1 00:00:00,930 --> 00:00:05,250 السلام عليكم ورحمة الله وبركاته معملنا بعنوان 2 00:00:05,250 --> 00:00:08,330 Enumeration of Coliform, Fecal Coliform, and 3 00:00:08,330 --> 00:00:11,830 Escherichia Coli in Foods مين هما الـ Total 4 00:00:11,830 --> 00:00:15,450 Coliform؟ هي الـ Escherichia Coli، الـ Klebsiella، 5 00:00:15,450 --> 00:00:18,970 والـ Enterobacter، والـ Citrobacter طيب، الـ Fecal 6 00:00:18,970 --> 00:00:21,730 Coliform بتضم الـ Escherichia Coli، و الـ 7 00:00:21,730 --> 00:00:27,050 Klebsiella Members of two bacteria groups، الـ 8 00:00:27,050 --> 00:00:29,950 Coliform و الـ Fecal Coliform are used as 9 00:00:29,950 --> 00:00:34,130 indicators الأثنان بيستخدموهم ك indicator إيش 10 00:00:34,130 --> 00:00:39,930 المقصود بال indicator organism whose number in a 11 00:00:39,930 --> 00:00:44,930 product reflects the success or failure of GMP من 12 00:00:44,930 --> 00:00:48,070 خلال ال number تبعهم بنعرف هل كان فيه التزام 13 00:00:48,070 --> 00:00:52,500 بمعايير النظافة أو لا أثناء تحضير ال food يستخدمه 14 00:00:52,500 --> 00:00:56,080 كـIndicator of possible sewage contamination من 15 00:00:56,080 --> 00:01:01,000 خلالهم بنعرف إذا كان الـfood ملوث بمياه الصرف 16 00:01:01,000 --> 00:01:03,760 الصحي أو لا طيب، شو علاقة مياه الصرف الصحي 17 00:01:03,760 --> 00:01:07,600 بالبكتيريا هدول؟ بيقولّي البكتيريا هاي الـcoliform 18 00:01:07,600 --> 00:01:11,000 و الـfecal coliform بيكونوا موجودين في الأمعاء 19 00:01:11,000 --> 00:01:14,520 للإنسان و للحيوانات طيب، لما يكونوا هم الأثنين 20 00:01:14,520 --> 00:01:19,540 موجودين في الأمعاء معناته هيطلعوا مع الـfeces أو مع 21 00:01:19,540 --> 00:01:22,900 الـ stool معناته هيكونوا بيه مياه الصرف الصحية 22 00:01:22,900 --> 00:01:27,720 فبمجرد فحصنا لها الفود في المختبر أو لاقينا فيه 23 00:01:27,720 --> 00:01:31,100 الـ total coliform أو الـ fecal coliform معناته 24 00:01:31,100 --> 00:01:35,920 هذا الفود كان ملوث بالـ stool because they are 25 00:01:35,920 --> 00:01:40,100 commonly found in human and animal feces طيب، هذا 26 00:01:40,100 --> 00:01:43,520 هو تعريف ال indicator organism whose number in 27 00:01:43,520 --> 00:01:48,290 products reflect the success or failure of GMP لو 28 00:01:48,290 --> 00:01:52,390 سألت سؤال مين هم الـFecal Bacteria Indicators؟ 29 00:01:52,390 --> 00:01:57,410 «Fecal» يعني بكتيريا بتكون موجودة بالـStool 30 00:01:57,410 --> 00:02:01,630 وIndicator بتدل على «Failure» أو «Success» للـGMP 31 00:02:01,630 --> 00:02:04,250 اللي هي توتر الكوليفارم، «Fecal» الكوليفارم 32 00:02:04,250 --> 00:02:09,730 والإشريشيا كولاي والإنتروكوكاي طيب قلنا بالأول 33 00:02:09,730 --> 00:02:14,530 فينا عائلة كبيرة اسمها Enterobacteriaceae أهم يميز 34 00:02:14,530 --> 00:02:20,010 العائلة هي إنها جرام نيجاتيف أوبا سلاي يعني لونها 35 00:02:20,010 --> 00:02:23,710 بين جرامستين هيكون أحمر وشكلها تحت المايكروسكوب 36 00:02:23,710 --> 00:02:30,710 هيكون عصوي تمام البكتيريا هاي أو العائلة هاي حكوا 37 00:02:30,710 --> 00:02:35,470 بدنا نقسمها إلى جروبين حسب قدرة الأورجانيزم اللي 38 00:02:35,470 --> 00:02:39,070 فيها إنها بتعمل Fermentation لسكر اللاكتوز أو لا 39 00:02:39,070 --> 00:02:43,150 لاحظوا جزء من هاي العائلة بيعمل Fermentation 40 00:02:43,150 --> 00:02:47,750 لاللاكتوز فسموه lactose fermenter وجزء تاني ما 41 00:02:47,750 --> 00:02:51,450 بيعمل Fermentation لاللاكتوز سموه non-lactose 42 00:02:51,450 --> 00:02:56,120 fermenter نجي على الـ Lactose Fermenter لاحظوا أن 43 00:02:56,120 --> 00:02:59,940 الكوليفارم من ضمن اللي بعمل Fermentation لسكر، 44 00:02:59,940 --> 00:03:04,360 اللاكتوز يعني لحد الآن صارنا عارفين أكمل صفة عن 45 00:03:04,360 --> 00:03:08,940 الكوليفارم إنها الـ Gram Negative هي واحد وقلنا 46 00:03:08,940 --> 00:03:12,760 إنها بصلية والشغل التالت إنها بتعمل Fermentation 47 00:03:12,760 --> 00:03:17,270 لاللاكتوز طيب، احنا عارفين أي نوع بكتيريا بعمل 48 00:03:17,270 --> 00:03:21,270 Fermentation لأي نوع سكر بيطلع عنه acid لكن الـ 49 00:03:21,270 --> 00:03:24,730 Lactose Fermenter أو اللي هي الكوليفور بيقولّي لما 50 00:03:24,730 --> 00:03:28,410 تعمل Fermentation لسكر اللاكتوز بيطلع عنه acid 51 00:03:28,410 --> 00:03:32,530 with gas بالإضافة إلى ال acid اللي بيقلل البيتش و 52 00:03:32,530 --> 00:03:37,970 بغير لون ال media كمان بيطلع معاه اللي هو غاز طيب، 53 00:03:37,970 --> 00:03:41,410 الغاز مشان يطلع أو مشان ألاحظه ال media هل بدها 54 00:03:41,410 --> 00:03:45,090 تكون أجار؟ يعني الـ solid كيف يطلع الغاز من ميديا 55 00:03:45,090 --> 00:03:49,510 solid؟ معناته ما بنفع، فلحتى ألاحظ خروج الغاز اللي 56 00:03:49,510 --> 00:03:52,590 ناتج عن Fermentation لها الـ lactose لازم يكون في 57 00:03:52,590 --> 00:03:56,630 عندي ميديا الـ broth الغاز اللي بيطلع، بيطلع على 58 00:03:56,630 --> 00:04:01,220 شكل bubbles وبعد هيك انه خلاص بختفي طيب كيف بدي 59 00:04:01,220 --> 00:04:06,440 ألاحظ خروج الـ bubbles هاي؟ بقول في عندى إتيوب 60 00:04:06,440 --> 00:04:10,240 صغيرة اسمها الدرهم إتيوب و هيكون أنا عندي بالأساس 61 00:04:10,240 --> 00:04:14,720 إتيوب كبير و فيه الـmedium broth و أحط فيه عينتي 62 00:04:14,720 --> 00:04:20,080 شو بعمل؟ بحط الدرهم إتيوب بالشقلوب يعني الفوهة 63 00:04:20,080 --> 00:04:24,800 بدخلها هي هي أول إشي على إتيوب بروح بحطله الـ tube 64 00:04:24,800 --> 00:04:28,760 هاد بحطه في ال incubator وبستنى عليه فترة إذا 65 00:04:28,760 --> 00:04:32,180 البكتيرى اللى جوا بتعمل Fermentation لأ اللكتوز 66 00:04:32,180 --> 00:04:38,240 هيطلع عنه شو غاز، الغاز كيف بدي ألاحظه بيطلع على 67 00:04:38,240 --> 00:04:44,390 شكل bubbles وبنحجز داخل الدرهام ال tube تمام كمان 68 00:04:44,390 --> 00:04:49,770 بالإضافة لخصائص الـ Total Coliform إنها non-spore 69 00:04:49,770 --> 00:04:54,030 forming ما بتكون الأبواغ اللي بيستخدمها للحماية 70 00:04:54,030 --> 00:04:59,010 كمان Aerobic or facultative anaerobic هوائية 71 00:04:59,010 --> 00:05:03,770 إجبارية، ممكن تكون لها هوائية اختيارية طيب، نيجي 72 00:05:03,770 --> 00:05:09,810 على Non-Lactose Fermenter بتضم مين؟ بتضم 73 00:05:09,810 --> 00:05:15,070 السلمونيلا والشيجيلا والبروتوس وغيرها Most commonly 74 00:05:15,070 --> 00:05:18,850 used indicator for drinking water waste water 75 00:05:18,850 --> 00:05:22,330 treatment هاد بالنسبة لـ Total coliform لشو 76 00:05:22,330 --> 00:05:26,650 باستخدمها مشان أشوف drinking water مياه الشرب هل 77 00:05:26,650 --> 00:05:31,710 هي صالحة للشرب أو لا بروح أدور فيها على ال total 78 00:05:31,710 --> 00:05:35,630 coliform بشوف قداش العدد اللي له وهل العدد ضمن ال 79 00:05:35,630 --> 00:05:39,470 range اللي حطته ل standard أو أكتر لو أكتر معناته 80 00:05:39,470 --> 00:05:43,080 غير صالحة for human consumption نفس الأشياء الـ 81 00:05:43,080 --> 00:05:46,680 wastewater treatment المياه العادمة اللي بدهم 82 00:05:46,680 --> 00:05:51,040 يعملها معالجة هيشوفوا بعدها المياه انه كده صالها 83 00:05:51,040 --> 00:05:54,500 معالجة بشكل صحيح أو لسه كمان انه بدها تكرير تاني 84 00:05:54,500 --> 00:05:59,560 وهل هي صالحة لـ الريء أو لا نفس الأشياء بدوروا على 85 00:05:59,560 --> 00:06:03,040 الـ total coliform اللي فيها gas production during 86 00:06:03,040 --> 00:06:07,760 lactose fermentation within 48 hours at 37 Celsius 87 00:06:07,760 --> 00:06:12,570 احنا قلنا الـ total coliform بتعمل Fermentation لـ 88 00:06:12,570 --> 00:06:18,110 Lactose لكن قدّيش هي بتحتاج إلى temperature وقدّيش 89 00:06:18,110 --> 00:06:21,750 تحتاج إلى time هذا الأشي بيتمد على نوع البكتيريا 90 00:06:21,750 --> 00:06:25,610 وهذا هو الإختلاف بين الـ Total Coliform و بين الـ 91 00:06:25,610 --> 00:06:28,770 Fecal Coliform من ناحية الـ Time و الـ Temperature 92 00:06:28,770 --> 00:06:32,510 لـ Incubation بقولّي الـ Total Coliform عشان تعمل 93 00:06:32,510 --> 00:06:37,510 Fermentation أو يطلع عنه جاز بتحتاج إلى 48 hour 94 00:06:37,510 --> 00:06:41,550 يعني ليومين على درجة حرارة سبعة أو تلاتين في الـ 95 00:06:41,550 --> 00:06:45,630 Incubator Total coliform include a wide variety of 96 00:06:45,630 --> 00:06:48,970 bacteria أكيد الـ Total coliform بتضم مجموعة واسعة 97 00:06:48,970 --> 00:06:52,310 من البكتيريا بما فيها Escherichia coli بالإضافة 98 00:06:52,310 --> 00:06:55,290 إلى a broad spectrum of other bacteria مجموعة 99 00:06:55,290 --> 00:06:58,170 تانية من البكتيريا اللي هي بتضم الـ Klebsiella أو 100 00:06:58,170 --> 00:07:03,840 الانتروبكتر والستروبكتر Escherichia coli is a species 101 00:07:03,840 --> 00:07:07,700 found in the lower gastrointestinal tract موجودة في 102 00:07:07,700 --> 00:07:11,580 الـGIT السفلي في القناة الهضمية السفلي يعني هي 103 00:07:11,580 --> 00:07:14,560 موجودة بالأمعاء الأمعاء معناته هيطلع بالنهاية على 104 00:07:14,560 --> 00:07:17,720 شكل الـfeces معناته هيروح المياه اثر في الصحة 105 00:07:17,720 --> 00:07:23,020 موجودة في many vertebrates في كثير من الفقريات and is 106 00:07:23,020 --> 00:07:26,880 indicative of fecal contamination وجود الإشريكية كولاي 107 00:07:26,880 --> 00:07:31,360 على الـfood أو الـdrinks معناته مؤشر على 108 00:07:31,360 --> 00:07:37,010 fecal contamination وهذه الأمثلة على الـ Total 109 00:07:37,010 --> 00:07:41,850 Coliform نيجي على الـ Fecal Coliform هي subset of 110 00:07:41,850 --> 00:07:46,330 Total Coliform مجموعة أصغر من الـ Total فالـ Fecal 111 00:07:46,330 --> 00:07:50,750 Coliform بتضم فقط الكلبسيلة والإشريشيا كولاي are 112 00:07:50,750 --> 00:07:54,490 more fecal specific in origin إيش اللي خلاهم 113 00:07:54,490 --> 00:08:00,310 يعملوا مجموعة تانية أسموها الـ Fecal Coliform 114 00:08:00,310 --> 00:08:04,270 لاحظوا إن الـ organism أو البكتيريا اللي تابعة الـ 115 00:08:04,270 --> 00:08:08,150 Halo Group more fecal specific in origin فقط 116 00:08:08,150 --> 00:08:11,150 بتتواجد بالـ feces مش ممكن إحنا نلاقيها في مكان 117 00:08:11,150 --> 00:08:16,450 تاني لهيك سموها Fecal Coliform able to ferment 118 00:08:16,450 --> 00:08:19,310 lactose أكيد زيها زي Total اللي عندها القدرة إنها 119 00:08:19,310 --> 00:08:22,670 تعمل Fermentation للـ lactose طيب لو سألت شو هي 120 00:08:22,670 --> 00:08:27,260 خصائص الـ Fecal Coliform نفس الأشياء الـ Gram 121 00:08:27,260 --> 00:08:32,260 Negative بصلية Lactose fermenter produce acid with 122 00:08:32,260 --> 00:08:36,600 gas non-spore forming aerobic or facultative 123 00:08:36,600 --> 00:08:40,520 anaerobic لكن الإختلاف بينها وبين الـ Total 124 00:08:40,520 --> 00:08:43,980 Coliform هيكون من ناحية ال media اللي بحتاجها اللي 125 00:08:43,980 --> 00:08:48,540 أنمي عليها البكتيريا هي واحد كمان بتختلف من ناحية 126 00:08:48,540 --> 00:08:50,460 ال temperature وال time اللي بيحتاجه من ال 127 00:08:50,460 --> 00:08:54,430 incubation فالفيكل الكوليفورم اربطوها بالأرقام اللي 128 00:08:54,430 --> 00:09:01,270 فيها أربعات اللي هي 44.5 سيليزياس لمدة 24 ساعة أما 129 00:09:01,270 --> 00:09:06,710 قلنا الطيور الكوليفورم ليومين على 37 درجة سيليزياس 130 00:09:06,710 --> 00:09:10,750 include Escherichia coli and Klebsiella which are 131 00:09:10,750 --> 00:09:15,110 exclusively fecal in origin فقط بتكون موجودة 132 00:09:15,110 --> 00:09:20,650 بالفيسز لهيك سموها فيكل كوليفورم fecal coliform are 133 00:09:20,650 --> 00:09:24,050 still being used in many states as the indicator 134 00:09:24,050 --> 00:09:27,830 bacteria ما زالوا إلى يومنا هذا في كثير من الحلات 135 00:09:27,830 --> 00:09:31,390 بيستخدموا الـfecal coliform كindicator بكتيريا 136 00:09:31,390 --> 00:09:36,930 بيعبروا من خلالها على ال success or failure لل GMB 137 00:09:36,930 --> 00:09:40,710 نيجي على الاشريشيا كولاي is a type of fecal 138 00:09:40,710 --> 00:09:44,230 coliform ما احنا قلنا الفيكل بتضمن الاشريشيا كولاي 139 00:09:44,230 --> 00:09:48,530 و الإكليبسيلة وطالما الاشريشيا كولاي من ضمن الفيكل 140 00:09:48,530 --> 00:09:52,210 معناته هيكون مؤشر على الـ Fecal Contamination يعني 141 00:09:52,210 --> 00:09:57,250 لأن هي موجودة فقط بالـ feces فقط اللي بتكون موجودة 142 00:09:57,250 --> 00:10:00,070 في الـ intestine of warm-blooded animals and 143 00:10:00,070 --> 00:10:03,350 humans موجودة في أمعاء ذوات الدم الحار من 144 00:10:03,350 --> 00:10:09,070 الحيوانات ومن الإنسان في الـ intestine معناته فقط 145 00:10:09,070 --> 00:10:13,150 موجودة بالـ stool The presence of Escherichia coli 146 00:10:13,150 --> 00:10:16,470 in water is a strong indication of recent sewage 147 00:10:16,470 --> 00:10:21,030 or animal waste contamination بمجرد ملاحظة شريحة 148 00:10:21,030 --> 00:10:25,610 كولايا على ال food أو ال drink معناته صار التلوث 149 00:10:25,610 --> 00:10:30,290 بالفيسس عن قريب، مؤخرا صار، recently، مش من فترة 150 00:10:30,290 --> 00:10:36,330 طويلة تمام الـ Enterococci هل هي بتتبع لعائلة الـ 151 00:10:36,330 --> 00:10:39,870 Enterobacteriaceae؟ الجواب لأ ما إلها علاقة بالـ 152 00:10:39,870 --> 00:10:43,030 Enterobacterias وما إلها علاقة بالكليفوروم خالص الـ 153 00:10:43,030 --> 00:10:47,130 Enterococci هي subgroup within the fecal 154 00:10:47,130 --> 00:10:49,850 streptococcus يعني هي تابعة للـ fecal 155 00:10:49,850 --> 00:10:53,370 streptococcus group طيب، الـ streptococcus تُعتبر 156 00:10:53,370 --> 00:10:58,210 جرام بوزيتيف بكتيريا شكلها بيكون strept يعني 157 00:10:58,210 --> 00:11:00,890 بيكون على شكل سلسلة بيكون شكلها كروي 158 00:11:00,890 --> 00:11:04,470 streptococcus لكن الـ Enterobacteriaceae الجرام 159 00:11:04,470 --> 00:11:07,990 نيجاتيف فالـ Entero ما إلها علاقة بالـ 160 00:11:07,990 --> 00:11:14,210 Enterobacteriaceae تماما إنتيروكوكاي مستمرون 161 00:11:14,210 --> 00:11:17,470 بالطاقة التي تستطيع أن تتحمل المياه المالحة بقول 162 00:11:17,470 --> 00:11:21,130 ليه؟ لأن إنتيروكوكاي عندها القدرة أنها تتحمل المياه 163 00:11:21,130 --> 00:11:26,350 المالحة، بتقدر تعيش في بيئة فيها درجة ملوحة عالية، 164 00:11:26,350 --> 00:11:29,430 and in this respect they more closely mimic، 165 00:11:29,430 --> 00:11:33,950 بالتالي هي بتشبه كتير من الـ pathogens غير الـ 166 00:11:33,950 --> 00:11:38,270 indicators يعني هي بتشبه شغلات تانية يعني غير عن 167 00:11:38,270 --> 00:11:41,150 نتولة الكوليفورم ومنفيكا الكوليفورم اللي هي بتشبه 168 00:11:41,150 --> 00:11:44,910 مين قلنا قبل هيك عندها القدرة إنها تنمو في بيئة 169 00:11:44,910 --> 00:11:48,870 فيها high concentration of salt قلنا بتشبه الـ 170 00:11:48,870 --> 00:11:52,550 Staph Aureus اللي كنا بنميها الـ MSA من نتول Salt 171 00:11:52,550 --> 00:11:56,490 Agar إنتيروكوكاي are typically more human 172 00:11:56,490 --> 00:11:59,310 specific than the larger في كل ستربتوكوكاسي 173 00:11:59,310 --> 00:12:03,170 group بقولّي لو لاقيت الإنترروكوكاي على الـ food أو 174 00:12:03,170 --> 00:12:08,970 الـ drink معناته هاد فقط ملوث باستول آدمي فقط استول 175 00:12:08,970 --> 00:12:14,790 إنسان لكن لو لاقينا الشريحة كولاي قلنا معناته ملوث 176 00:12:14,790 --> 00:12:19,410 بالستول سواء كان human أو كان ل .. ل animals لكن 177 00:12:19,410 --> 00:12:24,390 التلوث هاد صار recently مؤخرا طيب الـ فيكال كوليفورم 178 00:12:24,390 --> 00:12:31,270 معناته ملوث بالفيسس لكن الـ Enterococci معناته 179 00:12:31,270 --> 00:12:36,650 ملوّث بـ feces لإنسان هاي الرسمة شرحناها بالأول و 180 00:12:36,650 --> 00:12:39,270 قلنا إنه في عائلة عندي كبيرة اسمها 181 00:12:39,270 --> 00:12:43,710 Enterobacteriaceae مجموعة قل منها أو أصغر منها 182 00:12:43,710 --> 00:12:46,930 اسمها الـ Total Coliform من الـ Total في مجموعة في 183 00:12:46,930 --> 00:12:49,850 أصغر باسمها الـ Fecal Coliform من الفيكل فأخدنا 184 00:12:49,850 --> 00:12:52,430 منها الـ Escherichia coli من الـ Escherichia coli 185 00:12:52,430 --> 00:12:55,070 قلنا في عينها أكتر من نوع و اللي بهمنا Escherichia 186 00:12:55,070 --> 00:12:57,310 coli O157H7 187 00:12:58,440 --> 00:13:02,340 Sources of coliform bacteria وين ممكن نلاقي 188 00:13:02,340 --> 00:13:06,100 الكوليفورم؟ Intestine of warm-blooded animals بلاقوها 189 00:13:06,100 --> 00:13:09,960 في أمعاء ذوات الدم الحار من الإنسان أو من 190 00:13:09,960 --> 00:13:14,340 الحيوانات Soil and vegetation بلاقوها في التربة أو 191 00:13:14,340 --> 00:13:18,960 في الأماكن اللي فيها الزراعة On-site sewer system 192 00:13:18,960 --> 00:13:22,600 and sewer line leaks في مياه الصرف في الصح وفي أي 193 00:13:22,600 --> 00:13:27,490 تسريبات Agriculture waste runoff المياه الجارية من 194 00:13:27,490 --> 00:13:32,870 الزراعة Surface water المياه السطحية Flooded water 195 00:13:32,870 --> 00:13:36,870 المياه الجارية والـ Ground water هي مياه الآبار 196 00:13:36,870 --> 00:13:43,630 بيقول لكل من كوليفورم and فيه كوليفورم have no 197 00:13:43,630 --> 00:13:48,200 taxonomic validity، الأتنين من ناحية التسميات ما 198 00:13:48,200 --> 00:13:51,700 بتهمني سواء كانت coliform أو fecal coliform اللي 199 00:13:51,700 --> 00:13:55,020 بيهمني متى؟ لما بيجيلي واحد على المعمل بيحكيلي 200 00:13:55,020 --> 00:13:58,360 مثلا افحصيلي الـ total coliform في العينة هذه أو 201 00:13:58,360 --> 00:14:01,500 مثلا افحصيلي الـ fecal coliform، بدي أحط في بالي 202 00:14:01,500 --> 00:14:04,060 أنه الإختلاف بين الـ fecal coliform و بين الـ total 203 00:14:04,060 --> 00:14:08,760 coliform هيكون في تلات شغلات therefore are only 204 00:14:08,760 --> 00:14:12,420 meaningful بتهمني when expressed in terms of the 205 00:14:12,420 --> 00:14:15,400 analytical test parameters of اللي هي في العوامل 206 00:14:15,400 --> 00:14:19,700 high فالشغلات high في الـ media الـ media اللي 207 00:14:19,700 --> 00:14:23,320 بحتاجها للـ total coliform أكيد بتخلف عن الفيك 208 00:14:23,320 --> 00:14:26,340 الكوليفورم كمان من ناحية الـ time and temperature 209 00:14:26,340 --> 00:14:29,860 of incubation قلنا الفيك الكوليفورم اللي فيها 210 00:14:29,860 --> 00:14:34,960 أربع وأربعين ونص سيليزيا لمدة أربع وعشرين 211 00:14:34,960 --> 00:14:39,540 ساعة أما التجارة الكوليفارم على درجة حرارة 7 أو 30 212 00:14:39,540 --> 00:14:45,060 لمدة 48 ساعة طيب الـ presence of indicator 213 00:14:45,060 --> 00:14:48,800 organism in food لما يكون متواجد indicator 214 00:14:48,800 --> 00:14:53,080 organism في أي food أو drink فهد مؤشر على واحد من 215 00:14:53,080 --> 00:14:58,860 شغلتين إما يكون inadequate processing أو post 216 00:14:58,860 --> 00:15:00,020 processing contamination 217 00:15:03,450 --> 00:15:07,970 إما إنه يعني صار فيه failure للـ GMP ما كان فيه 218 00:15:07,970 --> 00:15:12,830 التزام بمعايير النظافة أثناء تحضير الـ food الشغل 219 00:15:12,830 --> 00:15:16,330 التاني ميكروبيال growth إنه ممكن كان عدد البكتيريا 220 00:15:16,330 --> 00:15:20,050 قليل لكن بعد فترة البكتيريا هاي صارت إنها تتكتر 221 00:15:20,050 --> 00:15:24,950 أكتر وأكثر وبالتالي إنه العدد زاد عن العدد اللي 222 00:15:24,950 --> 00:15:29,290 حطته الـ standard فوجود الـ indicator organism إما 223 00:15:29,290 --> 00:15:32,930 إنه ما كان فيه اهتمام كافي وما كان فيه نظافة كافية 224 00:15:32,930 --> 00:15:37,790 أو إما صار فيه microbial growth the presence of 225 00:15:37,790 --> 00:15:40,750 coliform فيكالكوليفورم and aerogenic escherichia 226 00:15:40,750 --> 00:15:43,410 coli هي الـ escherichia coli بشكل عام aerogenic هي 227 00:15:43,410 --> 00:15:47,710 يعني بتطلع غاز، gas forming يعني وجودها بالـ food 228 00:15:47,710 --> 00:15:51,570 أو الـ water may be determined by means of MPN 229 00:15:51,570 --> 00:15:56,850 اللي هي most probable number هذا المعمل سنأخذه إن 230 00:15:56,850 --> 00:16:02,950 شاء الله في المرة القادمة فكرته أنه باخد عينتي 231 00:16:02,950 --> 00:16:08,430 بعملها serial dilution واحد لعشرة وواحد لمية وواحد 232 00:16:08,430 --> 00:16:13,010 لألف وواحد لعشر ألف وهاكذا بعد هيك لكل تخفيف 233 00:16:13,010 --> 00:16:18,090 بحطله خمس اتيوبات كمان يعني واحد لعشرة بحطله خمس 234 00:16:18,090 --> 00:16:23,100 اتيوبات وبيكون فيه media وكلهم كلهم نفس التركيز 235 00:16:23,100 --> 00:16:29,000 واحد لمية بحطله خمس اتيوبات وفيه media وكلهم نفس 236 00:16:29,000 --> 00:16:33,120 التركيز وهاكذا وبعد هيك بتطلع من ناحية العكرة كل 237 00:16:33,120 --> 00:16:37,400 ما كان في العكرة أكتر معناته في نمو لبكتيريا أكتر 238 00:16:37,400 --> 00:16:42,420 وهنا طبعا هنتعرف عليها بالتفسير في المعمل الجاي إن 239 00:16:42,420 --> 00:16:46,220 شاء الله طيب متى بلجأ للـ MPN؟ وهل هي qualitative 240 00:16:46,220 --> 00:16:50,550 or quantitative؟ بيعتبر quantitative بلجألها لما 241 00:16:50,550 --> 00:16:54,370 تكون عندي عينة liquid لما يكون عندي عدد البكتيريا 242 00:16:54,370 --> 00:17:00,550 قليل ولما أبحث عن الكوليفورم بالـ slide هاد 243 00:17:00,550 --> 00:17:06,130 بيحكيلي في عندي تلت ميديات البروث وواحدة ميديا 244 00:17:06,130 --> 00:17:14,550 أجار نيجي على البروث LST و BGLP هدول إتنين 245 00:17:14,550 --> 00:17:23,100 بستخدمهم مشان أكشف على الكوليفورم تمام الـ EC E broth 246 00:17:23,100 --> 00:17:26,840 يعني إشريشيا كولاي E broth بستخدمها لأكشف عن 247 00:17:26,840 --> 00:17:34,080 الفيكال كوليفورم لحد هيك تمام LST و BGLP لإتنين 248 00:17:34,080 --> 00:17:39,380 لتوتال كوليفورم طيب إيش الإختلاف بين LST و BGLP 249 00:17:39,380 --> 00:17:44,560 بقولني الـ LST يعتبر screening test or presumptive 250 00:17:44,560 --> 00:17:51,290 test طيب الـ BGLP يعتبر confirmatory test for 251 00:17:51,290 --> 00:17:57,050 coliform الـ EC يعتبر confirmatory لـ 252 00:17:57,050 --> 00:18:04,130 الفيكالكوليفورم نيجي لـ الـ LST اسمها layer of 253 00:18:04,130 --> 00:18:09,810 sulfate tryptose الـ media هاي شو فيها؟ فيها سكر 254 00:18:09,810 --> 00:18:16,770 اللاكتوز لكن ما فيها لون ما فيها BH indicator اللي 255 00:18:16,770 --> 00:18:21,210 بده يصير لو اللي كانت نامية عندي في الـ media high 256 00:18:21,210 --> 00:18:25,010 الـ broth هي بتعطى الكوليفورم هتعمل fermentation 257 00:18:25,010 --> 00:18:30,550 طبعا حتى لو طلع غاز ما بقدر أنه أنا ألاحظه لإنه ما 258 00:18:30,550 --> 00:18:34,910 هيكون فيه تغير في اللون لإن هاي الـ media ما فيها pH 259 00:18:34,910 --> 00:18:37,690 indicator طيب كيف بدي ألاحظ أنه صار فيه 260 00:18:37,690 --> 00:18:41,070 fermentation قولنا الكوليفورم بتعمل fermentation 261 00:18:41,070 --> 00:18:45,130 بيطلع معها acid with gas لأن الـ media إبرت فبقدر 262 00:18:45,130 --> 00:18:49,310 أنه أنا ألاحظ خروج للغاز من خلال استخدام درهام 263 00:18:49,310 --> 00:18:55,050 اتيوب بنحط الدرهام إتيوب بالمقلوب تمام، بعملها 264 00:18:55,050 --> 00:18:59,330 incubation وبعد هيك بلاحظ خروج الغاز واحتجازه فيه 265 00:18:59,330 --> 00:19:03,170 الدرهام إتيوب Gas production is used as an 266 00:19:03,170 --> 00:19:06,050 indication of ability to ferment lactose from 267 00:19:06,050 --> 00:19:09,410 layer of sulfate triptose broth اللي هو يعتبر 268 00:19:09,410 --> 00:19:13,230 present في كوليفورم test طيب، نيجي على الميديا 269 00:19:13,230 --> 00:19:16,330 التانية اللي قلنا عليها confirmatory للـ Total 270 00:19:16,330 --> 00:19:22,890 Coliform اسمها Brilliant Green Lactose 2% By 271 00:19:22,890 --> 00:19:27,580 Breath الـ Green يعني الميديا الملونة هيكون فيها 272 00:19:27,580 --> 00:19:31,580 لون لما البكتيريا اللي زي كانت الكوليفورم عملت 273 00:19:31,580 --> 00:19:35,940 fermentation للكتوز هلاحظها من خلال تغير للون 274 00:19:35,940 --> 00:19:39,540 زائد بالإضافة إن الميديا اللي عندي إب روث معناته 275 00:19:39,540 --> 00:19:43,700 بقدر ألاحظ من خلال خروج الغاز باستخدام الدرهم الـ 276 00:19:43,700 --> 00:19:47,510 Etio هي تعتبر is considered confirmation of 277 00:19:47,510 --> 00:19:52,030 coliform presence تمام نيجي على الـ EC broth اشتري 278 00:19:52,030 --> 00:19:55,250 شكولاي بروث اللي هي confirmatory تسلا لفيكا 279 00:19:55,250 --> 00:20:01,170 الكوليفورم غاز الـ production at 44.5 أو 45 احنا قلنا 280 00:20:01,170 --> 00:20:04,270 الفيكال كوليفورم هي هذا اللي بيكون فيها أربعين ونص 281 00:20:04,270 --> 00:20:10,890 فبحطها على درجة 44 أو نص أو 45 هي هي لمدة 24 ساعة 282 00:20:10,890 --> 00:20:20,490 هي كفترة incubation وبعد هيك بلاحظ خروج الغاز طيب 283 00:20:20,490 --> 00:20:24,050 الثلاث أسطر اللي بعد هيك بيحكولي على ميديا أجار 284 00:20:24,050 --> 00:20:32,770 اسمها الـ EMB Eosin Y Methylene Blue Media Eosin Y 285 00:20:32,770 --> 00:20:37,150 مرت عليكم هاي في معمل الأنسجة اللي هي صبغة الـ Eosin Y 286 00:20:37,150 --> 00:20:41,810 هاي تعتبر acidic فبتصبغ الشيء الـ basic طيب شوف في 287 00:20:41,810 --> 00:20:47,010 عندنا في الخلية شيء basic السيتوبلازم Eosin Y 288 00:20:47,010 --> 00:20:53,790 لونها صبغة لونها أحمر مثلاً قبلوا اسمها مادة الصبغة 289 00:20:53,790 --> 00:20:57,730 لونها أزرق لو اللي كان نامي عندي على الـ media 290 00:20:57,730 --> 00:21:01,880 الشريشة كولاي شو بتعمل الشريشة كولاي؟ بتعمل Amide 291 00:21:01,880 --> 00:21:07,080 -bond بتعمل رابطة بين الصبغتين طيب لما .. لما أخلط 292 00:21:07,080 --> 00:21:11,800 الصبغتين مع بعض لون أحمر مع لون .. مع لون أزرق 293 00:21:11,800 --> 00:21:17,740 هيطلع معايا لون أخضر لامع فبمجرد خروج لون green 294 00:21:17,740 --> 00:21:22,200 metallic sheen لون أخضر لامع معناته اللي نمى عندي 295 00:21:22,200 --> 00:21:25,720 على الطبق هي Escherichia coli كيف عملت الـ 296 00:21:25,720 --> 00:21:29,860 Escherichia coli عملت Amide-bond ربطة الصبغتين مع 297 00:21:29,860 --> 00:21:35,710 بعض طيب، لو اللي كان نامي عندي على الطبق 298 00:21:35,710 --> 00:21:42,010 Enterobacter شو بتعمل هاي البكتيريا؟ بترسب الصبغتين 299 00:21:42,010 --> 00:21:46,410 في نص الكلوني لها يعني في كلونيز للـ Enterobacter 300 00:21:46,410 --> 00:21:50,730 فكرتها أن هاي البكتيريا بترسب الصبغتين في النص 301 00:21:50,730 --> 00:21:56,110 فبصير عندي في كلوني جواها لون dark purple أو لون 302 00:21:56,110 --> 00:22:01,370 pink معناته أن هاي البكتيريا Enterobacter شو عاملات 303 00:22:01,370 --> 00:22:03,810 الـ precipitation للـ dyes في الـ center of 304 00:22:03,810 --> 00:22:08,870 colonies اللي بالأحمر شو بقول لي؟ الـ typical 305 00:22:08,870 --> 00:22:13,310 colonies on E&P agar must be confirmed by further 306 00:22:13,310 --> 00:22:18,310 biochemical test حتى لو ظهر عندي اللون الأخضر أو 307 00:22:18,310 --> 00:22:22,030 اللون الـ purple ما بقدر أتأكد أو أحكي إنه هي خلاص 308 00:22:22,030 --> 00:22:25,210 يعني عن أكيد هي Escherichia coli أو مثلاً Enterobacter 309 00:22:25,210 --> 00:22:29,350 لازم أعمل فحوصات تأكيدية من خلال الـ Biochemical 310 00:22:29,350 --> 00:22:33,830 Test to prove the presence of Escherichia coli 311 00:22:33,830 --> 00:22:38,510 نيجي على الـ Membrane Filter Test فاكرين شرحت لكم 312 00:22:38,510 --> 00:22:42,730 قبل هيك حاجة اسمها High Gradient Magnetic Filter 313 00:22:42,730 --> 00:22:48,390 كان فيها filter paper magnetic فيها مغناطيس كمان 314 00:22:48,390 --> 00:22:54,130 فكرته أنه كنا بنلجأ له لما يكون فيه عينة liquid 315 00:22:54,130 --> 00:22:58,930 وعدد البكتيريا قليل لما أكون بأبحث عن الكوليفار 316 00:22:58,930 --> 00:23:03,590 بيكون في عندي الـ two beakers واحد فوق والثاني تحت 317 00:23:03,590 --> 00:23:07,330 بيناتهم مغناطيس أو filter paper اللي تحت بيكون 318 00:23:07,330 --> 00:23:11,550 مشبوك في مضخة بتشفط الهواء اللي فوق بكون حاطة فيه 319 00:23:11,550 --> 00:23:14,990 عينتي فالعينة اللي بدنا نشتغل عليها وبيكون فيها 320 00:23:14,990 --> 00:23:19,870 كمية بكتيريا قليلة أو liquid هتكون عينة الميه إن 321 00:23:19,870 --> 00:23:23,650 شاء الله هاد في الجامعة بدنا نشتغلها بقول لي مشان 322 00:23:23,650 --> 00:23:27,730 بدنا نشتغل على عينة الميه فأقل شيء لازم تكون 100 323 00:23:27,730 --> 00:23:35,190 مل طيب لو كان عندي cup ساعته فقط 50 مل بستخدم كباين 324 00:23:35,190 --> 00:23:42,830 قبل 50 وهكذا بس هالي عندي 100 مل تمام حطيت العينة 325 00:23:42,830 --> 00:23:49,100 في الـ baker اللي فا شغلت المضخة وبهيكصار يشفط 326 00:23:49,100 --> 00:23:53,460 الهواء والمي صارت تنزل عن طريق الـ pores أو الثقوب 327 00:23:53,460 --> 00:23:56,900 اللي في الـ filter paper طيب كيف بدي أضمن أنه 328 00:23:56,900 --> 00:24:00,600 البكتيريا كمان ما تنزل عبر الثقوب؟ بنستخدم filter 329 00:24:00,600 --> 00:24:04,160 paper بحيث أنه يكون الـ pores أو حجم الـ pores للـ 330 00:24:04,160 --> 00:24:09,720 filter paper أصغر من حجم أو من قطر البكتيريا فاللي 331 00:24:09,720 --> 00:24:13,340 يصير المي فقط اللي راح تنزل والبكتيريا هتضلها 332 00:24:13,340 --> 00:24:18,300 محبوسة بين الثقوب بتاعت الـ filter paper لهيك عملوا 333 00:24:18,300 --> 00:24:27,810 الثقوب 45 من 100 ميكرو متر تمام نزلت الميه واللي 334 00:24:27,810 --> 00:24:31,830 ضل عندي على الـ filter paper فقط البكتيريا بستخدم 335 00:24:31,830 --> 00:24:37,370 forceps معقم بستخدم الملقات بعد هيك بروح آخذ الـ 336 00:24:37,370 --> 00:24:41,410 filter paper اللي عليه البكتيريا وبأزرعه على طبق 337 00:24:41,410 --> 00:24:44,310 فيه media وبعمله incubation بالـ time وبالـ 338 00:24:44,310 --> 00:24:47,470 temperature المناسبين لنوع الـ microorganism اللي 339 00:24:47,470 --> 00:24:51,290 أنا بدي أزرع عليها وبعد هيك بعد ما أخلص فترة الـ 340 00:24:51,290 --> 00:24:54,750 incubation بروح أعد الـ colonies اللي نمت على الـ 341 00:24:54,750 --> 00:24:58,910 filter paper نرجع للسلايد دات The membrane 342 00:24:58,910 --> 00:25:02,210 filtration method involves filtering several 343 00:25:02,210 --> 00:25:04,670 different size portions of sample using filters 344 00:25:04,670 --> 00:25:08,630 with a standard diameter and pore size الفكرة أن 345 00:25:08,630 --> 00:25:12,430 بقول بأستخدم filter paper وهي بيكون لها حجم بور 346 00:25:12,430 --> 00:25:16,750 معين بيكون أصغر طبعاً من قطر البكتيريا Placing each 347 00:25:16,750 --> 00:25:20,370 filter on a selective nutrient media بدي أحط الـ 348 00:25:20,370 --> 00:25:23,710 filter هاد في ميديا Selective بحيث أنها تنمي فقط 349 00:25:23,710 --> 00:25:26,610 الكوليفورم وتعمل Inhibition لأي نوع ثاني غير 350 00:25:26,610 --> 00:25:31,210 الكوليفورم Incubating the plates at a specified 351 00:25:31,210 --> 00:25:34,030 temperature for a specified time period أكيد بدي 352 00:25:34,030 --> 00:25:37,030 أحطه في الـ media المناسبة لإلها تحت time و 353 00:25:37,030 --> 00:25:41,430 temperature مناسبين للنوع الـ micro organism and 354 00:25:41,430 --> 00:25:44,150 counting the colonies that have grown on the 355 00:25:44,150 --> 00:25:47,370 filter بعد هيك بدي أعد الـ colonies اللي نمت عندي و 356 00:25:47,370 --> 00:25:49,870 بدي أعود في القانون C سواء أنا على أسفلين 357 00:25:52,400 --> 00:25:55,840 membrane filter test this method varies for 358 00:25:55,840 --> 00:25:59,640 different bacteria types بيقول لي الطريقة هي بتختلف 359 00:25:59,640 --> 00:26:04,560 من نوع بكتيريا لثانية في ثلاث شغلات فقط في الـ media 360 00:26:04,560 --> 00:26:08,240 المستخدمة أو في الـ temperature والـ time اللازمين 361 00:26:08,240 --> 00:26:12,220 for incubation فالـ membrane filter test بيستخدموه 362 00:26:12,220 --> 00:26:17,420 to detect coliform عينت الميه على الأقل meat meal 363 00:26:17,730 --> 00:26:22,770 بعتبر Statistically Significant حجم البورص 45 من 364 00:26:22,770 --> 00:26:28,210 100 ميكرومتر بعمل Incubation للـ filter paper on 365 00:26:28,210 --> 00:26:33,390 bed soaked with a differential media بقول لي لو بدي 366 00:26:33,390 --> 00:26:39,250 أنمي مثلاً الكوليفور بستخدم ميديا اسمها Endo Agar Media 367 00:26:39,250 --> 00:26:42,530 هذه الـ media تعتبر differential 368 00:26:44,760 --> 00:26:48,080 Differential يعني بتميز بين الأنواع اللي راح تزرع 369 00:26:48,080 --> 00:26:52,200 عليها طب إيش اللي خلها differential؟ Contain 370 00:26:52,200 --> 00:26:59,780 lactose and basic fuchsin فيها صبغة بحط الـ filter 371 00:26:59,780 --> 00:27:04,340 paper على هات الطبق بعملها incubation من 35 إلى 37 372 00:27:04,340 --> 00:27:08,720 لمدة 24 ساعة بعد هيك بروح أعد الـ colonies لكن أي 373 00:27:08,720 --> 00:27:12,160 colonies هي هذه اللي بتكون معبرة عن الـ coliform من 374 00:27:12,160 --> 00:27:15,530 خلال اللون بعرف إنه high coliform فاللي بيكون لونها 375 00:27:15,530 --> 00:27:18,850 dark red with metallic gold sheen بتكون coliform 376 00:27:18,850 --> 00:27:22,970 لونها أحمر لامع على ميديا الـ Endo agar شو فيها؟ 377 00:27:22,970 --> 00:27:28,930 Lactose وفيها كمان الـ Fuchsin-Di سابقة طيب لو بدي 378 00:27:28,930 --> 00:27:32,530 أعد الـ fecal Streptococci اللي هي من ضمنها 379 00:27:32,530 --> 00:27:36,730 الـ Enterococcus بدي أنميها على ميديا مناسبة لإلها 380 00:27:36,730 --> 00:27:40,750 وتحت time و temperature مناسبين للنوع البكتيري اللي 381 00:27:40,750 --> 00:27:43,810 بدي إياها تنمو فبقول لي بنناميها على ميديا اسمها 382 00:27:43,810 --> 00:27:47,230 Streptococcus agar اسمها مادة بتنامي الـ fecal 383 00:27:47,230 --> 00:27:51,630 Streptococci اسم الميديا Streptococcus agar للـ fecal 384 00:27:51,630 --> 00:27:55,570 Streptococci لمدة 24 ساعة فإيش اللي بده 385 00:27:55,570 --> 00:28:01,050 يصير إذا نمت الـ fecal Streptococci بيكون الميديا 386 00:28:01,050 --> 00:28:07,070 عندي TTC المادة هاي مرّت هنا في أول معمل قلنا اسمها 387 00:28:07,070 --> 00:28:11,230 Triphenyl Tetrazolium Chloride لو نمت البكتيريا 388 00:28:11,230 --> 00:28:16,010 هتعملها Reduction لهاي المادة Reduction للـ TTC 389 00:28:16,010 --> 00:28:20,690 بيكون مركب اسمه Formazan وهذا لونه أحمر فبيلون لون 390 00:28:20,690 --> 00:28:23,810 الـ colonies فالـ colonies اللي لونها أحمر على media 391 00:28:23,810 --> 00:28:27,710 streptococcus agar معناته high fecal streptococci 392 00:28:27,710 --> 00:28:33,670 طيب لو قلت مين أحسن وأسرع وأسهل؟ membrane filter 393 00:28:33,670 --> 00:28:39,030 test ولا؟ الـ Most Probable number بيكون فيه أكثر 394 00:28:39,030 --> 00:28:43,310 من tubes أكثر من تخفيف وكل تخفيف بده تقريباً من 3 395 00:28:43,310 --> 00:28:46,450 إلى 5 tubes فهذا الشيء بيكلف كثير وبحتاج إلى 396 00:28:46,450 --> 00:28:51,930 وقت فالأسهل والأسرع هي الـ membrane filter test