السلام عليكم ورحمة الله وبركاته يعطيكم العافية
جميعًا إن شاء الله اليوم موضوعنا بعنوان Total
Proteins and Albumin Analysis سنحكي عن الـ
introduction «Proteins are polymers of amino acids
produced by living cells in all forms of life»
يُحكي لي أنه البروتينات تركيبتها بوليمر من الأحماض
الأمينية، يعني تركيبة البروتين سلسلة من الـ amino
acids المرتبطة مع بعضها البعض بواسطة الـ peptide
bond، الرابطة الببتيدية. البروتينات يُحكي لي Produced
by living cells، تُصَنَّع من خلال الخلايا الحية.
The key roles which plasma proteins play in bodily
function, together with the relative ease of
assaying them makes their determination a viable
diagnostic tool as well as a way to monitor
clinical progress. يقول لي إنه بما أنَّ البروتينات
الموجودة في بلازما الدم تلعب دورًا مهمًّا في الـbody
function، يعني لها وظائف داخل الجسم، وأيضًا من
سهولة حساب، حساب تركيز الـtotal protein في
هذه البلازما في الدم، هذا أدى كلُّه إلى جعل فحص الـ
Total Protein Test فحصًا available له قيمة مهمة جدًا،
نعمله كأداة تشخيصية لمراقبة ومتابعة الحالات
السريرية.
نكمل بالـ introduction in very general terms.
Variations in plasma protein concentrations can be
due to any of three changes. يقول لي يعني قبل
ما نبدأ بهذه الجملة، الـ concentration الطبيعي للـ
total protein، أنا عندي فحص اسمه total protein test.
فالـ Total Protein الموجودة في بلازمتنا
تركيزها تقريبًا من 6.6 إلى 8.4 جرام per deciliter.
الوحدة بالجرام per deciliter، إذا من 6 إلى 8 جرام
per deciliter، تركيز كل البروتينات في بلازما الدم.
هذا ممكن التركيز يصير فيه fluctuation، يعني مرة
يزيد، مرة يقل، طبعًا بيزيد ويقل، يعني هذه حالات
مرضية، الإنسان الطبيعي بدّه يكون الـ range ضمن
التركيز ضمن الـ normal range، أما يزيد ويقل معناه
عندنا مشكلة. فهنا يقول لي الـ Variations، الاختلاف في
تركيز الـ Total Protein في الـ Plasma ناشئ عن سبب
من الأسباب الثلاثة: إما يكون عندي مشكلة في معدل
تصنيع البروتينات، خلل في معدل التصنيع، أو عندي خلل في
معدل التخلص من البروتينات في الجسم، the rate of
removal، أو ممكن يكون عندي مشكلة في volume of
distribution، في توزيع هذه البروتينات الموجودة في
البلازما. آخر جزئية بدنا نفهم كيف المرأة الحامل، الـ
Pregnant Woman، عندها two circulations، الـ blood
تبعها، عندها two circulations، الـ circulation تبعها
الدورة الدموية تاعتها، وتاعت الطفل، تمام؟ وتاعت
الجنين. معنى الكلام هيكون عند المرأة الحامل بلازما
أكثر من الوضع الطبيعي، يعني الـ Volume of بلازما
عند المرأة الحامل هيكون أكثر من الطبيعي، حجم البلازما.
بالتالي لما يزيد حجم البلازما، معناه الـ Total Protein
الموجودة داخل البلازما هتتخفف، تمام؟ إنسان
طبيعي عنده البلازما حجمها طبيعي، وبالتالي الـ Total
Protein هتكون طبيعية داخل البلازما، أما المرأة الحامل
حجم البلازما عندها زاد بسبب وجود two circulations،
الـ circulation الخاصة بها، أو الخاصة بالجنين، أدى
إلى تخفيف تركيز الـ Total Protein الموجودة في
البلازما. إذًا هذول ثلاث شغلات عملوا تغيير في تركيز
الـ Total Protein. Proteins common properties، بدنا
نحكي عن بعض خصائص البروتينات، in spite of
functional differences between the various proteins.
They have certain common biophysical and
biochemical properties. These include، على الرغم من
أن البروتينات مختلفة عن بعضها البعض من حيث الـ
function، من حيث الوظيفة، إلا أن هناك خصائص كيميائية
وفيزيائية كل البروتينات تشترك فيها، تمام؟ يعني بتلاقي
بروتين وبروتين بيكون لهما نفس الخصائص الكيميائية
والفيزيائية، لكنهما يختلفان في الوظيفة. من أشهر
هذه الخصائص التي سنستعرضها مع بعضها هي خصائص، يعني
تَنطبق على كل البروتينات بغض النظر عن وظيفة هذا
البروتين. أول خاصية: A basic composition of carbon,
hydrogen, nitrogen and oxygen. كلنا نعرف أنَّ
البروتين عبارة عن أحماض أمينية مرتبطة مع بعضها، غالبًا
بـpeptide bond، صح ولا لأ؟ هلقيت الأحماض
الأمينية، الـ amino acids، شو تركيب الأحماض الأمينية؟
الأحماض الأمينية تتركب من أربعة عناصر أساسية داخلة
في تركيب الأحماض الأمينية: Carbon، Hydrogen،
Nitrogen، Oxygen. إذًا كل البروتينات فيها أحماض أمينية
وتركيبة الأحماض الأمينية عبارة عن أربعة عناصر:
Hydrogen، Carbon، Nitrogen and Oxygen. تمام، الخاصية
الثانية: «Backbone of covalent peptide bonds which
joined amino acid units together». حكيناها، إن كل
بروتينات عبارة عن سلسلة من الأحماض الأمينية مرتبطة
مع بعضها البعض بـpeptide bond. ثالث خاصية: Absorption
Maximum in the Ultraviolet Region. كل البروتينات
يصير لها أعلى امتصاص، تَمتص الضوء المُسلط عليها في
منطقة الـ UV، المنطقة فوق البنفسجية، Ultraviolet، من
280 إلى 340 نانومتر. كل البروتينات يصير لها امتصاص في
هذه المنطقة.
نكمل مع بعض، proteins common properties based on
these properties، laboratory methods have been
developed to determine the concentration of
proteins in serum، often with the assumption that
بناءً واعتمادًا على خصائص البروتينات، كل الخصائص
التي استعرضناها قبل قليل، تم تطوير طرق مخبرية مختلفة.
من خلال هذه الطرق سيتم حساب تركيز الـ Total
Protein في الـ Plasma، الدم. يحتوي على عبارة، each of
the several hundred individual proteins present in
serum reacts similarly in chemical reactions. يا جماعة،
السيرم أو البلازما، يحتوي الدم على مئات من
البروتينات، يعني أنواع مختلفة من البروتينات، hundred
proteins. هذه البروتينات تفاعلاتها كلها similar،
تكون متشابهة، الـ Chemical reaction بتاعتها،
التفاعلات الكيميائية بتاعتها كلها تكون متشابهة، و
هي نفسها، تمام؟ لأنَّ أساسًا حكينا البروتينات يعني
لها خصائص فيزيائية وكيميائية مشتركة، لكنها تختلف
في وظائفها، كل بروتين يُقدِّم وظيفة مختلفة. فحصنا
اليوم اسمه Serum Total Protein Test، سواء حكيت
Serum Total Protein Test أو Plasma Total Protein
Test أو Total Protein Test، هذه أسماء مختلفة للفحص
نحن عادةً نحكي Total Protein Test بسرعة، لأنه
أنا أريد أن أحسب تركيز كل البروتينات الموجودة في بلازما
الدم. هذا الفحص is a biochemical test، فحص كيميائي
يقيس الـ total amount of protein in blood plasma
or serum. هذا فحص كيميائي يقيس تركيز كل البروتينات
الموجودة سواء في بلازما الدم أو في الـ serum تبع
الدم، تمام؟ Total Protein Test Can Reflect، يعني لماذا
يعني هنا نطرح سؤالًا، لماذا يطلب الطبيب فحص الـ Total
Protein Test؟ لماذا يريد معرفة تركيز الـ Total Protein
في الـ Plasma؟ لثلاثة أسباب، لكي نتأكد من الـ
Nutritional Status، حالة التغذية عند المريض. حكينا
أنَّ البروتينات لها مصدران، إنَّ الخلايا داخل الجسم
وبالأخص الـ liver، خلايا الكبد، هي المسؤولة عن تصنيع
البروتينات. إذا البروتينات مصدرها داخلي، الخلايا هي
التي تُصنعه، وإنه مصدر آخر للبروتين هو أننا نحصل
عليه من الـ diet، من الطعام، مثلًا من اللحوم، صح ولا
لأ؟ اللحوم مليئة بالبروتينات. مثلًا شخص لا يأكل لحومًا،
يعني أي شيء، البقوليات، اللحوم التي فيها
بروتينات، لا يأكلها إطلاقًا. فجأة فحصنا له الـ total
protein، وجدناه منخفضًا جدًا. طيب، هل هو منخفض لأنه عنده
مشكلة في الكبد، مثلًا، أنه لا يُصنِّع البروتينات، أو
لأنه عنده سوء التغذية، malnutrition، يعني عنده سوء
التغذية. إذًا أنا من خلال فحص الـ Total Protein أَقْدِر
أعرف هل هذا الشخص عنده سوء تغذية أم لا، تمام؟ ثاني
شغلة، أُشَيِّك على kidney disease، أُشَيِّك على الكلى.
كلنا نعرف أن البروتين، زيه زي الجلوكوز، أخذناه في
السوائل، عنصر مهم للجسم، ممنوع يخرج عن طريق الكلى مع
الـ urine، يجب إعادة امتصاصه، يعني الكلى بدها تعمل
للبروتينات reabsorption، وترجعها إلى الدم. طيب، لو
البروتين وُجِدَ في الـ urine، في الـ strip الـ urine،
وُجِدَ فيه بروتين، معناه في عندي مشكلة في الـ kidney. إذا
فحص الـ total protein يُشَيِّك على الـ kidney أيضًا.
يُشَيِّك على liver disease، لأنه أساسًا من المصنع الذي في
الجسم يُصنِّع البروتينات، حكينا أنه الـ liver. فأنا
أُشَيِّك على الكبد من خلال أني أعمل فحص الـ total
protein.
البروتين في البلازما مُؤَلَّف من ألبومين و Globulins.
عندي قاعدة، عندي معادلة كلنا بدنا نعرفها، إن الـ
Total Protein في البلازما ماذا تساوي؟ تساوي
الألبومين زائد الـ Globulin. حكينا إن الـ albumin نوع
من أنواع البروتينات موجود في بلازما الدم، وموجود
بأعلى تركيز، يعني هو المسيطر في البلازما، يعني نصف
البروتينات الموجودة في بلازما الدم عبارة عن
albumin. فالـ total protein تساوي الـ albumin زائد
الـglobulin. إذا نصف الـ total protein التي في
البلازما عبارة عن albumin، والنصف الثاني عبارة عن
الـ Globulins. البروتينات هي Iglobulin، الـ Globulin
أيضًا هذا البروتين فيه منه fractions، فيه منه أنواع:
الـ Alpha 1 Globulin، الـ Alpha 2 Globulin، الـ Beta
Globulin، والـ Gamma Globulin. إذا نفهم من النقطة الأولى
أنَّ الـ Total Protein تساوي الـAlbumin زائد
الـGlobulin. الـAlbumin يشكل نصف الـTotal Protein،
الـGlobulin عبارة عن أربعة fractions، تضم الـAlpha 1
والـAlpha 2 والـBeta والـGamma Globulins، تمام؟ هذه
الـFractions، هذه الأقسام. الـAlbumin وأنواع
الـGlobulins. Can be quantitated using a protein
electrophoresis. يعني أنا أستطيع أن أعرف تركيز الـalbumin،
تركيز Alpha 1، Alpha 2، و Beta، و Gamma، من خلال الـ
Electrophoresis، وهذا سياخذه سنة رابعة الفصل
الثاني. نفصلها على الـ cellulose acetate أو على
الجيل، ونرى الباندات الخمسة: الألبومين، الألفا 1،
الألفا 2، البيتا، الجامة. يعني أنا أحسب في النهاية
تركيزها. But the total protein test، أما الفحص
الكيميائي البسيط، وهو الـ Total Protein، is
faster and cheaper، أسرع من الـ Electrophoresis
أكيد، يعني خلال عشر دقائق يكون الفحص منتهيًا، and 176 00:14:
في هذا الجهاز نقيس زاوية الانكسار، كلما كان مقدار
زاوية الانكسار عالية جداً، هذا مؤشر أن الـ
Total Protein الموجودة في البلازما تركيزها عالي.
فكسرت الضوء المُسلط عليها بشكل أكبر،
تمام؟ هذا بكل بساطة ما نريد معرفته، وبرضه لستُ
مطالبين هنا في العمل به، لكن في النظر أكيد مطالبين به.
الطريقة التي يجب علينا معرفتها هي الطريقة الرابعة، الـ
Biuret Method، سنأخذها في الشرائح القادمة. طريقة
quantitative والامتصاص للـ total protein يكون على
540 نانومتر. طريقة الـ dye binding طريقة بسيطة جداً.
طبعاً الـ Serum يحتوي على الـ Total Protein التي
نريد قياسها، و الـ Reagent يحتوي على dye، يحتوي على
صبغة. هذه الصبغة ترتبط مع جميع البروتينات، ويعطيني
Complex ملون، ويتم قياس هذا الـ Complex الملون. الـ
Total Nitrogen. هذه طريقة يتم فيها قياس تركيز الـ
Nitrogen الداخل في تركيب البروتين، وقياس تركيز
الـ Nitrogen الداخل في مركبات أخرى غير البروتين.
علينا فهم أن الـ nitrogen لا يدخل فقط في
تركيب البروتينات، بل يدخل في مركبات أخرى. هذه
الطريقة تعطي الـ total nitrogen، من اسمها total
nitrogen، يعني تقيس الـ Nitrogen الداخل في تركيب
البروتينات، وتقيس الـ Nitrogen الداخل في تركيب
مركبات أخرى، وبحسبة معينة يتم حساب الـ Total
البروتين. هذه طرق كثيرة، الطريقة الشائعة لدينا هي
الـ Biuret Method طبعاً.
أجهزتنا الموجودة في مختبرنا تعمل بطريقة
الـ Biuret Method، حتى اسم الـ Reagent الذي يأتي مع
الـ Kit اسمه "Biuret Reagent"، تمام؟ إذن أنا أعرف
Biuret Reagent، هذا الـ Reagent خاص لقياس تركيز الـ
Total Protein. هذا الـ Reagent يا جماعة يتكون من ثلاث
مركبات أساسية: الـ Sodium Hydroxide، الـ Copper، الـ
Copper Sulfate، و الـ Potassium Sodium Tartrate.
إذن ثلاث مركبات أساسية داخلة في تركيب الـ Biuret
Reagent. هذا الـ Reagent يأتي من الشركة لونه أزرق،
لونه blue color، تمام؟ عندما أخلط هذا الـ
Reagent وأضيفه على الـ Serum الخاص بالمريض الذي يحتوي على
بروتينات، سيحدث تفاعل بين البروتينات الموجودة
في الـ patient serum، وبين الـ Reagent الذي لونه
أزرق، ومحصلة التفاعل ستتغير اللون من أزرق إلى
violet، إلى اللون البنفسجي. a blue reagent which
turns violet in the presence of protein. لأن الـ
Serum يحتوي على بروتين، فعندما نخلط الـ Serum مع الـ
Reagent يتحول اللون من اللون الأزرق إلى اللون الـ
violet، البنفسجي، تمام؟ الـ Sodium
Hydroxide لا يتفاعل في التفاعل إطلاقاً، لكنه فقط
موجود لإعطاء مواقع قلوية لبدء التفاعل. الفائدة
من مادة الـ Sodium Hydroxide الداخلة في تركيب الـ
Biuret Reagent فقط توفير مواقع قلوية، تمام؟ توفير
بيئة قلوية للـ Reagent. principal Biuret method.
مبدأ طريقة الـ Biuret بشكل مبسط، قبل أن نقرأ الـ
slide، سأخبركم وألخص المبدأ. عندما يكون الـ Serum
ماذا يحتوي؟ يحتوي على الـ total proteins، جميع البروتينات التي
أريد حساب تركيزها. البروتينات تركيبها، يا جماعة، كما ذكرنا، سلسلة من الـ
Amino Acid، من الأحماض الأمينية المرتبطة مع بعضها البعض بواسطة
روابط ببتيدية. عندما تحضر الـ Biuret
Reagent، الـ Reagent القادم من الشركة، وتضعه على
الـ Serum، تضعه فوق الـ Serum، تمام؟ ماذا سيحدث
بالضبط؟ كيف التفاعل سيحدث؟ لقد ذكرنا أن
الـ Sodium Hydroxide الموجود في الـ Reagent يوفر
بيئة قلوية للـ Reagent، okay. طيب، الـ Copper
Sulphate، ما وظيفته؟ الـ Copper Sulphate يذهب إلى
البروتينات، ويذهب إلى أين توجد رابطة ببتيدية، الـ Copper
Sulphate يتفاعل مع الـ peptide bond التي
تربط الأحماض الأمينية مع بعضها البعض. يأتي الـ
Copper Sulphate إلى أين توجد رابطة ببتيدية، يرتبط بها هناك في
هذه المنطقة، الـ Copper Sulphate، الـ Copper نفسه،
الـ Cu+2، يحدث له reduction، النحاس يحدث له
اختزال، ويتحول من Cu+2 إلى Cu+1، وهنا
يبدأ اللون بالتغير. إذن عندما نضع الـ Reagent، الـ
Biuret Reagent، على عينة السيرم التي تحتوي على
البروتينات، الـ Sodium Hydroxide يوفر بيئة قلوية
التي يحتاجها التفاعل، يحتاج إلى بيئة قلوية، تمام.
الـ Copper Sulphate يذهب إلى أين توجد الروابط الببتيدية،
الروابط الببتيدية، الرابطة بين الأحماض الأمينية، يذهب
ويرتبط، ويتفاعل معها. وهناك في هذه المنطقة يتحول الـ
Cu+2، النحاس +2 إلى Cu+1، يعني يحدث
اختزال reduction. أول ما يحدث اختزال في
النحاس، يتغير لون التفاعل من اللون الأزرق، لقد
ذكرنا أن الـ Reagent لونه أزرق إلى اللون الـ violet.
إذن عندما أرى اللون البنفسجي، أقول نعم، يوجد
بروتينات موجودة في الـ Serum، وتفاعلت مع الـ
Reagent، وأعطت اللون البنفسجي، تمام؟ ستسألونني عن المادة الثالثة في الـ Reagent،
ما وظيفتها،
التي اسمها بوتاسيوم صوديوم تارترات، هذه المادة
تعمل كمادة مثبتة Stabilizer للون البنفسجي، تثبت اللون
البنفسجي. يعني عندما يحدث تفاعل،
بين الـ Reagent و الـ Serum، ينتج لون، ولأن هذا اللون
لا يزول بسرعة، فهناك مادة في الـ Reagent اسمها
Potassium Sodium Tartrate تعمل كمادة مثبتة،
تثبت اللون وتجعله يدوم لمدة ساعة، تمام؟ لكي تستطيع
خلال هذه الساعة قياس التفاعل
على جهاز الـ Spectrophotometer، تمام؟ نقرأ الشرائح.
Peptide bond في البروتين تتفاعل مع التارترات
complex cupric ion in alkaline solution لتشكيل
نوع من الناتج، المبدأ كما ذكرت لكم
هو بالضبط أنه حيثما توجد رابطة ببتيدية، يذهب
الكبرصالفيت، يرتبط بها، يعطيني لون بنفسجي. من
يُثبته الـ Stabilizer، التارترات. إن a positive test
في الفحص الموجب، copper plus 2 ion is reduced
to copper 1، لقد ذكرت لكم، يحدث اختزال which forms a
complex with the nitrogens and carbons of the
peptide bond in alkaline solution. أمور ذكرتها ليست
كثيرة الوضوح، لكن المبدأ كما ذكرت لكم.
تمام؟ a violet color indicates the presence of a
protein. اللون البنفسجي يعني حدوث تفاعل فيه
بروتينات. The intensity of color. اللون
البنفسجي الذي ظهر، شدة اللون تتناسب طردياً مع
تركيز الـ total protein الموجود في البلازما.
يحدث طبعاً امتصاص absorption على 546، أو ما بين
الـ 520 و 570، بتناسب طردي مع تركيز الـ protein
concentration. يعني عندما يكون اللون الناتج عن
التفاعل غامق، هذا يعني، وأنا أقول لكم،
أن total protein سيكون عالياً. عندما يكون اللون طبيعي، أقول إن الـ total protein عند هذا الـ
patient طبيعي. لكن سأخبركم بشيء، الألوان لا تكون دائماً
صحيحة، أحياناً تخدعنا، تمام. فالأفضل القياس على
الجهاز، وليس بناء على اللون نقرر كمية الـ total protein.
هذا الكلام ليس صحيحاً دائماً، لكن هذه قاعدة أن شدة اللون تتناسب
طردياً مع تركيز الـ total protein الموجود في
العينة. هنا في الرسمة، ليس من الضروري معرفة تركيبة المركب
والأحماض الأمينية، لا، لكن عليكم معرفة أن هنا
مكتوب لكم peptide bond، حيثما توجد peptide bond، يذهب
الكبرصالفيت، يرتبط بها، ويحدث له reduction، النحاس
يتحول، ويتغير اللون من أزرق إلى بنفسجي. هذا ما
نريد معرفته من الرسمة، ليس مطلوباً منا معرفة
الرسمة، أو معرفة تركيبة مكوناتها. الآن سنتحدث عن
الـ specimen، نوع العينة. يعني لو جاءني مريض وأريد
فحص total protein concentration، تركيز الـ
total protein في بلازمته، العينة سيرم أو
بلازما، مسموح به سيرم وبلازما. may be used
تمام، and all usually yield comparable results. طبعاً
النتائج، سواء سحبت بلازما من المريض أو سحبت
سيرم من المريض، ستعطيك نفس النتائج، لا فرق يا
جماعة، سواء سحبت سيرم أو بلازما. لماذا لا فرق؟ because of the
presence of fibrinogen. البلازما levels for total
protein are 2 إلى 4 grams per liter higher than serum
levels. إذن نستخدم العينة سيرم أو بلازما. طيب،
لو سألناكم سؤال، ما الفرق بين السيرم و البلازما؟ الـ
Serum يحتوي على بروتينات، والبلازما تحتوي أيضاً على نفس
البروتينات، لكن البلازما تتميز بأنها تحتوي على بروتين غير
موجود في الـ Serum، وهو الـ Fibrinogen. إذن
البلازما تحتوي على Fibrinogen، أما السيرم لا يحتوي على
Fibrinogen، وكلاهما يحتوي على جميع أنواع البروتينات، لكن
الفرق في الـ Fibrinogen، لذلك أقول لكم مستوى
أو تركيز الـ Total Protein في البلازما يكون أعلى
من تركيز الـ Total Protein في السيرم بقيمة 2 إلى 4
جرام per liter، وهذه القيمة صغيرة جداً. لقد ذكرنا
أننا نقيس تركيز البروتينات بالـ gram per
deciliter، هنا مكتوب gram per liter، لتحويل
من gram per liter إلى gram per deciliter، نقسم على
عشرة، يعني اثنين مقسوماً على عشرة، وأربعة مقسوماً على عشرة، ماذا
يُصبح؟ 0.2 إلى 0.4 gram per deciliter، يعني
القيمة قليلة جداً جداً، إذن البلازما والسيرم عينة
مسموحة، سواء بلازما أو سيرم. معلومة تقول إن
الـ total protein الموجودة في البلازما أعلى من
الـ total protein الموجودة في السيرم بنسبة 2 إلى
4 gram per liter، وهي نسبة قليلة جداً، لأن البلازما تحتوي على
فيبرنوجين، يزيد التركيز. لكن الـ Serum لا يحتوي على
Fibrinogen.
لإجراء فحص الـ total protein، لكن دائماً أي فحص
يُفضّل أن يُجرى وهو صائم، الـ desirable،
المفضل، أن يكون المريض صائماً، okay. هو ليس إجبارياً كفحص
السكر، لكن الأفضل أن يكون صائماً، لأن الأكلات التي
تتناولها خلال اليوم قد تجعل عينتك تبدو وكأنها
لونها كالحليب، تحتوي على دهون من الطعام الذي
تناولته، ونخشى أن يكون لذلك تأثير على فحص الـ
Total Protein. is stable in serum and plasma. عينة الـ
Serum و البلازما يمكن حفظها ثلاثة أيام في
الثلاجة، أو ستة أشهر في الـ freezer على سالب
عشرين. الـ procedure الخاصة بالفحص، عندما نعود إلى الجامعة إن شاء
الله، سنعمل فحص الـ Total Protein Test. نسحب منكم
سيرم أو نسحب منكم بلازما، ونرى كم 394
الـ reference range، الـ normal range، reference
range for total proteins، الـ total protein في جسم
الإنسان 66.6 لـ 81.4 gram per liter. لو بدي أحولها لـ
gram per deciliter، بقسم الرقم على عشرة، يعني
حكيت لكم الـ total protein في بلازما الدم عندنا من 6
.6 لـ 8.1 gram per deciliter، تمام؟ هنا كتبت كل واحدة
بالـ gram per liter. results for males are
approximately واحد gram per liter higher than
results for females. This difference is probably not
of clinical significance. هنا بيحكي لي الـ total
protein concentration، تركيز الـ Total Protein عند
الرجل أعلى من تركيز الـ Total Protein عند المرأة
بنسبة 0.1 gram per deciliter أو 1 gram per liter.
وهذه القيمة قليلة جداً، تكاد أن تكون مهملة، تمام؟
معلومة بسيطة عارضة، يعني أن الـ Newborns، في المولود
الجدد، الـ mean serum protein concentration، تركيز
الـ total protein عندهم 5.7 gram per deciliter.
تمام؟ أو 57 gram per liter. إذا لاحظتم، قليل للإنسان
الطبيعي يبدأ من 6.6، أما الأطفال 5.7، يعني عندهم
الـ total protein قليلة. لو سألناكم سؤال: لماذا؟ ما هو
البديهي؟ المولود الجديد، أعضاؤه لسه ما تكون متكاملة.
الـ liver عنده لسه ما اكتمل، ما قادر يؤدي وظيفته، عنده
أصلاً الـ liver لسه ما اكتمل، وبالتالي ما هيقدر يصنع
البروتينات بالوضع الطبيعي، فأكيد الـ total protein
عند المواليد الجدد حتكون قليلة، أقل من الطبيعي. يبدأ
يزيد إلى 60 gram per liter، بعدين يبدأ يزيد إلى 6 gram
per deciliter خلال أول ستة شهور، لما يصير عمر الطفل
ستة شهور، يبدأ يزيد عنده، تمام؟ وبعد ما يصير
عمره ثلاث سنوات، بده التركيز تبعه، تبع الـ Total
Protein يكون مثل تركيز الإنسان البالغ الطبيعي.
يعني بيصير 6.6 لـ 8.4 لما يصير عمره ثلاث سنوات، خلاص
زي البالغ، بيكون تركيز الـ Total Protein عنده،
تمام؟
الـ Hypo-proteinemia والـ Hyper-proteinemia، حالات
مرضية. لما أحكي لكم Hypo-، sorry، Hypo-proteinemia،
كلمة Hypo معناها انخفاض. البروتيـنيميا، انخفاض الـ
total protein في بلازما الدم، يعني قلة الـ total
protein بتقل، تمام؟ أول شيء في نقص التغذية، الـ nutrition
في سوء التغذية، نقص في الأكلات فيها بروتينات، أو
«malabsorption»، عندك سوء امتصاص، يعني إنسان بياكل
لحمة وبقوليات، لكن عنده مشكلة في الأمعاء، ما بتمتص
البروتينات، وبالتالي بيصير عنده كأنه ما أكل.
وبالتالي بيصير عنده حالة الـ hypoproteinemia. الحالة
الثانية، Excessive Loss as in Renal Disease، عنده
مشكلة في الكلى، الكلى بتسرب البروتينات مع الـ Urine.
حكينا يفترض البروتين ما ينزلش مع الـ Urine، يصير له
إعادة امتصاص، بس في حالات الـ Renal Disease، مشاكل في
الكلى، بيصير عنده Excessive Loss، فقد مهول
للبروتينات في الـ Urine، وبالتالي البروتينات في الدم
حتقل. G.I. Leakage، هاد اختصار لـ
Gastrointestinal Leakage، يعني بيصير عندنا تسرب من
الأمعاء. كيف؟ الأمعاء فيها مشاكل، فبيصير عندي فقد الـ
Gastrointestinal Leakage، معناها مشكلة في الأمعاء.
وبالتالي يحدث هناك تسرب للبروتينات مع البراز، يعني
بتخرج البروتينات مع البراز، إذا كان عندك مشكلة
بالكلى، حتخرج مع الـ Urine. عندي مشكلة بالأمعاء، في
الـ Gastrointestinal Tract، في القناة الهضمية، حتخرج
البروتينات في البراز. والوضع الطبيعي، ممنوع أشوف
بروتين لا في الـ Urine ولا في البراز. Excessive
bleeding، صار عندك نزيف. لما بيصير عندك نزيف، الإنسان
بفقد الدم، فالدم أصلاً فيه بروتينات، وبالتالي حتقل
الـ severe burns، الحروق اللي بتكون من الدرجة
الثالثة، يعني حروق عميقة جداً. هذه الحروق بيصير فيها
انْسِحاب لبلازما الدم، انسِحاب لبلازما الدم من خلال الحرق نفسه.
لما بيصير عندك انسحاب للبلازما، البلازما بتطلع، يعني
إيش؟ يعني البروتينات برضه بتطلع من خارج الجسم. هذا
نوع من الدرجة الثالثة، برضه في الحروق بيصير عندنا
انسحاب للبروتينات عن طريق الـ skin، تطلع عن طريق الـ
skin. excessive catabolism، يعني في عندنا الـ
catabolism، معناه الهدم، هدم وتكسير البروتينات بشكل
مهول. مثلاً، البروتياز بتكون overactive عندنا.
بروتينات اسمها بروتياز بتكسر البروتينات، نشاطها
مهول، يعني نشاطها غير طبيعي، وبالتالي أي بروتين
بتصنع بتتكسر، وبالتالي محصلة الـ total protein في
الدم حتقل. liver disease، عندك مشكلة في الكبد، معناه
مش حيتم تصنيع البروتينات. أما حالات الـ hyper-
proteinemia، كلمة hyper معناها ارتفاع. بروتينيميا،
يعني ارتفاع الـ total protein في الدم، نتيجة
الـ dehydration، نتيجة الجفاف. لما إنسان يصير معه
جفاف، في الجفاف الإنسان بفقد سوائل، صح ولا لأ؟
وبالتالي لما تفقد سوائل، البروتينات الموجودة في
البلازما بتتركز في جسمك، تمام؟ البروتينات الموجودة
في البلازما بتتركز في جسمك، وبالتالي بيزيد تركيزها.
حالات الـ Monoclonal و الـ Polyclonal، هذه أمراض
مناعة. حتاخدوها في المناعة. الـ Monoclonal و الـ
Polyclonal، معناها زيادة في الـ Antibodies. ما أنتم
عارفين الأجسام المضادة، الـ Antibodies، هي عبارة عن
بروتينات. فلو زادت الـ Antibodies، معناه Total Protein
حيزيد، تمام؟ هذه حالات مرضية، حتفهموها أكثر في
المناعة. فقط تؤثر على تركيز الألبومين أو
الـ Immunoglobulins. ستجعل الوضع مرتبط بقيمة
البروتين المتعاملة. لو سألناكم سؤال: قيمة البروتين
المتعاملة اللي في بلازما الدم، عبارة عن شو؟ عن شقين.
حكينا الألبومين و الجلوبيولين. واتفقنا أن الألبومين
يشكل نصف الـ Total Protein، يعني نصف البروتينات
الموجودة في البلازما، عبارة عن ألبومين. زائد
Globulin. الـ Globulin قلنا عبارة عن أربعة أنواع:
Alpha-1، Alpha-2، و Beta، و Gamma. Gamma هي الـ
Immunoglobulin، هي الـ Antibodies. الـ Gamma
-Globulin هي الـ Immunoglobulin، الأجسام المضادة. تمّ
نحكي عنها Gamma Immunoglobulin. هلّأ جيت يا جماعة،
بيقول لي إنه لو صار عندي مشكلة في تركيز الألبومين،
أو صار عندي مشكلة في تركيز الـ Immunoglobulin اللي
هي الـ Gamma Globulin، هدول فقط هم اللي حيأثروا
على تركيز الـ Total Protein ككل. ليش؟ لو سألناكم
سؤال؟ لأنه أصلاً تركيزهم هو الأعلى في كل البروتينات.
يعني الـ Albumin هو تركيزه الأعلى، وبيجي وراه
الـ Gamma Immunoglobulin. وبالتالي أي خلل فيهم، أي
خلل في الـ Albumin أو في الـ Antibodies، في
الـ Immunoglobulin، حيأثر على كل تركيز الـ Total
البروتين. لكن لو صار عندي مشكلة في تركيز الـ Alpha-1
Globulin أو الـ Alpha-2 Globulin أو الـ Beta
-Globulin، مش حيأثروا كثير في الـ Total Protein ككل.
مش حيأثروا في تركيز الـ Total Protein ككل. وهذا
بيحكي لي إياه النقطة الثانية. Other Serum Proteins.
البروتينات الأخرى اللي موجودة في الـ Serum are
never present in high enough concentrations، مش
موجودة بتركيز عالي كفاية for it to change a
significant overall effect. البروتينات الأخرى
مش موجودة بالتركيز الكافي، عشان لو حدث خلل فيها
يصير عندي خلل في الكلي. إذن، ملخص المحاضرة:
الـ albumin أو الـ immunoglobulin، حدث فيهم مشكلة،
حيأثر على التركيز الكلي للـ total protein. لكن الـ
α1 و الـ α2 و الـ β globulin، لو حدث فيهم خلل، هو
أصلاً تركيزهم مش عالي كتير، فلو حدث فيهم خلل، مش
حيبان، وبالتالي الـ total protein مش حيتأثر.
Note، ملاحظة مهمة. To detect a small amount of a
protein، we can use الـ TCA، اختصار لـ
Trichloroacetic Acid، أو مادة الـ Sulphosalicylic
Acid، بتركيز 3%. هلّأ جيت يا جماعة، في عينة الـ urine،
أحياناً بتحطي الـ strip وبتطلعي، وبيعطيك الـ strip
أنه ما في بروتين. لكن أحياناً ممكن تكون كمية البروتين
اللي موجودة في الـ urine very very small، قليلة
جداً، وبالتالي الـ Strip ما بيقدر يكشف عنها. الـ
Strip بيعطيك أنه ما فيه بروتين، بس فعلياً هو بيكون
فيه بروتين في الـ urine، ولكن تركيزه قليل. فإحنا لما
نشتغل، بنروح بنحط على عينة الـ urine مادة الـ TCA، ممكن
أخذتوها، هذه من السوائل، أو مادة الـ Sulphosalicylic
acid. هذه مادة حامضية، إيش بتعمل لما بتحطيها على الـ
urine؟ لو الـ urine فيه بروتين، هذه مادة حامضية
حتكسر البروتينات، حتعمل denaturation للبروتينات.
وبالتالي حتحول عينة الـ urine لعينة معكرة، لعينة
مرسبة. فأنت لو حطيتيها ولجيت العينة صارت معكرة،
معناه فيه بروتين جوا الـ urine. لكن لو حطيت هذه
المادة الحامضية على الـ urine وما صار فيه تغيير على
الـ urine، معناه هذا الـ urine ما فيه بروتين. الـ TCA
أو الـ Sulphosalicylic Acid، مبدأ المادة، البروتين
الـ denatured by acid. لو كان فيه بروتين في اليورين،
وضفت عليه هذا الحمض، حيكسر البروتين، الحمض هذا
حيكسر البروتين، الـ precipitates، حيرسبه، and renders
the specimen more turbid، ويخلي عينة اليورين معكرة
بالزيادة، as its concentration is increased. وهنا أنتِ
بتعرفي أنه أكيد فيه البروتين. كمان شغلة، مش بس بنستخدم
هذه الطريقة عشان أكشف عن البروتين اللي موجود
بكميات قليلة جداً في اليورين. بطريقة الـ TCA أو الـ
SSA، بقدر أحسب تركيز البروتين اللي موجود في عينة
الـ CSF، الـ Cerebrospinal Fluid، سائل النخاع الشوكي.
مش حكينا هذا السائل فيه سكر وفيه بروتينات، لكن
نسبة السكر جداً قليلة، ونسبة البروتينات برضه قليلة.
فلو أنتِ جبتِ عينة CSF، ركزوا معي، وبدك تحسبي الـ
Total Protein اللي فيها، ورحتِ اشتغلتِ على هذه
العينة، ضفتِ عليها الـ Reagent تبع الـ Biuret.
Reagent اللي هو الـ Reagent الأول اللي حكيناه، مش
بيجيب الـ Total Protein، بس بتعرفوا أن الـ Biuret
Reagent بيجيب الـ Total Protein اللي موجود في
البلازما الدموية. لكن ما بقدر يجيب الـ Total Protein
اللي موجود في الـ CSF. ليش؟ خلاص، هذا الـ Reagent
له Linearity، خطية، يعني بيجيب من قيمة معينة ويطلع 613 0