الـ Coli Lert Test نفس الـ membrane filter test
هذا بيكشف أو بيستخدم عينات الـ water اللي بدها تصير
أنه بيجيني الـ Coli Lert Test على شكل kit، الـ kit
هذا بيكون فيه الـ nutrients أو بيكون فيه reagents
مغذيات و reagents، الـ reagents اللي فيه واحد اسمه
MUG هذا بستعمله لأكشف عن الإشريكية القولونية؟ بكون
عندي عينة الـ water وبيكون فيه مع الـ kit بيكون فيه
باقات لـ nutrient ولا reagent بروح أفتح الباقات بحط
فيه الـ MUG بخليه incubation 24 ساعة وبعد هيك بروح
أعرض العينة لـ UV لو صار اللون fluorescent معناته
موجود بالعينة الإشريكية القولونية، الـ reagent الثاني اسمه
ONPG بنستعمله للكشف عن الـ Total Coliform بيكون فيه
عينة الـ water بحط فيه المغذيات و reagent ONPG بعمله
incubation 24 ساعة وبعد هيك بلاحظ هل لون الميه
اتغير إلى أصفر أو لا، لو اتغير معناته الموجود هو
Total Coliform، الـ Colored يعتبر qualitative not
quantitative يعني بقول لي هل موجود Total Coliform أو
لا موجود الإشريكية القولونية في العينة أو لا، لكن قداش الـ
concentration اللي لهم ما بنقدر نعرف، used to detect
Total Coliform و الإشريكية القولونية، شو بعمل؟ add
bucket of salt and nutrients to water sample
وبعدين أعملهم incubation 24 hour، Total Coliform
بكشف عليها من خلال إضافة الـ ONPG reagent، فلو كان
موجود Total Coliform في العينة بتطلع البكتيريا هاي
إنزيم اسمه beta-galactosidase، بيجي هذا الإنزيم
بيشتغل على الـ reagent اللي اسمه ONPG بيحولوه إلى مادة
اسمها الـ Nitrophenol لونها yellow، فمجرد ظهور
اللون الـ yellow بعد 24 ساعة من الـ incubation
معناته موجودة Total Coliform، طيب كيف بدكشف على
وجود الإشريكية القولونية؟ بروح أضيف الـ MUG تمام، لو
الموجود إشريكية قولونية هتطلع Glucuronidase إنزيم بيجي
هذا الإنزيم بيشتغل على الـ MUG بيحوله إلى molecule
that fluoresces under UV، هيصير وميض تحت الـ UV
light، لكن مشكلة الـ Coli Lert Test أنه ما بقدر
يكشف عن طول الـ strains من الإشريكية القولونية اللي
بتشمل كمان الـ pathogenic strains، احنا قلنا
الـ Coli Lert موجود أنه على شكل kit، الـ kit بيكون فيه
باقات لـ nutrient لـ reagent، حاليًا قد طوروا الـ
test هذا، فصاروا يعملوا الـ media سواء كانت الـ broth
أو الـ agar من ضمن مكونات الميديا الـ ONPG والـ MUG
الـ Coli Lert بيكشف عن الكوليفورم الإشريكية القولونية
اللي موجودة في المياه العذبة الـ fresh water لكن
عملوا Coli Lert 18، هذه بيكشف عن الكوليفورم
الإشريكية القولونية اللي موجودة في الـ marine waters في
المياه المالحة، احنا قلنا الـ Coli Lert فحص qualitative
طوروه، عدلوا، صار quantitative test، كيف بيستخدموا
حاجة اسمها quantitative، الـ quantitative هي زي
الصينية اللي عندكم في الرسمة هاي، بيكون فيها آبار
الفكرة بيكون عندي الـ water sample بعملها التخفيفات
اللازمة، بعد هيك على كل تخفيف بدي أضيف الـ reagent و
بعمل mix من كل تخفيف، بروح أخد وبحط على الـ well الأول
من الـ well الثاني، فبعمل تخفيف على الـ well اللي بعده ومن
اللي بعده وهكذا، بعد هيك بعملهم incubation 24 ساعة
على درجة حرارة 37 وبروح أشوف إيش اللون اللي راح
يتغير فيه، اللون أصفر وبروح أعد اللون الأصفر اللي
طلع عندي في الـ quantity الـ tray وبروح لجدول بقول له
لو طلع معي عدد الـ wells اللي اتغيرت لونها هلقات بعدين
إنه كم بطلع الـ concentration من الجدول بعرف قداش
الـ concentration للبكتيريا، فالـ analyte لـ Coli Lert
إيش المقصود بالـ analyte؟ يعني الشيء اللي
أنا بدور عليه، الـ Coli Lert بيبحث عن الـ Total
Coliform عن الإشريكية القولونية، طيب الـ time to
result قداش بحتاج الـ time لتطلع النتيجة؟ يعني قداش
بحتاج الـ incubation؟ بحتاج 24 hour، النتائج لو طلع
colorless معناته negative إن العينة مافيش فيها شيء
لو طلع لون أصفر بعد 24 ساعة معناته موجود Total
Coliform، لو عرضتها إلى الـ UV وطلع fluorescent
معناته موجودة الإشريكية القولونية، ما قلنا فيه الـ
Coli Lert بيكشف عن الـ Coliform والإشريكية Coli
عن الـ Entero Lert اسمها طريقة بتكشف عن الـ Enterococcus
فكيف فكرة الـ test هذا؟ بيكون عندي عينة المي اللي
هي water sample بحط عليها الـ reagent وبعدين بشوف
اللون اتغير أو لأ، لو صار fluorescence معناته موجود
Enterococcus، بغض النظر عن الـ species سواء Enterococcus
faecium أو faecalis، لو not fluorescence ما صار تغيير
في اللون يعني لما عرضته لـ UV معناته الموجود not
Enterococcus، يعني عند العينة أنها negative في الـ Entero
Lert، 3 agent is used for detection of
Enterococcus bacteria such as Enterococcus faecium و
Enterococcus faecalis سواء كان بالـ fresh or marine water
ليه بعد و هذا مش لازمنا؟ إيش الـ .. إيش الـ analyte
في الـ Entero Lert test؟ analyte يعني الشيء اللي
بدور عليه، قلنا هذا فقط بيكشف عن الـ Entero .. الـ
Enterococcus، طيب، قداش بحتاج إلى time أو الـ
incubation؟ 24 ساعة، لو طلع معي fluorescent معناته
Enterococcus، لو non-fluorescence معناته negative
بعرضها إلى الـ UV light، هذا كان الـ Entero Lert
بالأول qualitative يعني موجود أو مش موجود، بعد هيك
طوروه فصار quantitative من خلال الـ Quanti-Tray
بعدين قداش اللي اتغير لونهم، بروح لجدول وبشوف الـ
concentration اللي لهم، بس في معلومة مهمة بقول لي
أنه لو بدي أتعامل مع الـ UV بدي ألبس الـ Anti-UV
glasses or goggles، الجدول هي اللي قلنا عليها
بالنسبة للـ Basic steps من جمع العينات إلى تفسير
النتائج، Collection أو Collecting samples بيصير جمع
للعينات بواسطة الـ Collector، بعدين بيصير فيه
Transporting samples نقل للعينات حسب الظروف اللي
كانت موجودة فيها، Delivering samples لما تصلني على
المختبر، أما بشتغلها مباشرة إن هذا هو الأفضل أو أنه
بخزنها لعند ما أفضل، لكن التخزين بدي يكون صح لا بـ
preparation، كيف بدي أجهز المعمل؟ يعني إيش المقصود
فيها؟ إنه بدي أعقم المكان اللي بدي أشتغل عليه؟ إنه
مثلًا بدي أحضر الـ media اللي بتلزمني؟ طيب الـ
preparing sample، عينتي لو كانت مثلًا liquid بدي
أعملها mix or shaking، لو كانت صلبة بدي أعملها
باستخدام الـ blender أو الـ stomacher لحد إن هي تكون
عندي عندي عينة homogeneous، incubating sample،
reading sample، disposing sample، خلاص بقى أخلص
منها بالنهاية، بالنسبة للـ Data Management والـ
Data Interpretation هي تفسير النتائج، بقول لي إنه
هذه الأشياء مش شغلنا احنا شغلنا بس يعني احنا
مسؤولين بدنا نطلع الـ concentration اللي
بيحكي لنا إنه التركيز مناسب أو لا مقارنة مع الـ
standard، هي الجهات المسؤولة هذا مش شغلي أنا، طيب
شو بحتاج إلى مواد أو equipment؟ بيبتون water
بستخدمه كـ diluent، هي الـ normal saline والبيبتون
saline هي كلها diluent بنخفف العينات فيها، بنخفف
البكتيريا في العينة عشان ما نحكي too numerous to
count، Sodium citrate هذا شو بيعمل؟ Sodium
citrate بتركيز 2% يستخدم كـ emulsifying agent، ما نرجع
علينا لما قلنا لما يكون عند الـ food فيه نسبة دهن
كتيرة، فبدي أدوب كل المحتويات اللي بالعينة بستخدم
الـ emulsifying agent Sodium Citrate، بس قبل اللي
أستخدمه لازم أعمله الـ Pre-warming على درجة حرارة
خمسة وأربعين سيليزياس، Lauryl Sulfate Tryptose
Broth قلنا هي الـ Media Broth تُعتبر Screening
Test أو Pre-sumptive وبأستخدمها لـ Total Coliform
Media فيها Lactose لكن ما فيها pH Indicator، كيف بقدر
أعرف إن البكتيريا عملت fermentation لللاكتوز أو لا؟
من خلال خروج للغاز باستخدام الـ Durham tube، الـ
Brilliant Green Lactose 2% Broth نفس الشيء، ميديا
فيها لاكتوز لكن فيها لون فهي Confirmatory test
للكوليفورم الإشريكية Coli، Broth هيقول لنا عليها
Confirmatory test لـ الـ fecal coliform، ممكن يكون
أيضًا فيه إشريكية قولونية Broth with MUG، احنا قلنا قبل
شوية إنه الـ Coli Lert فيه two reagent ONPG
و MUG، وصار حاليًا إنه بيستخدموا الـ reagent
هذول اللي بيحطوهم على الـ media سواء كانت الـ broth
أو كانت Agar، Eosin Methylene Blue أو Endo agar، قلنا
الـ Eosin Methylene Blue فيها صبغتين لو اللي نمت عندي
شريشة كولاي هتعمل a might bond بين الصبغتين
وبالتالي هيصير اللي هونها green metallic sheen طيب
لو كان اللي نامي عندي هي الـ Enterobacter هتعمل
precipitate عشان لأ الصبغات هي في منتصف الكلونز
وبالتالي هيطلع شكلها الـ fish eye الـ Endogar قلنا
high differential media شو فيها؟ فيها لكتوز و فيها
فوكسين داي فبتنمي الكوليفورم وبتميزها من خلال الـ
dark red with metallic gold sheen اللي هو الأحمر
غامق ما فيها بيكون فيه لمعة اللي ماكن كأجار high
media بتنمي لجرام negative بتشوف إذا البكتيريا عمل
fermentation لأ لكتوز أو لألـ Nutrient Agar أو Non
-Selective Agar قولنا هاي الـ General Media ما
فيها Inhibitors ليش بستخدم الـ Nutrient Agar
بإضافة إنها بتنمي جميع أنواع الـ Microorganism
برضه بستخدمها في حالة الـ Biochemical Test إحنا
قولنا لو كانت الـ Colonies بستخدم عليها الـ TTC
Triphenyl Tetrazolium Chloride هذا الأشي راح تغير
من خصائص البكتيريا وبالتالي مش راح تظبط أنه
أستخدمهاللـ biochemical test بدي أستخدم البكتيريا
لل biochemical test لازم تكون fresh و نامية فقط
على الـ Nutrient Agar أو أي ميديا non-selective
الـ water bath بقولّي water level should be above
the medium in immersed tube لازم أن المي تكون
غامرة العينة في الـ water bath مشان يصير توزيع درجة
الحرارة بشكل متجانس الـ Thermometer بستخدمه لأقيس
درجات الحرارة الـ Stomacher أو البلندر بستخدم لطحن
الطعام السترد بتحوله لليكود لحتى أنه يصير
homogenous في عندي حاجة اسمها الـ Control cultures
بستخدمه ATCC culture or equivalent شو هي الـ ATCC؟
هي American Type Culture Collection هي عبارة عن
مؤسسة بتجيب عينات الـ controlات على المعامل وبيتوزعها
على البلدان طيب شو السبب؟ بقول ليه مثلا لو .. لو
إجي حد اشتغل على عينة إشاريشا كولاي وطلعت معاه
positive مع فحص معين إجي حد تاني اشتغل من طبق تاني
برضه هذا الطبق مكتوب عليه إشاريشا كولاي واشتغل نفس
الفحص لكن طلعت معاه النتيجة negative طب مع أن
الأثنين كانوا نفس الإشاريشا يعنينفس الاسم
Escherichia coli ونفس الفحص لكن الاختلاف كان يعني
كل واحد منطبق طب يعني وين المشكلة بدها تكون؟
المشكلة بتكون أن Escherichia coli المستخدمة كانت
من strains مختلفة، من سلالات مختلفة طيب حكوا بدنا
نحل هاي المشكلة فبدنا نعطي البكتيريا اللي أشتغلنا
عليها بنعطيها أرقام و بنوزعها كـ controlات على بلدان
العالم فالبكتيريا اللي إحنا ابتجيلنا على المعمل
بتكون جاية من برا يعني بتكون بكتيريا بتكون مستوردة
فابتجيلها على شكل كريستالات بلاستيك بنحلها على
الطبق بطريقة معينة أسباب المثال كان عندي بكتيريا
الشريشة كولاي الـ ATCC لإلها 4321 4321 هذا هو
رقم الـ strains لإلها فلازم هاي البكتيريا تطلع نفس
النتيجة في كل بلدان العالم لهذا النوع من الـ
strains كل واحد اشتغل على هذا الـ strain بفحص معين
لازم الكل يتطابقوا بنفس النتيجة بالنسبة للـ
positive control عسب المثال الشريشة كلها بتطلع
جهاز ع درجة حرارة 44.5 أو 45 اللي انكبتوا 24 ساعة
لإنه كل هاي يعتبر من الفيكا الكوليفورم هاي اللي
فيها أربعات كمان عندها القدرة إنها تعمل
fermentation للاكتوز بتطلع أسد و بيتجاز كمان على
الـ EMP Green Metallic Sheen لو استخدمت الإشاريشا
كولاي MUG broth كمان عندها القدرة إنها اتحول للون
أصفر أو لون fluorescent معناته موجودة الإشاريشا
كولايبالنسبة لـ MVEC في الإشاريش كولاي بيكون
Positive Positive Negative Negative بالنسبة للـ
Negative Control استخدموا الـ Enterobacter
Aerogenes هذه البكتيريا على الـ EMP طبعاً بتطلع
Fish Eye بالنسبة لـ Indol هتكون عكس الإشاريش كولاي
بقولنا الشريشة positive positive negative negative
الـ Antibiotic هتكون negative negative positive
positive الـ MPN broths المقصود فيها اللي هي الـ
LST الـ BGLP و الـ EC broth لاحظوا إن السلمونيلا
طبعا الـ Media هاي بيكون فيها lactose السلمونيلا هي
من ضمن الـ Enterobacteriaceae لكن non-lactose
fermenter بالتالي مش راح يطلع معها جاز لهيك حكوا
إن السلمونيلا تعتبر negative من ناحية الـ MPN
growth gas negative in MPN growth بالـ EC growth
طب ليش ما استخدموا الـ Enterobacter aerogenes ك
MPN growth negative control قالوا إنه بعض السلالات
من الـ Enterobacter
aerogenes﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿﻿
باستخدام NaCl باستخدام HCl و NaOH طيب لو بحتاج
شغلات ك confirmatory بنلجأ ل الـ biochemical test
اللي هي بنستخدم الـ MVC فلتريبتون، هاد لتريبتون
بيعتبر reagent للـ Indol كيف بعرف أنه صار positive
أنه بتطلع رنج لونها أحمر؟ فالاشريشيا كلها بالنسبة
لـ MVIC كانت positive positive negative negative
لأن تربع أكتر negative negative positive positive
كمان ممكن نلجأ للـ rapid identification kit زي مثلا
باستخدام الـ API وهي Analytical Profile Index بيكون
فيها أنابيب صغيرة كتير بتكشف عن الـ 20 فحص بنفس
العينة بوزعها على الـ 20 well من ضمن هذه الفحصات
بتكشف عن الـ ONPG قولنا هذه متخصصة بالكشف عن الـ
Total Coliform كمان في كمان لـ LVDK اللي يعتبر
Automated Test وكمان في شغلات تانية كـ
Coliformatory بالنسبة لطريقة التعامل مع أي عينة
each sample unit may be analyzed individually طبعا
كل عينة بيتعامل معاها بشكل مستقل وعلى انفراد كمان
شو بدي أعمل أنه أول ما تيجيلي العينة بدي أحافظ
عليها على الـ room temperature معاها العينة المجمدة
والمثلجة العينة المجمدة بحافظ عليها في الظروف اللي
كانت موجودة فيها بحطها في ice بيكون درجة الحارة أقل
من zero للتلاجة بحطها في ظروف من 2 ل 5 لو بدي
أسيح العينات المجمدة بنزلها على التلاجة لو مستعجلة
عليها على الـ water bath في درجة لا تزيد عن 45 ومدة
لا تزيد عن ربع الساعة المفترض إنه analyze sample
unit as soon as possible after they're received in
the laboratory بالنسبة لـ Shellfish اللي هي المحار
أو القواقع لازم نشتغلها بسرعة لمدة 24 ساعة بعد
جمعها ما نفعش إنه انخزنها لإنه بعد هيك بتتلف ال
preparation for analysis Sterile Peptone Water بدي
أعقم بدي أحضر الـ diluent بعد هيك بدي أعقمه أحطه
بالـ autoclave أclean the surface of working area
ودي استخدم الـ disinfectant وبيحقم المكان اللي بدي
أشتغل عليه بعد هيك بدي أحضر الـ ST broth قلنا هي
ميديا فيها لكتوز لكن مافيها pH indicator بالنسبة
لـ typical growth result observed for EC broth
بالنسبة للإشريشا كولايا broth كيف بدي أعرف إنه صار
فيه نمو أول حاجة طالما هي عندي الـ Growth معناته
بدي ألاحظ من خلال العقارة، هاي واحد تاني شغلة
بلاحظ من خلال استخدام الدرهم، الـ tube و بقى أشوف
إذا اتكون فيها غاز أو لأ فبنتطلع على تخفيف عشرة
أقل سالب ستة كلهم Clear معناته Zero يعني ولا واحدة
فيها نمو عشرة أقل سالب خمسة كلهم Clear برضه معناته
ولو واحدة فيها نو فـ 0 بدي يكون عشر أقل سالب أربعة
في turbidity في اتنين و level نص high clear فبدي
أكتب اتنين عشر أقل سالب تلاتة التلاتة فيهم
turbidity عشر أقل سالب اتنين التلاتة فيهم كمان
turbidity فالرقم اللي طلع معي ابتدائي من أعلى
تخفيف إلى أقل تخفيف تلاتة تلاتة اتنين زيرو زيرو
برجع للجدول و باخد الرقم هاد و بشوف ضمن الجدول مين
هي اللي بيكون فيها خمس تخفيفات كل تخفيف قيلو تلت
تيوبات كم قيلو الـ concentration هاد هي طريقة ال
MPN شوفت الاتيوبات اللي عندي يعني مثلا عشرة و
أسالب اتنين اعملناله تلت اتيوبات عشرة و أسالب تلت
اعملناله برضه كمان تلت اتيوبات عشرة و أسالب أربع و
هكذا بشوف قداش في عندي الـ turbidity و بامشي
بالترتيب من 10 أس 3 ب 2 ل 10 أس 3 ب 3 قدش فيهم ال
durability فبكتب الرقم طلب معايا 33200 باخد الرقم
هات بروح أدور فيه الجدول في خانة كم من تخفيف
بختار عن رقم 5 لإن أنا هيني عاملة عن خمس تخفيفات
من 10 أس 3 ب 2 ل 10 أس 3 ب 6 بعد هيك بدور على عدد
الـ tubes لكل تخفيف أنا حاط تلات تخفيفة، أنا حاط
تلات تيوبات ممكن أحط أربعة، ممكن خمسة فبدور في ال
gradual وين خمس تخفيفات وإلو تلات تيوبات وبطلع
معايا الـ concentration لإلهم وهذه طريقة الـ NPN
اللي راح نستخدم إن شاء الله في المعمل القادم لملة
هاد هو لـ EMB أيوزين ميثاين إبلوملون لما يكون
green متالكشين معناته اللي نمت عندي هي الاشريشيا
كولاي لما يكون ال colors في النص فيها اشي غامق،
dark، purple، شكل ال fish eye معناته high
enterobacter الـ EMB is a primer لـ differential
medium هي بتميز بين الاشريشيا كولاي وبين الأنواع
التانية اللي راح تنمو على الطبق However, it does
inhibit the growth of some gram-positive bacteria
طالما هي بتعمل inhibition لبعض من ال gram-positive
بكتيريا أو بتنمي لجرام نيجاتيف معناته برضه كمان
selective agent EMB is selective media EMB is used
to differentiate between enteric lactose fermenter
and non-lactose fermenter الـ EMB بتميز بين
الكوليفور والنون كوليفور
وبشكل خاص هي بتميز الاشريشيا كولاي من خلال الـ green
metallication يوزين مثلين بلو أجار contain فيها
بيبتون وهذا كمصدر للتغذية، فيها لاكتوز، بتميز
البكتير اللي بتعمل lactose fermenter and non
-lactose fermenter الصبغات اللي فيها تستخدم
لـ inhibition لـ gram positive فالـ Selective agent
هي الصبغة اللي بيبتغل اللكتوز كـ differential
agent دي sugars provide fermentable substrate to
encourage growth of fecal coliform الصبغة بتعمل
inhibition لليجرام positive organism لما بتعمل
fermentation هيطلع منها ال acid وبالتالي هيطلع لون
dark purple بشبه ال fish eye The use of methylene
blue dyes cause lactose fermenters to have pink
colonies إذا كانت lactose fermenter هيكون لون
الكونية لونها pink الشريشة بتقوم بتعمل incorporate so
much of the dye يعني بتعمل peptide bond لصبغات مع
بعض precipitated in the cell and give the colonies
a metallic green sheen non-lactose fermenter اللي
مابتعمل fermentation لأ اللاكتوز حضلهالونها هيكون
شو colorless or take on the color of the media أو
هتاخد لون الـ media نفسه زي مين السلمونيلا هي من
ضمن الـ bacteria سلاكلها Lactose fermenter
السلمونيلا زي ما قلنا انها بتعمل food poisoning
this media is used to confirm the presence of
Escherichia coli in water sample contaminated with
sewage or fecal material هي نقدر نعرف من خلالها إنه
هاي إشريشيا كولاي لكن برضه كمان بنحاجة إن إحنا
نتأكد من خلال الـ Biochemical Test you will use
this agar again with the water sampling experiment
to differentiate between إشريشيا كولاي and
Enterobacter لو بدي أميز نمط الإشريشيا كولاي أو
الـ Enterobacter فيه العينة من خلال الـ EMB
الإشريشيا كولاي الـ Green Metallic Sheen و الـ
Enterobacter شكلها بيكون الـ Fish Eye The dark
cholinesterase produced on EMB agar is a result of the
acid produced during lactose fermentation
precipitating the dyes in the media الشريشية
كولاي بتعمل بـ peptide bond or amide bond بين
الصبغتين و بيصير لون أخضر لإن تيلوباكتر إيروجينيز
هيكون لونها غامق و هي هترسب الصبغات في منتصف
الكلونيز البروتيز هي هتنمو على الطبق لكنها ما بتعمل
fermentation هيكون لونها إما colorless أو تاخد لون
الـ media السلمونيلا السلمونيلة برضه هتنمو على الطبق
لكنها ما بتعمل fermentation فبالتالي مش هيطلع ..
مش .. يعني هتطلع .. هتنمو على الطبق لكن هتكون
colorless الاستفيلة الكوكاس اوريوس هي gram
positive مش راح تنمو أساساً هي الإشاري شاكولاي
الـ Metallic Sheen لإن تي روباكتر هيكون لونها pink
أو dark purple السؤال هنا بيحكيلنا بالنسبة لـ
lactose fermentation البروث media broth بيكون فيها
سكر اللاكتوز for كوليفارم لو كانت عندي نامية
الكوليفارم هل هتكون كل التيوبات لللاكتوز البروث
البروث البروث البروث البروث البروث البروث البروث
البروث البروتاني إشي من خلال استخدام الدرهام
الديوب هل هتكون positive لما أبحث عن الكوليفورم؟
أكيد لأن الكوليفورم بتحمل fermentation للـ Lactose
اللي في الـ media عندي وبالتالي هتكون positive
بالنسبة للـ Biochemical tests وهي طبعا هتاخدوها
بالتفصيل في الـ Essential Microbiology الـ Indole
reaction كيف بعرف أنه positive بتكون حلقة لونها
أحمر مثل الـ Red أو الـ Voges Proskauer من خلال
تحول اللون إلى لون أحمر الـ Citrate بتحول اللون من
أخضر إلى أزرق معناته هي إنها positive زي ما قلنا
الأشريشيا كولاي positive positive negative negative
الـ Enterobacter negative negative positive positive
بالنسبة للـ Rapid Identification Kits شغلات تأكيدية
ممكن نلجأ لاستخدام الـ ABI ممكن مثلا لاستخدام
السيرولوجيا الجدول هذا قلنا المعمل اللي فات وهذا
الجدول بحتاج إلى فهم مش حفظه كيف بنتعامل مع ال
food أول ما يصلنا، أشهر هو الـ treatment الصح وإيش
الـ preparation لإله لو كان عندي عينة liquid milk
water juice لـ treatment إما بعمله mix أو ب .. أو
بستخدم الـ stomach طب لما يكون إشي liquid بدي أعمله
فقط shaking or mixing الـ preparation مباشرة، هي
يعني مافيش فيها وزنة إنما باخد باستخدام الـ pipet
بأسحب قداش بدي volume و بحطه على الـ diluent و
ببدأ أعمل serial dilution viscous lipids، lipid
بنعملها shaking و بعد هيك بأوزن و بأحط على ال
diluent بالنسبة للـ food لما يكون solid water
soluble، solid شغلة solid لكنها بتدوب في الـ water
زي مثلا الـ salt الملح مطحون وجاهز مش بحاجة أن أنا
أستخدمه لـ blender فبس علي إن أنا أعمل shaking بعد
هيك بأوزن مقدار معين و بأحطه على الـ diluent الـ
powder و الـ meat لحمة بستخدم لها الـ stomacher و
بعد هيك بأوزن و بأحطه على الـ diluent الـ cheese
الجبنة Solid Stomacher أو بلندر بأوزن و اللي وزنته
عشان بدي أتخلص من كل الفات اللي فيه بدي أدوبه
بستخدم الـ multiplying agent 2% Sodium citrate قبل
هيك بأدفيه على درجة حرارة 45 الـ spices، التوابل،
الـ shaking، و بعدين بأوزن و بحط على الـ diluent
الـ shellfish هو الـ fish product لـ stomach أو لـ
blender و بأوزن بحط على الـ diluent الـ sample may
be added into an empty stomacher bag زي فكرة
الخلاط قلنا بدي أحط بالجار تبع لـ blender أول إشي
عينتي بعدين بحط عليها الـ diluent و بعدين بشغل و
بعمل mix