بسم الله الرحمن الرحيم موضوع المعمل اليوم
reticulocyte count اللي هو عد خلايا ال
reticulocyte بداية خلينا نعرف إيش هي ال
reticulocyte وإيش الفايدة من عد ال reticulocyte
وهنتعلم كيف نعدها تحت الميكروسكوب ال reticulocyte
هي عبارة عن immature RBCs تحتوي على بقايا
cytoplasmic RNAيعني هي RBCs فقدت نواتها لكن تبقى
فيها بقايا من الـ RNA وبعض الـ organelles زي
الميتوكندرية والـ ribosomes طبعا إحنا عارفين الـ
maturation stages بتاعة الـ erythrocyte تبدأ بالـ
pronormoblast، mesopheric normoblast،
polychromatic normoblast، orthochromic normoblast
فالـ Atlas stages هذه كلّياتها وين بتكون؟ بتكون في
البون مارو يعني في الوضع الطبيعي مفروض ما أشوفش أي
واحدة منها دول في الـ Peripheral blood بعد هيك
بتفقد الخلية نواتها مع بقاء بقايا من الـ RNA والـ
mitochondria في خلية بسميها Polychromatic
erythrocyteبولي كروماتيك اللي هي الخلية اللي بتعطي
تغير بولي كرومازي يعني تعدد في لان الـRBCs اللي هي
الـreticulocyte طب ليش سميناها بوليك؟ يعني ليش
بتعمل تغير في لان الـRBCs؟ لأنه بقايا الـRNA اللي
في الخلية هتاخد صبغة الميثيلينبلووالـ Erythrocyte
نفسها هتاخد صبغة الـ Eosin فهتظهر الخلية بلون ما
بين الأحمر الـ Pink اللي هو جاي من الـ Eosin Blue
وما بين الـ Mycelin Blue الأزرق يعني هتاخد لون
Pink على زرق شوية الزرق هذا جاي من وين؟ من بقايا
الـ RNA اللي موجود في الخلية وسميت Reticulocyte
لأن هذه البقايا بتبقى عاملة في داخل الخليةزي الـ
reticulum زي الشبكة من هنا أجى اسم reticulocyte
بعد هيك بيصير عندي ال mature erythrocyte اللي
بتعيش 120 يوم في الـ peripheral blood طيب احنا من
كل الكلام هذا بدنا reticulocyte فلقيت ال
reticulocyte بتتصنع وين؟ في البون مارو يعني لما
بتفقد ال orthochromic normal blast نوع اتها وين
بتكون؟ بتكون في البون ماروبتفقد النواء وبتتحول لـ
reticulocyte اللي هي الخلية محور كلامنا اليوم خلية
الـ reticulocyte خلية الـ reticulocyte هذه تمكث في
البوم مره من يومين إلى تلت أيام في الوضع الطبيعي
قبل ما تطلع على الـ peripheral blood بعد هيك بتطلع
على الـ peripheral blood وهي في الـ peripheral
blood بتقعد يوم واحد بس وبتتحول لـ mature
erythrocyteيعني فترة مقوثها في الـ peripheral
blood هتكون فقط يوم واحد يعني مش هلاقيها هتطول في
الـ peripheral blood في الوضع الطبيعي تمام؟
reticulocyte count إيش فايدة reticulocyte count?
reticulocyte count إحنا قولنا إنه الـ reticulocyte
بتتكون و بتقعد يوم واحد في الـ peripheral blood
صح؟بعد ذلك تتحول إلى mature erythrocyte فبالتالي
أنا لما بحاول أعمل عدل الـ reticulocyte بدي أشوف
هل الـ bone marrow شغالي كويس و vintage كلايا RBCs
ولا فيه مشكلة يعني هي بتعكسلي الـ effectiveness of
red cell production from bone marrow ال
reticulocyte إنها normal يعني يعني نقول مثلا من نص
إلى واحد و نص في الميةيعني نص الـ RBCs إلى 1.5
RBCs في المية Reticulocyte إذا كان العدد طلع معايا
في هذا الـ Range معنى الكلام إنه الـ Reticulocyte
إنتاجها كويس يعني البون مارو شغال كويس ضمن الـ
Normal Range لا أكثر ولا أقل إذا كانت عدد الـ
Reticulocyte أقل من نص معنى الكلام إنه في كسل في
البون مارو البون مارو ما بينتج Erythroid cells
بشكل جيدلو كان الـ Pearson أعلى منه 1.5 بقول إنه
فيه «اريثرويد هايبربلاشيا» يعني خلايا الـ RBCs فيه
نشاط زائد في تصنيعها فأدى إلى خروج reticulocyte
بشكل أكبر من الطبيعي طيب، تلينا مع بعض نحاول نفهم
من وين الـ Normal Range هذه أجت، تمام؟ إحنا بدنا
نستنتجها، فلقد إحنا اتفقنا إن عمر الـ RBCs100 يوم
100 إلى 120 يوم ناخد كمتوسط 100 يوم يعني كل 100
يوم بيصير تغيير كامل لكل الـRBCs اللي في
الـPeripheral Blood صح؟ يعني في اليوم الواحد قدش
بتغير؟ يعني إذا أنا بالـ100 يوم بصرف 100 شكل مثلا
باليوم الواحد قدش بصرف؟ 1% شكل صح؟ وهدي نفس الأشي
إذا بالـ100 يوم كل الـRBCs بتتغيرباليوم الواحد،
واحد في المية من الـ RBCs هيتغير طيب واحد في المية
هيتغير ايش هيطلع بداله؟ هيطلع بداله reticulocyte
يعني هتكون نسبة الـ reticulocyte هي نفسها نسبة الـ
RBCs اللي اتسرت يومياًيعني هينزل Reticulocyte بما
يعادل 1% من الـHoly Blood أو من الـTotal RBCs
الموجودة في الـPeripheral Blood بمعنى إن الـNormal
Range 1% طبعا إحنا مافيش عندنا Target دايما بنحط
Range بنحط من نص إلى 1.5% يعتبر within Normal
Range طبعا إذا نثبتالـ «بون مارو» نسبة الـ
reticulocyte 1% ثم الـ «بون مارو» تقوم بتغيير
تقريبًا 1% من تجارب الأخرى كل يوم كل يوم تتغير
تقريبًا 1% من الـ reticulocyte من الـ «اربسيز»
يومياً وبتم استفدالها بـ reticulocyte الـ absolute
count هيكون اللي هو إيش يعني absolute count؟ العدد
بالـ «مايكروليتر» أو بالـ «مليمتر المكعب»هيكون من
25 .. هنتعلم كيف نحسبه من 25 لـ 75 ألف بير مايكرو
لتر
أمتى ممكن يزيد عدد الـ reticulocyte؟ عدد الـ
reticulocyte ممكن يزيد في حالات ما بيكون في
activation للـ bone marrow أو hyper stimulation
للـ bone marrow أمتى ممكن يصير hyper stimulation
للـ bone marrow؟ لو كان في خلل في الـ peripheral
blood يعني أثر على الـ RBCs أدى لمثلًا تكسير في
الـ RBCsنزيف أدى لفقدان كمية من الـ RBCs قد يكون
acute أو chronic أي سبب من الأسباب اللي أدت لنقص
مكونات الدم وعملت Hypoxia في الأنسجة تمام؟ هنا من
ضمن الأنسجة اللي هيصير عندها Hypoxia الـ kidney
الـ kidney خطأ للهرموان الـ erythropoietin الـ
erythropoietin هيعمل stimulation للـ bone marrow
إنه طلّع RBCs عشان يتعود الخلل اللي صار في الأنسجة
عشان تتعود الـ Hypoxia أو تحل مشكلة الـ Hypoxia
اللي صايرة بالأنسجة، تمام؟ إذا الـ bone marrow
شغال كويس، حيطلّع وحيصير فيه stimulation أكتر من
الطبيعي عشان يطلّع خلاية سد العجز اللي صار من
الحالات هذه الـ Thalassemia، Sidroblastis Anemia
Acute and Chronic Blood LossHemolytic Anemia
Pregnancy Pregnancy Pregnancy Pregnancy
Pregnancy
Pregnancy Pregnancy Pregnancy Pregnancy Pregnancy
Pregnancy
Pregnancy Pregnancy Pregnancy Pregnancy Pregnancy
Pregnancy Pregnancy Pregnancy Pregبس الـ Boomer
وكان فيه كسل لأنه مافيش عناصر للتصنيع لكن يوم ما
ياخد علاج هيرجع الـ Boomer يتنشط ويصنع خلايا حتى
هيكون الـ reticulocyte count عندهم أكبر من الطبيعي
لأنه بدي يساعد العالج المشكلة اللي صارت برضه بعض
الـ Medications اللي ممكن يتنشط الـ Boomer هترفع
عند الـ reticulocyte count طيب الـ reticulocyte
standing كيف أنا بدي أشتغل أو بدي أعمل
reticulocyteفلقيت لو جينا على الـ Right Stem
العادية الصبغة العادية اللي هي الجمزة والليشمن
والـ Right اللي بسبق فيها الـ Blood Film بالطريقة
اللي احنا حكينا عنها هتظهر الـ reticulocyte
polychromatic يعني لون pink على ذراء شوية أو ممكن
تكون macrocytic يعني أكبر شوية من الـ erythrocyte
بس هذا مش مقياس يعني مش كل ال reticulocyte هتظهر
واضحةبالـ Blood Film وبرضه حسب الصبغة ما هي ممكن
يكون فيه خلل معين بالصبغة يأثر عليهم الخلايا فما
أميز الـ Reticulocyte من خلالها عشان هيك أنا ما
بنفع أعد الـ Reticulocyte من خلال الـ Blood Film
العادى بعد الـ Reticulocyte بطريقة مختلفة هلئة راح
نشوفها مع بعض تمام الـ
Reticulocyte Staining كيف بعملها؟باستخدم أصباغ
بسميها «vital dyes» أو «super vital stains»
الأصباغ هذه بتصبغ الخلايا وهي viable وهي حية يعني
أنا إذا فكتين في الـ blood film أول حاجة فردت بعد
هيك جففت ال blood film بعدين عملت fixation طبعا
الخطوات هذه لم تبقي أي خلية viable كل الخلايا
هتموت إذا بعملنا fixation وتجفيف و fixation هتموت
الخلاياأنا عشان أصبغ الـ RNA والـ Organelles اللي
في قلب الخلية لازم الخلية تبقى حية عشان الصبغة
تقدر تدخل من الـ Cell Membrane وتصبغ المكونات اللي
في داخل الخلية فمن الأصباغ الـ Supravital Stains
اللي بأستخدمها صبغة لـ Neomycelin Blue بريليانت
كريزلي بلو بيور أزاربي هذه صبغات أنا ممكن أستخدمها
بتعمل الـ precipitation للـ RNA والـ organelles
وبتعمل filamentous network of reticulum بتعمل عندي
شبكة من ال organelles موجودة في داخل الخلية وبتكون
واضحة جدا وماخدة لون الصبغة اللي أنا حطيتها عليها
تمام هيك؟ هي عندنا صورة كتير واضحة زي ما أنتوا
شايفين هذا فيلم تم إعدادهبعد صباغة الخلايا بالـ
Supravitalistان الخلايا
زي ما انتوا شايفين ماخدة اللون الأزرق مش اللون الـ
Pink لأنها مسبوقة بالـ New Mycelin Blue هي مش
هتاخد اللون Pink هنا هناك كانت تاخد اللون Pink
لأننا كنا نستخدم صبغتان مع بعض مخلطين الـ Eosin و
الـ Mycelin صح؟ هنا لأ صبغة واحدة اللي هي الـ
Mycelin Blue فهتظهر الخلايا كلها باللون الـ Blue
بينما الخلايا اللي فيها reticulocyte هتكون أكبر
شوية من الخلايا اللي mature شوية صغيرة أكبر وممكن
يكون حجمها قريب منها أو زيها هنلاقي فيها زي شبكة
من الترثبات اللي هي ناتجة عن الـRNA وبقايا
الـorganelles الموجودة في الخلية إذن هذا هو شكل
الـreticulocyte إن شاء الله ربنا يقدر ونصبغ
ونشوفها ونعدها ونتعرف عليها
هي شكل آخر هنا ملاحظين هذا blood film عادي هي
reticulocyte اللي مشاور عليها خلايا أكبر شوية وما
أخد لون على زراعي بس مش كتير مميز يعني عشانك ما
بعدها من خلال blood film العادي لأ بعدها من خلال
الفيلم اللي تم إعداده بال super vital stain زي هذا
هي في عندى هنا هي reticulocyte وهي reticulocyte
وهي كمان فوق reticulocyte أو ضح منهم
العينة اللي باخدها باخد عينة whole blood بإيديتا
ممكن أستخدم capillary blood بدون إيديتا يعني micro
sample من skin puncture طبعا قلنا to detect the
presence of reticulocyte the cells must be stained
while they are still living يعني لازم أصبغها وهي
حيةالعملية هذه
صباغة الخلية وهي حية بسميها subravital staining
holy blood is incubated with a new methylene blue
يعني بصبغ ال blood يعني بجيب ال holy bloodبعمله
incubation في تيوب مع الـ Neomycelin Blue يعني ما
بفرد و بعدين بصبغ لأن الفرد هيموت الخلايا، لأ أول
أشي بصبغ، يعني بجيب equal volume من الـ blood و من
الصبغة بحطهم في تيوب بحضنهم، بعملهم incubation في
37 درجة مدة 10 دقائق أو أكتر أو أقل حسب وقت
الصباغة اللي أنا بجربه و على الأقل بيكون 10 دقائق
المهم بعمل الصباغة هادي بحطهم مع بعض و بحطهم في ال
water bath بعد ما أحطهم في ال water bath بطلعهم
بعمل لها mix للعينة باخد منها drop و بفردها يعني
التسلسل بصبغ بعدين بفرد عكس ال blood film ال blood
film كنت أفرد و أعمل fixation بعدين أصبغ هنا لأ
أنا مديش أموت الخلايا باخد الخلايا بصبغها و بعدين
بفردها تمام؟
بعد هيك بعمل سمير من الـ mixture و باجي بعد الـ
reticulocyte اللي موجودة في ألف erythrocyte كيف
يعني بدي أعمل؟ بدي أجي مثلا في عندي field بدي أعد
كل ال RBCs اللي فيه تمام؟ و أشوف قداش فيهم
reticulocyte و أجي أسجل مثلا طلع عندي 200 RBCs
فيهم 22 reticulocyte باجي على ال field اللي بعده
طلع عندى مثلًا 320 RBCs طلع فيهم 4 Reticulocyte
مثلًا بمهم الآن لغاية موصل ألف ألف إيش الـ Total
RBCs ألف RBCs الـ Total كل الـ RBCs اللى عديتها
ممكن أخدهم في أربع fieldات في خمس fieldات حسب الـ
thickness بتاع ال field اللى أنا محضرةالمهم أعد
ألف retrosite و أجيب عدد الـ RBCs اللي فيهم عدد
عفوا عدد عفوا عدد ال reticulocyte اللي فيهم يعني
مثلا أنا في الألف عديت على سبيل المثال نقول
خمستاشر reticulocyte إذا عدد ال reticulocyte اللي
عديتهم خمستاشر في الألف طب هنشوف كيف بدنا نحسبها
في المية نسبة مئوية خمستاشر على ألف في مية خلت راح
تشوفوها
بالطريقة قلتلكم إياها أنا وإن شاء الله ربنا نقدر
الظروف ونشتغلها مع بعض إنه بعمل mixing ل equal
volume بعد هيك بعمل incubation مع بعض و بحطها على
10X عشان أجيب ال field بعد هيك العد يا بنات بده
أختار منطقة مكونة من الـ monolayer طبقة واحدة من
الخلايا تمام؟ و أحط على 100X و أحط ال oil و أبلش
أعدأبلش إيش أعد طيب هنا طريقة الحسابات بتاعتي بدي
أجيب نسبة ال reticulocyte بجيب عدد ال reticulocyte
اللي أنا عديتها في ألف مثلا عديت خمستاش في الألف
بقول في مية على ألف اشهد الألف اللي هي عدد ال RBCs
الكل اللي أنا عديت فيه تمام؟ بطلع عندي نسبةالـ
reticulocyte هاي عندنا example احنا عدينا 25
reticulocyte في ألف الـ reticulocyte count بيساوي
25 في 100 على 1000 بطلع 2.5% إيش يعني؟ يعني نسبة
الـ reticulocyte للـ holy blood 2.5 2.5 من الـ
RBCs في المية 2.5% من الـ RBCsاش reticulocyte
في واحد أجأل والله طريقة العد هذه شوية صعبة يعني
أنا بدي أجي تحت ال field أعدل 200، 1000 خلية، إشي
بيزفق فراحت تكر شغلة بسيطة هيك اسمها الـ Miller
disk هذا عبارة عن قرص شفاف بنحط على العدسة العينية
بيصير يظهر عندي هذا المنظر، إيش المنظر هذا؟ هذا ال
field الكليء الخارجي، الدائرة الخارجية، هذه عبارة
عن ال fieldوالمربع اللي في الوسط هو عبارة عن الرسم
اللي رسمها عبارة عن مربع A وفيه كمان مربع صغير
مساحة المربع الصغير تسعى المساحة الكلية كويس؟
مساحة المربع الصغير بتشكل تسعى المساحة الكلية تسعى
المربع A طب إيش الفايدة منها هذه؟أه البدل ما أنا
أعد الـ RBCs في كل الـ field هذا بروح بعد في
المربع B مثلا طلع عندي 50 خلية إذا في المربع A أكم
خلية؟ 50×9 450 خلية اكسهل على حاله عداش الـ RBCs
طيب عدينا الـ RBCs في المربع الصغير وعرفنا قداش
العدد في المربع الكبير طب بالنسبة للـ reticulocyte
الـ reticulocyte عددها بيكونش كتير فمش راح أتغلب
لو عديتها في المربع A كله يعني بعد ال reticulocyte
في المربع الكبير كله و لنفترض طلع عنا عشرة إذا عدد
ال reticulocyte عشرة مقابل 450 RBCs تمام؟ بنقل على
field تاني و بكرر نفس العملية هذا بيسهل عليا عشان
ماضلش أعد خلايا بالألاف يعني بعد تسع الكمية و بضرب
9هي هنا بقولك هو عدد reticulocyte في الـ Square A
بس في أكتر من field مش في field واحد جمعهم مع بعض
طلع العدد معاه 100 فكان عدد reticulocyte لكل اللي
عدوا 100 وعدد ال RBCs لكل اللي عدوا 500 طبعاً الـ
500 كانت في المربع B بس في أكتر من field يعني في
fieldات متعددة فضرب الـ 500 في 9أه وأه العدد الـ
reticulocyte على عدد الـ RBCs الكلي زي ما قلنا عدد
الـ reticulocyte على عدد الـ RBCs الكلي في 100%
فبتطلع عند Ash نسبة الـ reticulocyte يعني هذه
طريقة مبسطة إحنا مش هنشتغل فيها إحنا هنعد ال field
كله ونعد قداش في reticulocyte عشان نتعلم منها طيب
كيف طريقة تسجيل النتائج أول حاجةقلنا احنا على الـ
percent count صح؟ قلنا بنسجل كنسبة مئوية في عندى
طريقة تانية الـ absolute reticulocyte count اللي
هو الـ actual number للـ reticulocyte في الـ
microliter أو في الـ liter بسبب الوحدة اللى أنا
بستخدمهاكيف بعمله هذا؟ كيف بحسبه؟ بحسبه عن طريق
النسبة اللي طلعتلي بضربها في عدد الـ RBCs الكلي
يعني is calculated by multiplying the reticulocyte
percent by the RBCs count and divided by 100 طبعاً
هذه لأن أنا عملها كنسبة مئوية يعني hundred
reticulocyte مثلاأتنين في المية فممكن أكتبها اتنين
من مية أو أقسم على مية for example هنا بقول ال
critical site كانت اتنين في المية و ال RBCs اتنين
و اتنين من عشرة في عشرة أقص اتناش كيف بدي أحسبها
هذه اتنين تمام ضرب اتنين و اتنين من عشرة في عشرة
أقص اتناش مقسومة على مية اللي هي تاعة المسبة
المئوية بطلع عندي أربعة وأربعيناللي هي هتطلع 440
ألف لكل microliter 440 ألف لكل microliter تمام هك؟
نيجي لـCorrected reticulocyte count وضروري نفهمه و
نعرف إيش مدلوله هلئد إحنا اتفقنا إن reticulocyte
count لازم يعكس عنديTotal Production of Red Cells
لازم يعقس عندي نشاط البونمرو وإنتاجه للـ RBCs بغض
النظر عن تركيز الـ RBCs in the peripheral blood
يعني بغض النظر عن عدد الـ RBCs اللي بطلع معايا في
الـ CBC في الـ Microliter أو في المليمتر المكعب
طيب، توضيح يعني أكتر لهذه النقطة The reticulocyte
count ممكن يزيدلسببين الـ reticulocyte count ممكن
يزيد لسببين السبب الأول أنه فعليا زاد إنتاج الـ
reticulocyte من الـ «بولمارو» هذا السبب اللي احنا
بدنا ياه أو احنا بدنا نوصل له احنا بدنا نعرف أنه
أو نوصل لإنه أي زيادة في الـ reticulocyte لازم
تكون بسبب زيادة في إنتاجها من الـ «بولمارو» السبب
التاني أنه عدد الـ RBCs في الـ peripheral blood
قليلفالعدد اللي طلع من الـ reticulocyte قفف في عدد
قليل من الـ RBCs ولمّا أجيت أنا أحسب النسبة كنسبة
مئوية طلعت عالية يعني تخيلي عندي شخصين واحد فيهم
الـ RBCs عنده 2 مليون وواحد 4 مليون، كويس؟ أبو 2
مليون اتنين بيطلعوا نفس عدد الـ reticulocyte
يومياً يعني هذا بيطلع مثلا ألف reticulocyte وهذا
بيطلع ألف reticulocyte قالت لو جيت أحسب النسبة لكل
واحدالـ 1000 الأولى هتتخفف في 2 مليون والـ 1000
التانية هتتخفف في 4 مليون، صح؟ يعني الأول اللي الـ
RBCs عنده 2 مليون هتبقى النسبة عنده ضعف اللي عنده
الـ RBCs 4 مليون، ليش؟ لأنه فعليًا الـ RBC الـ
Reticulocyte اتخففت في عدد أقل من الـ RBCs عند
الأولاني يعني ممكن الأولاني يلاقي الـ Reticulocyte
عنده مثلا 4% والتاني 2%هل معنى الكلام إنه الأول
إنتاج للـ reticulocyte أنشط؟ لأ وإنما لأن الـ
reticulocyte اتخففت بعدد أقل من الـ RBCs في الـ
circulation عشان هيك احنا لازم نوجد حل هذا الموضوع
لازم إذا كان في عند زيادة في الـ reticulocyte تعكس
زيادة فعلية في نشاط البولمارو مش لأنه الـ
reticulocyte اتخففت في عدد قليل من الـ RBCs عشان
هيكبدنا نعمل correction الـ «correction» هذا يعني
كأنه أي شخص الـ «RBC» عنده Normal لو كانت الـ
«RBC» عنده Normal قدّاش هذا عدد الـ «Reticulocyte»
هذا قدّاش بيكون في هذه الحالة يعني مثلا اللي قلنا
عنهم التانين توي المثال اللي أنا ضربته قلتلكم
الأول تطبع عنده نسبة 4% والتاني 2% لكن هم فعليًا
يعني نفس الكمية بنتجه فأنا بدي أخلي أول 4% يوصل
لـ2% كأنه الـRBCs يعني أنت أفترض أن الـRBCs عنده
طبيعية وفي هذه الحالة أداش بدتكون نسبة
الـReticulocyte بهذا الطريق خليني أشوف في الـslide
الجاية مثال برضه يعني بيوضح حد أو بعزز هذا المفهوم
خليني نفهمه اللي مافهمتش هذا المثال هتفهم التاني و
تجه لك مثالبقولك Compare the following two
patients عندك مريضين patient number one عنده
hematocrit 42% وreticulocyte طلعت معاه 1% patient
2 الـ hematocrit 21% وreticulocyte طلعت عنده 2%
ناح؟هذا تقريبًا نفس اللي قلناه ما هو الـ
Hematocrit كأنه بعبر عن عدد الـ RBCs، مصبوط؟ يعني
هذا عنده الـ RBCs أكتر من هذا عشان هيك هذا طلعت
الـ reticulocyte عنده 1% وهذا 2% patient 2
theoretically has one-half as many red cells as
patient 1 يعني نظريًا المريض رقم 2 هذا عنده نص عدد
الخلايا للمريض الأول، صح؟but has the same number
of reticulocyte as patient 1 ليش؟ لأنه قلنا هو
عنده نفس عدد reticulocyte بتاع patient 1 الاتنين
بنتجوا نفس العدد لكن الأول اتخفف في 42% في عدد
أكبر والتاني اتخفف في 21% في عدد أقل عشان هيك لازم
أعمل حاجة بسميها correct reticulocyte إيش هو هذا؟
بقول الـ Patient Hematocrit كويس مقسوم على الـ 45%
إيش هذا الـ 45% اللي هو الـ Normal Hematocrit الـ
Normal Hematocrit مضروب في الـ reticulocyte count
يعني لو كان عندي نشوف مثلا هذا قبل 2% بدنا نقول 2%
تمام مضروب في الـ Patient Hematocritاللي هو 21 على
45 اللي هو الـ Normal Hematocrit هيطلع تقريباً 1%
فأنا هيك بكون اتعامل مع المريض أو طلعت نتيجة كما
لو كان عدد الـ RBCs عنده Normal والـ Hematocrit
عنده 45 يعني كأني بقول هذا المريض رقم 2 كم ستكون
الـ Reticulocyte عندهلو كان الـ Hematocrit عنده 45
% بهذا الطريقة بقدر أعرف قداش فعليا الـ bone
marrow vintage reticulocyte اللي هي بضربالـ
percent count اللي أنا حسبته في ال patient
hematocrit مضروب على 45% طبعا يا بنات لو كان ال
hematocrit normal هيكون ال patient hematocrit
تقريبا 45 فكأني ضربة في واحد يعني مش هتفرق معايا
أو هيظل الرقم اللي أنا حسبها زي ما هو امتى هتفرق
لو كان ال hematocrit قليل for example if a patient
presenting with a reticulocyte count10% with a
hematocrit 22% the corrected reticulocyte would be
corrected reticulocyte count بنقول 10% مضروب في ال
patient hematocrit اللي هو 22 على 45 اللي هو ال
normal hematocrit بتطلع عندي 4 أو 9 من 10% يعني
تخيلوا بدل ما كانت ال reticulocyte عنده 10% أنا
حسبتها صحيح 4 أو 9 من 10% كما لو كان ال RBCs عنده
عددها طبيعيمدّيش بدها تقول نسبة reticulocyte عندك
طيب، بنيجي
لشغلة كمان اللي هي reticulocyte production index
إيش بتعني؟ هذه ببساطة إحنا اتفقنا يا بنات من
الأساس إن الـ reticulocyte بتقعد يوم واحد في الـ
peripheral blood، صح؟طيب لو كان الـ bone marrow
بشتغل تحت stress يعني مطلوب منه يطلع خلايا أكتر من
الطبيعي فيه نزيف فيه تكثير فيه أي سبب فصار الـ
bone marrow يشتغل بنشاط أكتر من الطبيعي هيك هيصير
يطلع reticulocyte immatureاحنا قلنا الـ
reticulocyte بتقعد تلت أيام في البون مارو وكمان
يوم في الـ peripheral blood مش هيك اتفقنا من
الأساس يعني كل عمر الـ reticulocyte يومين أو تلتة
في البون مارو زائد يوم في الـ peripheral blood
فلقيت الـ reticulocyte ممكن تصير تطلع من البون
مارو قبل ما تقعد اليومين أو التلت أيام اللي مقرر
إنها تقعدهم في البون مارو حتى كمان بنلاقي البون
مارو صار يطلع نيوكلية الـ RBCs يعني more early
stagesليش؟ لأنه فيه stress، فيه حاجة طيب، تخيلوا
معايا الـ reticulocyte بدل ما تقعد يوم قعدت تلت
أيام عشان تتحول لـ mature هذول التلت أيام كانت
المفروض تقضي معظمهم في الـ bone marrow لكن هي
قضتهم في الـ peripheral blood هيك أنا بصير اللي
فعليًا قعدهم، مش بس ساعوني اليوم أنا لما بعد الـ
reticulocyte بعد بس خلال 24 ساعة لأن 24 ساعة
وreticulocyte بتتحول أنا اللي بعدهم فعليًاالتعون
اليوم اتجمع مع تعون البارح ويمكن تعون قبل كمان يوم
يعني لو افترضنا ان البولمرق بيطلع كل يوم عشرة
reticulocyte فالمفروض تطلع معايا العشرة هذه لو ال
reticulocyte بتقعد يوم واحد بتطلع معايا العدد عشرة
لكن لو قعدت يومين أجمع العشرة تقعد اليوم وتقعد
امبارح لأنهم لسه ما اتحولوش هيصير عندي عشرين لو
بتقعد تقعد تقعد تقعد تقعد تقعد تقعد تقعد تقعد تقعد
تقعد تقعد تقعد تقعد تقعد تقعد تقعد تقعد تقعد تقعد
تقعد تقعد تقعد تقعد تقعد تقعد تقعد تطيب، هل هذا
بدل على إنه يعني فعلاً في إنتاج زيادة من الخلايا
ولا إيش الوضع؟ خلّيني نشوف، في عندى حاجة بسميها
«reticulocyte production index» منشوف معدل إنتاج
الـ «boomer» الفعلي للـ reticulocyte عن طريق إن لو
أنا عرفت reticulocyte percent count أسمته على عدد
الأيام اللي بتقعدها في الـ peripheral blood يعني
أنا توضربتلكم مثال، العشرةعشرة وعشرة وعشرة على تلت
أيام صاروا تلتين ليش؟ لو أنا عارفة إن الـ
Reticulocyte هذه بتقعد تلت أيام بقول تلتين على
تلاتة بطلع عندي المعدل الإنتاج اليومي للـ
Reticulocyte بطلع عشرة، تمام؟ فهم إيش بقولوا؟
بقولوا إذا أنت لقيت الـ Hematocrit منخفض خليني
أشوف الشريحة اللي بعدها
هذا توضيح للكلام اللي أنا شرحته بالشريحة اللي
قبلها خلّينا نشوفه الـ reticulocytes spend
approximately two to three days in the bone marrow
before being released into the peripheral blood
where they spend one day maturing in the
peripheral circulation under some circumstances
the marrow reticulocytes are released directly
into bloodيعني ما بتقعد ولا يوم ولا يومين ولا
تلاتة دُغري بتطلع على ال blood prior to maturation
in the bone marrow this is detected by nucleated
RBCs يعني حتى هنلاقي nucleated RBCs زي
polychromatic macrocyte shift cells اللي هي ال
reticulocyte polychromatic nucleated RBCs
وreticulocyte هنشوفهم في ال peripheral blood في
الcirculation to correct for the increased time
spent in maturation in the peripheral bloodيعني
عشان أعدل أو أعمل correction للوقت لزيادة اللي
بتقعد الـ reticulocyte في الـ peripheral blood الـ
reticulocyte production index is calculated بحسب
حاجة اسمها reticulocyte production index كيف
بحسبه؟ بأسم الـ corrected reticulocyte count على
عدد الأيام اللي ممكن تقعدها الـ RBC الـ
reticulocyte في الـ peripheral blood تمام؟ لغاية
ما تتحول ل mature RBCs هذا جدولبقولك قداش متوقع
الـ reticulocyte بتقعد في الـ peripheral blood
بناء على الـ hematocrit يعني لو كان الـ hematocrit
طبيعي 45 هتقعد يوم واحد زي ما اتفقتنا لو كان 35
هتقعد يوم ونص لو كان 25 هتقعد يومين لو كان 15
هتقعد تلت أيام، تمام؟فبالتالي أنا عشان أحسب الـ
reticulocyte production index بدي أشوف الـ
hematocrit والله كان الـ hematocrit 25 بدي أقسم
الـ corrected reticulocyte count على عدد الأيام
على كم قلنا 25 بدي أقسم على 2 لو كان 35 بدي أقسم
الـ corrected count على 1.5 and so on هاي عندنا
مثال بقولك a patient with reticulocyte countهذه
مثالة بتقولك إنه لو كان المريض عنده الـ
reticulocyte count 12% والهي مات create 25% قداش
الـ reticulocyte production index الـ reticulocyte
production index هيكون 7% مضروب فيه 25% على 45%
إيش هذا؟ أول إشي بنحسب الـ corrected count هذا الـ
count العادي 12%هو أول إشي حسب الـ «corrected
count» تمام؟ والـ «corrected count» بتداسمه على 2
فهك 3.3% الـ «reticulocyte production index» هك
«reticulocyte production index» أو «reticulocyte
count» «reticulocyte count» هنا بقولك «newborn» من
2.5 إلى 6 في الـ «adult» من نص إلى 1.5 أو إلى 2الـ
Absolute reticulocyte count 25 إلى 75 في 10 أو 9
per liter اللي هي 250 إلى 750 ألف بالـ Microliter
الـ reticulocyte production index المفروض يكون 3
أو أكتر عشان يكون الـ boomer استدل على إنه شغال
كويس ومافيش فيه مشاكل طيب،
هنا عندنا بعض النقاط للمناقشةهنا بقول لك when
using Edita as anticoagulant the blood may be
stored for 24 hours يعني لو انت استخدمتي Edita
ممكن تخزن الدم 24 ساعة وبيعطيكي نتائج مقبولة لكن
يفضل انه تعمليه من 6 إلى 8 ساعات maximum لأنه بعد
هيك هيبدأ ينزل عدد ال reticulocyte قبلش هيبدأ ينزل
لأنه هيبدأ يتحول ل mature يعني في عدد منها هيتحول
ل mature RBCs صح؟ في الـ tubeالظروف كلها مواتية
فتلاقيها هتبدأ تتحول لـ Mature Herpes The presence
of high blood glucose لو كانت نسبة السكر عالية أو
استخدمت الهيبرين كـ Anticoagulant في الصباغة طبعا
هنا هيعطيني بال Staining لل reticulocyte هتظهر
reticulocyte بلون فاتح
طيب بقولك في صبغات احنا الصبغة اللي بنستخدمها
عندنا اللي هي الـ New Mycelin Blue بقولك ممكن
تستخدم الـ Brilliant Grizzly Blue بس يعني مشكلتها
أنها بتعطي inconsistency في ال-staining مش كتير
جيدة الـ Pure Azarbium ممتازة بنستخدمها بنفس
التركيز والطريقة بتاعة الـ New Mycelin Blue الوقت
مهم يعني أحيانا إذا كان الوقت مش كافيهيطلع عندي
العدد قليل لأن مش كل الـ reticulocyte انصبغت فلازم
أعطي الـ reticulocyte وقت كافي عشان تنصبغ مش أقل
من 10 دقائق احنا عادة بنتركها تلت ساعة أو أكتر
بنلاقي الخلايا والـ RNA أخد صبغة جيدة وظهرت بشكل
كتير واضح الـ reticulocyte هنا بقولك لا ينصح بإنك
تعملي counters تاني للـ reticulocyte إيش يعني
counters تاني يعني تصبغي صبغة تانيةاللأ الـ
reticulocyte إحنا بنعملها بالطريقة اللي قلتلكم
عليها بصبغ بعدين بفرد و بعد تمام؟ في ناس بتحب
تصبغها كمان مرة بالـ hematologist خاصة إذا كانت
تحفظ الشريحة على فترات طويلة لأن الصبغة اللي هي
هذه الـ U.M.C. Blue دُغري بفتح لونها بقولك لا ينصح
إنك تصبغيها بصبغة تانية كيف بصبغها بصبغة تانية؟
فلإن بعد ما يجهزوا الشريحة تحت ال reticulocyte
تمام؟بفترضوا إن هذه هي الـ Blood Smear و بنبدأ
فيها صباغة من أول و جديد بنعمل Fixation و بنعمل
Staining بالجمزة أو بالRight Stem هيك الـ Counter
Stain بتنعمل يعني صبغة فوق صبغة موليك لا ينصح فيها
كتير ليش؟ لأن أحيانًا تعمل ال precipitation الصبغة
نفسها الـ Counter Stainوالـ precipitate دي قد تظهر
كإنها reticulocyte يعني ممكن تلخبطني مع الـ
reticulocyte إحنا قلنا من الأساس إنه أنا بحط equal
volume من ال blood إلى الصبغة، تمام؟ في بعض
الأحيان بقولك لأ إذا كان ال hemoglobin قليل يعني
ال blood ال RBCs فيه قليلة يفضل إني أزود كمية ال
blood شوية عن نسبة الصبغة، تمام؟لو كان الـ
Hemoglobin أعلى من الطبيعي بقلل كمية الـ RBCs عن
الصبغة يعني هو عند الناس الـ Normal بيكون فيه
تساوي كمية الصبغة مع كمية الـ Blood لكن لو الـ
Hemoglobin أليل بزود الـ RBCs لو الـ Hemoglobin
عالي بقلل الـ RBCs عشان يصير تناسب بين كمية الـ
RBCs و الصبغة و تنصبها تلاية بشكل جيد أي طيب، في
ملاحظة تانية برضههلأ إحنا بنعمل mixing للصبغة مع
الـ blood و بنعمللهم incubation في الـ water bath
فدلوقتي الحالة الـ incubation كافي لإنه بعض
الخلايا تترسب وتبدأ تفصل حسب كثفتها الـ
reticulocyte من الخلايا اللي كثفتها قليلة فهتطلع
لفوق ليش؟ لأنها أقل maturity عشان هيكلازم ضروري
جدا قبل ما أاخد ال drop عشان أفرد لازم أعمل good
mixing وإلا باخد عينة مش متجانسة هتكون طبقات ممكن
أخد من طبقة ال reticulocyte أو أخد من الطبقة اللي
مافيش فيها reticulocyte هيطلع عند ال count خطأ
عشان هيك ضروري جدا عملية ال mixing
طيب هنا أقولك لو أنا سبقت كويس واتبعت الخطوات كويس
هيبقى عندي يعني وعديت أكتر من field هيبقى عندي فرق
بين كل 500 erythrocyte بس نص reticulocyte يعني
نسبة الخطأ هتكون أقل من point one percent لو أنا
أتبعت الخطوات كويس سبقت كويسهنا بقولك في automated
procedure في طريقة يعني بتغنيني عن الطريقة ال
manual هادي باستخدام ال flow cytometry بصبغوها ب
fluorescent dye اللي هي ال reticulocyte بتعطيني
نتائج أفضل من الطريقة ال manual طيب، هلاقيت يا
بنات reticulocyte عبارة عن عبيبات في داخل الخلية
طيب، هل هتلخبطني مع الهوى ال julie body و ال hens
body اللي هي ال inclusion bodies اللي حكينا عليها
ولا لأ؟خلّينا نشوف الجدول الجاى بعمل مقارنة ما
بينهم هذه الأشياء اللي ممكن تلخبطني مع الـ
reticulocyte أول حاجة الهوى الجوليباضي الهوى
الجوليباضي بظهر بال right stain بس ال reticulocyte
ما بتظهر بال right stain يعني أنا بال right stain
لو عملت وشفت الحبيبات هذه بعرف أن هو الجوليباضي
بينما ال reticulocyte ما بتبينالـ Hemp Body والـ
Verticulocyte التانيين بنصبغوا بالـ
Supravitalistاني طب كيف يفرقهم عن بعض من شكلهم؟
الـ Hemp Body بيبقى على شكل حبيبات يعني كتل صغيرة
أو حبيبات صغيرة منفصلة عن بعض عند الـ Cell
Membrane يعني حبة أو تنتين أو تلاتة مثلًا هيك
تينعس عند الـ Cell Membrane وكبارة شوية بينما الـ
Verticulocyte تبقى زي شبكة في وسط الخلية نجي للـ
Babenheimer Bodies Babenheimer Bodies عبارة عن
حبيباتالحديد فيها حديد محتوها من الـ Iron فبالتالي
لو أنا اتلخبطت فيها ممكن أسبخ بصبغة خاصة بالحديد
عشان يتفرقلي ما بين الـ reticulocyte وما بين
الـWaffenheimer bodies الصبغة ها دي اللي هي
البروجيان blue stain في Hemoglobin H bodies طبعا
تظهر كرون Greenish blue inclusion في الخلية
هك بنكون خلصنا مع بعض Radiculous Site Count
يعطيكوا ألف عافية