصلا منها أنه ال
chromatography تقسيم الـ chromatography بناء على ال
mobile phase أن في عندنا liquid chromatography و
gas chromatography بس لذا تقسيم الـ chromatography
بناء على الـ mobile phase في منها liquid وفي منها
gas الـ classification أما بناء على الـ stationary 380 00:
فهي مدعمة بسطح من جلاس plastic أو aluminium
أو plastic أو aluminium ال paper chromatography
paper chromatography ال stationary phase بيكون
عبارة عن paper عبارة عن ورقة أما الجزء الثاني هو
ال column chromatography اللي بيكون عبارة عن عمود
فال stationary phase بيكون column طيب ليش بنستخدم
تقنية ال chromatography؟ بيحكينا ال
chromatographic technique ممكن نستخدمها ك
qualitative و ك quantitative ممكن أستخدمها ك
qualitative و quantitative ايش يعني qualitative؟
يعني أعرف نوع المادة، أعرف اسم المادة، مين هذه
المادة Qualitative معناها جودة أو نوع المادة تحديد
نوع المادة كيف بدي أُحدد نوع المادة بناء على حاجة
اسمها ال retention factor أنه أنا بحط خليط من
المواد على ال stationary phase و بحطها بغمرها بال
mobile phase و بيبدأ يفصل بيفصل كل مكون إلى نقاط
كل نقطة في مكان أجيّت وين وصلت هذه النقطة؟ من عندها
بحسب حاجة لكل نقطة بحسب ايش اسمه retention factor
اللي هو عامل المحافظة كيف بيُحسب هاد؟ هو موجود في
آخر slide بس أنه بشكل عام ال retention factor هو
عبارة عن ال distance اللي هي المسافة اللي قطعتها
المادة، بكون أنا حاطة خط بداية اللي هو حاطيت من
عنده الخليط، النقطة وين أنت حاطيت الخليط، من وين
بدأتِ، من هنا أنا حاطيت النقطة، بحسب المسافة اللي
قطعتها المادة من هذا الخط لوين وصلت بعد الفصل
المادة وين وصلت بعد الفصل يعني لو رجعنا لهذه
الصورة هل جت المواد بعد الفصل مثلًا الحمرة أنتِ حطيتِ
الخليط وين؟ من تحت من خط البداية من تحت صح؟ بدي
أحسب المسافة من خط البداية اللي عند الحمرة بدي
أُقيس بالمسطرة جدّيش قطعت الحمرة مسافة تمام؟ على
المسافة اللي قطعها الـ mobile phase من البداية
لوين وصل يعني الجزء الأزرق السائل الأزرق هاد من
وين كان من البداية لفوق لجزء الأزرق لآخر وين وصل
هذه المسافة كلها برضه بدّه أقيسها في المسطرة ال
retention factor هو عبارة عن المسافة اللي قطعتها
المادة من خط البداية على المسافة اللي قطعها ال
solvent كامل من خط البداية لعند ما وصل هذه اسمها
retention factor إذًا ال retention factor هي
المسافة اللي قطعتها المادة أعلى المسافة اللي قطعها
ال solvent من خط البداية إلى وين وصل كده بيطلع
عندي رقم كل مادة إلها retention factor معروف
ومحفوظ في جدول وجدول علماء ومكتوبة في جدول برجع
لهذا الجدول بدور على الرقم اللي طلع معاه retention
factor اللي طلعت معاه بطلع بروح بدور في الجدول
مثلًا ستة بروح أشوف قبل الستة مين هي المادة بس بطلع
اسمها و بكون عارفيتها، بعرفها مثلًا نص، بروح للجدول
بطلع مين النص؟ مثلًا لل glycine طلعت النص، إذا
المادة هي عبارة عن glycine ف qualitative analysis
كيف؟ من خلال أني أحسب ال retention factor
Quantitative determination برضه بيستخدم ك
quantitative quantitative يعني كمية يعني بتعرف
كمية المادة الموجودة جدّيش كميتها بيحكي لي هذا بيتم
معرفته بناء على ال intensity of a spot وبناء على
ال size of the spot بناء على شدة ال only spot هي
اللي جيت بعد ما يفصل المواد وبيعطينيها على شكل
نقاط spot بنسميها نقاط هذه النقطة جدّيش حجمها
الدائرة اللي طلعت معي جدّيش حجمها اللي هي صغيرة
ولا كبيرة طب الشدة قديش هي واضحة، نغامجة ولا إنها
خفيفة؟ هذه بتحدد لكمية المادة إذا كان مثلًا حجمها
كبير إذا هي مادة موجودة بكمية كبيرة إذا حجمها صغير
موجودة بكمية أقل تمام، بدي أعرف بزيادة ال
quantitative analysis بيستخدموا جهاز اسمه الـ
densitometer جهاز اسمه densitometer يستخدم في تقنية
ال chromatography for quantitative determination
يعني هو جهاز instrument to detect the color .. the
intensity of color هو جهاز يستخدم لمقياس شدة لون
للبقعة اللي ظهرت عندي في تقنية ال chromatography
عشان يعطيني quantitative determination للمادة إذا
بيستخدم التقنية الـ chromatography for qualitative
و quantitative للكمي و الجودة paper chromatography
ال paper احنا اليوم هنستخدم paper chromatography
ال paper chromatography حكينا إن ال stationary
phase عبارة عن paper و ال solvent ال mobile phase
بيكون liquid ال paper chromatography بحط عليها
العينات بحمل عليها العينات إن أنا بدي أحط الخليط
من المواد على ال paper على ال stationary phase على
هيئة ال spot بحط نقطة من هذا الخليط على هذه الورقة
بعدين الورقة بغمرها في ال solvent بغمرها dipped
into a solvent بغمرها في ال mobile phase بيبدأ
يطلع يمشي ال mobile phase عبر ال stationary phase
بيمشي السائل للأعلى بناء على خاصية ال capillary
action الخاصية الشعرية و طول ما هو ماشي السائل
بتنفصل الخليط إلى مكوناته بناء على ايش حكينا
الفاصل؟ بناء على ال solubility و ال attraction مدى
ذائبيتها في الـ Mobile Phase ومدى تجاذبها مع الـ
Stationary Phase إذا أنا ده تكرار الكلام كله الـ
principle of paper chromatography الـ capillary
action هي شيء هي movement of liquid within the
space of a porous material هي حركة ال mobile phase
عبر ال stationary phase ال capillary action هي
عبارة عن movement of liquid اللي هو ال mobile
phase within a porous material اللي هي ال
stationary phase بس بتعبير آخر هي حركة ال mobile
phase عبر ال stationary phase الـ Liquid اللي هو
الـ mobile phase بيتحرك عبر ال paper بسبب أن
الجاذبية ال attraction التجاذب أقوى من قوة
الجاذبية بناء على أي مبدأ هيتم الفصل وبناء على ايش
حكينا بناء على like dissolve like وبناء على ال
solubility مع ال mobile phase و ال affinity أو ال
attraction with stationary phase إذا ال principle
لو بدي أُلخصه هو حاجتين ال affinity with mobile ال
affinity أو attraction with stationary phase و
solubility with mobile phase الـ Thin Layer
Chromatography هي تقنية لفصل المواد بيكون فيها الـ
stationary phase عبارة عن Thin Layer عبارة عن طبقة
خفيفة رفيعة of silica بتكون عبارة عن هذه الطبقة
سيليكا أو ألمنيوم سيليكا مدعمة بسطح من جلاس أو ألمنيوم
برضه لتدعيم إذا الـ thin layer chromatography هي
عبارة عن سيليكا بيكون ال stationary phase ورقة
رفيعة من السيليكا مدعمة بسطح من جلاس أو ألمنيوم السيليكا
جيل هتكون هي ال stationary phase أما ال solvent هو
ال mobile phase إذا ال thin layer chromatography
بدك تكون عارفة إن هي عبارة عن سيليكا ال stationary
phase عبارة عن سيليكا و ال solvent هو ال mobile
phase ايش مبدأ الفصل ال principle ملخص ال principle
كله حكيناه إنه عبارة عن affinity with stationary
phase و attraction with mobile with stationary
phase و solubility with mobile phase أجيّت هذا
الكلام اللي أجيّت مكتوب في ال principle كله تكرار
للي قلناها different compound in sample mixture
travel different distance according to how
strongly they interact with the stationary phase
and mobile phase بيحكي لي المواد بتمشي اللي موجودة
في الخلط بتنفصلها و بتمشي مسافات مختلفة كل واحدة
بتقف في مكان في مسافة مختلفة في مكان مختلف بناء
على ال attraction بناء على ال interact بناء على
التجادب مع ال stationary phase و ال mobile phase
المواد اللي موجودة في الخليط بتختلف في قوة ذائبية
والالتصاق مع ال stationary أو مع ال mobile phase
ال mobile phase اللي هو ال liquid أو ال eluent
نفس المسمى
وهو يرتفع ببطء بيقول إن السائل اللي هو الـ mobile
phase بيمشي عبر الـ stationary phase اللي موجود في
الـ thin layer كروماتوجرافي بالخاصية الشعرية بالـ
capillary action separation of compound is based
on the competition of the solute and the mobile
phase for binding substances بيقول لي إن فصل
المواد بناء على التنافس بين ال mobile phase و ال
stationary phase على هذه المواد مين ياخذ مواد أكثر
وهذا بناء على solubility أنا جيت اللي احنا
بنستخدمها هي thin layer chromatography و الـ thin
layer حكينا إنه عبارة عن silica gel و السيليكا هي
polar فبيحكي لي if normal phase إذا احنا استخدمنا
silica gel as stationary phase ال stationary phase
يكون عندنا silica gel فهو polar ف أنا لو حطيت
مادتين بيختلفوا في ال polarity تمام؟ المادة اللي
هتكون Polar، More Polar، Stronger Attraction
والسيلكا، مدام خصائصها Polar، المادة هي Polar، إذا
إن بتشبه خصائص السيلكا، هي Polar زيها، إذا إنّها
تلزق في الـstationary phase في السيلكا ومش هتمشي
للأعلى أما المواد الـNon Polar هي اللي هتمشي
لأعلى، move higher up to the plate فهتمشي أعلى
الأسرع للأعلى مع ال mobile phase لأن خصائصها تشبه
خصائص ال mobile هي non polar زي ال mobile لأن ال
stationary silica وهي polar فهذا
ال principle كله كلام زي اللي حكيناه ملخص ال
principle كله بكلمتين هي عبارة عن attraction with
stationary phase و solubility with mobile phase
retention factor حكينا عنه هو العامل المحافظة
بيحكي إنه كل مادة كيميائية لها retention factor
خاص فيها من خلالها بعرف هذه المادة كل مادة لها
retention factor خاص فيها أنا بحسب retention
factor بعد ما تفصل المواد بحسب لكل مادة retention
factor حكينا قانون ال retention factor ايش هو هو
المسافة اللي قطعتها المادة من البداية لوين وصلت على
المسافة اللي قطعها ال solvent ال mobile phase من
البداية لوين وصلت زي ما أنتم شايفين هنا مثلًا أجد
خط البداية اللي هو تحت أنا حاطيت الخليط من الخط
اللي تحت النقطة الحمراء مثلًا بُقيس المسافة بالمسطرة
من البداية لوين هي وصلت على المسافة اللي مشيها
المحلول من خط البداية للنهاية وبشوفها بُقيسها على بعض
هذا الناتج وبيطلع عندي هذا ال retention factor
برجع للجدول المعروف و بشوف جدّيش لكل مادة the
stationary phase in thin layer chromatography نيجي
نحكي عن ال thin layer chromatography الـ Thin Layer
Chromatography حكينا إن الـ Stationary Phase هي
عبارة عن Silica Gel و Silica Gel عبارة عن Polar
نيجي نتعرف على Silica Gel بيحكي إن Silica Gel is a
form of Silicon Dioxide هي عبارة عن Silicon
Dioxide بتكون من Silicon أتم من ذرات السيليكون
مرتبطة بجزيئات أكسجين ال structure الموجود فوق في
أقصى اليمين في
stationary phase عندك 10 layer chromatography و
عندك مادة A و مادة B A كانت polar و B non polar
مين اللي هتمشي إلى الأعلى أكتر؟ إذا أنا بدي
أفهم لحالي 10 layer chromatography إذا ال
stationary phase بدي يكون polar فالمادة A إذا كانت
هي ال polar هي اللي هتمشي إذا المادة A هي ال polar
إذا أن هي مش هتمشي هي اللي هتضلها لتحت بس إذا
المادة B ال non polar هي اللي هتمشي لفوق لأنه
thin layer chromatography بتتفاعل مع طول ال
stationary phase بيكون polar فالمادة ال polar
هتلزق و مش هتمشي للأعلى و المادة ال non polar هي
اللي هتمشي للأعلى طب في عندنا تقنية ثانية اسمها
Electrophoresis في عندنا احنا اليوم حكينا عن تقنية
ال chromatography في عندنا تقنية ثانية اسمها
Electrophoresis لنقارن بين التقنيتين بحكيلي بناء
على ال definition بناء على التعريف ال
chromatography معناها فصل خليط من عدة مكونات
بناء على two phases اللي هي ال stationary phase و ال
mobile phase إذن تقنية الـ chromatography هي فصل
خليط من المواد بناء على ال stationary phase و ال
mobile phase أما ال electrophoresis هي فصل خليط من
عدة مكونات بناء على الخصائص الكهربائية على ال
electrical field هو فصل بناء على الخصائص
الكهربائية ال electrophoresis أما ال
chromatography هو فصل بناء على stationary phase و
mobile phaseالعينة اللي ممكن استخدمها في حالة ال
chromatography ايش العينات اللي بقدر أفصلها ممكن
أفصل عينات تكون liquid ممكن تكون solid ممكن gas
بيقدر يفصل عينات تكون سائلة ممكن صلبة ممكن غازية
ال electrophoresis بيقدر يفصل عينات تكون سائلة و
صلبة فقط بيقدرش يفصل الغاز الـ Principle المبدأ
للكروماتوغرافيا حكى هنا إن المبدأ الكروماتوغرافي الـ
Principle هو attraction with stationary phase و
solubility with mobile phase أما الـ
Electrophoresis هي فصل بناء على الـ electrical
field بناء على الخصائص الكهربائية بناء على ال
electrical properties إذن هو فصل بناء على الخصائص
الكهربائية الـ Principle لأ للـ Electrophoresis
بناء على الخصائص الكهربائية بناء على الـ
Chromatography بناء على ال attraction with mobile
phase with stationary phase with solubility with
mobile phase