بسم الله الرحمن الرحيم والصلاة والسلام على أفضل
المرسلين سيدنا محمد وعلى آله وصحبه أجمعين طلابنا
الأعزاء أرجو من الله الكريم أن تكونوا جميعا بخير
وبصحة جيدة. تكلمنا في المحاضرات السابقة عن أمور شتى
تتعلق بقضية التلقيح وعملية الحقن المجهري ومن أشهر
هذه المواضيع التي تحدثنا عنها كيف تتكون الجَمِيْطات
عند الـ male و الـ female تحت عنوان spermatogenesis
و oogenesis كيف تنتقل هذه الجَمِيْطات من مكان التصنيع
إلى مكان التخزين ثم إلى مكان التطور والنضوج لكي
يمكن أن تُستخدم ثم تحدثنا عن القالية التي يتم من
خلالها تحضير الأطباق الخاصة بالحقن المجهري
تحت عنوان XY dish preparation ثم تحدثنا عن عملية
الحقن المجهري وكيف تتم ومن خلال عملية التحدث عن
الحقن المجهري تحدثنا عن آلية التعامل مع الـ
spermatozoa من خلال مصطلح سميناه sperm
immobilization spermatozoa ثم تحدثنا عن الـ oocyte
preparation من خلال عملية الـ denudation وهي عبارة
عن التخلص من الخلايا الذائدة المحيطة بالبويضات
الناضجة التي تصلح لعملية الحقن. الآن تمت عملية
الحقن. سوف نتحدث عن عدة أمور مختلفة لها بالعلاقة
بانقسام الخلايا الملقحة أو البويضات الملقحة وكيف
تنقسم هذه البويضات وماذا تُسمى كل مرحلة من مراحل
الانقسام ثم كيف تنتقل البويضة الملقحة من مكان
التلقيح الطبيعي وهو عبارة عن الـ Fallopian tube
حتى حدوث عملية implantation في بطانة الرحمة. هذا ما
سوف نتحدث عنه في هذا الشيء من هذه المحاضرة ثم
ننتقل إلى موضوع جديد وهو كيف نحدد بعض الأمراض
الوراثية المتعلقة بالأجنة من خلال ما يُعرف اسم
Empyreobiosis أو polar body biopsy هذا ما سوف نتحدث
عنه في الـ Chapter رقم 6 After fertilization، بعد
عملية الـ fertilization وهو إدخال single sperm في
mature oocyte تبدأ عملية اندماج النواة الذكرية مع
النواة الأنثوية، مما يؤدي إلى تكوين خلية جديدة تُسمى
الزيجوت فالزيجوت هي عبارة عن أول ناتج طبيعي لعملية
الحقن المجهري. إلى العملية تكوين الزيجوت بيحدث
shifting لـ metabolic process و الـ event اللي ممكن
تحدث في الخلية والبوايضة الملقحة مما يؤدي إلى
دخولها في عدة انقسامات للحصول على الـ embryo الذي
سوف يحدث له عملية implantation في بطانة الرحم
ليكوّن a new baby خلال هذه الفترة وخلال هذه العملية
من لحظة التلقيح وتكون الـ Zygote حتى لحظة الـ
implantation يبقى الجنين أو قبل لحظة الـ
implantation بشيء بسيط يبقى الجنين والخلايا
الجنينية محاطة بغلاف واحد وهو عبارة عن الـ
Zona pellucida و لا يتحطم هذا الغلاف يعني ما بيصير
the structure أو breakdown for Zona pellucida حتى
لحظة الـ implantation بمجرد أن يصل الجنين لعدد معين
من القسمات والخلايا ويصل للمكان المعد له لكي يحدث
له عملية انغراض في بطانة الرحم تبدأ الـ
Zona pellucida في التهتك وتبدأ الـ Zona pellucida
في التكسر والتحطم لكي تسمح بوجود منفذ لهذا الجنين
لحدوث اتصال مباشر ما بينه وما بين بطانة الرحم
الموجودة في المنطقة التي يحدث لها عملية الـ
implantation إلى حد ما حوالي 6 أيام بعد ذلك
الانبريو شد ذونا باليوسيدا واتشت اليوتران لين يعني
بعد ست أيام من عملية الحقل أو بعد ست أيام بالضبط
يبدأ الانبريو بالخروج من الذونا باليوسيدا الاتفاق
بين البلاسنتل والماترة التي أدت لإنقاذ الوحوسيت
لتخزين كمية يوكساك that needed during development
therefore the eggs of mammalian are very small هذه
الفقرة بتوضع سؤال مهم جدا لو أنا قرنت البويضة
الخاصة بالفديات زي الـ human مع البويضة الخاصة بالـ
animal بالطيور مثلا في بعض الحيوانات بتبيض على
سبيل المثال فيه. فبالتالي لو أنا قرنت حجم البويضة
مع حجم البويضة الأخرى هلاجي حجم البويضة الخاصة
بليه human صغيرة جدا مقارنة مع حجم البويضة الخاصة
ببعض أنواع من الطيور أو بعض أنواع من الحيوانات
التي الطبيب فالسبب في هذا الموضوع يرجع إلى وجود
كمية كبيرة جدا من الـ yolk sac في عفوا كمية كبيرة
جدا من الـ yolk داخل الـ yolk sac تستخدمها البويضة
ذات الحجم الكبير لعملية التغذية والنمو للحصول على
جنين طبيعي وجنين كامل النمو بينما في الـ human
البويضة الملقحة تتحول إلى embryo الـ embryo ينغمس
في بطانة الرحم الخاصة بالأم مما يسمح له بتكوين
structure بنسميه placenta التي تصبح فيما بعد مصدر
للغذاء مصدر للغذاء فلا داعي ولا حاجة للبويضة
الخاصة بالـ human أن تتغذى وتتخزن تتغذى بنفسها
أو تتخزن كمية كبيرة جدا من الـ yolk في داخلها فبالتالي
الحجم يبقى صغير. إذا كبر الحجم من صغره يعتمد على هل
البويضة بعد الطلقية سوف تُغذي نفسها من نفسها أو
تعتمد على مصدر آخر. إذا تُغذي نفسها من نفسها زي
البويضات بتاعة القيور مثلا فبالتالي لازم تكون كمية
كبيرة جدا من الـ yolk مخزنة بداخل البويضة حتى تسمح
لها بعملية النمو والانقسام. Mammalian cleavage is a
prolonged process that typically takes a large
amount of time and requires to transport the early
embryo form its site of fertilization to the site
of implantation. بمعنى آخر أن عملية الـ cleavage
الخاصة بالبويضة الملقحة الخاصة بالماماليا الفديات
تأخذ فترة زمنية طويلة جدا ما بين لحظة الـ
fertilization مرورا بالانقسامات المتتالية ووصولا
إلى منطقة الـ Implantation في بطانة الرحم. هنعرف
جدّيش بتاخد فترة زمنية. the development procedure at
the rate of roughly one cleavage division per one
day. يعني عملية الانقسام في البويضة الملقحة في أول
يومين بيكون ثابت انقسام واحد كل يوم. بعد كده بعد
اليوم الأول والثاني بشكل أساسي تختلف معدلات
الانقسامات فتصبح متسارعة عشان تصل للعدد المطلوب
من الخلايا. بعد اليوم الثاني أو بعد ما تكوين two
cells خلينا نسميها بشكل أوضح وشكل أدق بيصير في
عندي نوع من أنواع التزامن في الانقسامات بمعنى آخر
أن الخلية في اليوم الأول بتاعة خليتين فبسمّي
الخليتين الـ Blastomere بعد كده الـ Blastomere
هتنقسم إلى تلات خلايا والتلات وكذا هينقسموا يعني
بيصير عندي اتنين الاتنين بيصيروا تلاتة بعدين
بيصيروا أربعة الأربعة بيصيروا ثمانية ثمانية
بيصيروا ستة عشر. لما نصل لمرحلة خلية واحدة تحتوي
بداخلها على ستة عشر خلية بنسمي الـ whole structure
Morula بنسمي الـ whole structure Morula وهذا الكلام
خدناه في المحاضرة السابقة. الخلايا الموجودة بداخل
الخلية الأم أو البويضة الأم إذا كانت تحتوي على
ثمانية لستة عشر. stage the embryo of placental
mammalian enter in the phase called compaction
يعني بمجرد ما تصل عدد الخلايا في الداخل اللي
سميناها embryonic stem cell ثمان خلايا وتبدأ تتزايد
لتصل إلى ستة عشر خلية عشان تعطيني الـ Morula بيصير هذه
المرحلة بنسميها compaction stage شو معنى
compaction stage؟ what's the meaning of
compaction stage؟ what do you know about the
compaction stage؟ الـ compaction stage ببساطة جدا
هي مرحلة يتم فيها تداخل الخلايا مع بعض على بعض
لدرجة أنك ما بتقدر تشوف حد كل خلية عن الأخرى أنت
بتلاقيهم كجملة واحدة كتلة واحدة مدمجين مع بعض ومع
بعض ما في حدود ما بين الخلايا ما في خلية تقول والله
أنا هذا الـ outer layer الخاص بها. بتلاقيهم نوع من
أنواع الاندماج. this process which occur
approximately four days after fertilization وهذه
العملية بنسميها cavitation في عملية الـ compaction
بشكل أساسي بيصير اندماج الخلايا مع بعضها البعض ما في
عندي outer layer للخلايا وحدود الخلايا بتصير عندي
junction بين بعض البعض تحت مصطلح tied adhere
through the gap and tight junction and lose their
individual identity individual line when view from
the surface. يعني الخلايا بتندمج مع بعض البعض
الخلايا تتداخل مع بعض البعض ما في outer layer أو
outline لكل خلية ما في border لكل خلية بتلاقي
الخلايا اندمجت مع بعض البعض واتصلت مع بعض البعض
طبعا اندماج الخلايا وانغماسها مع بعض البعض المرحلة
كلها بنسميها compaction as phase بينما الـ process
هذه بنسميها cavitation وبتصير في اليوم الرابع من
بعد عملية ال fertilization at this stage المقصود
فيه ال competition stage the embryo as a whole is no
plastocyst لما بعد يصير عندي أربع أيام ويصير
الاندماج المتميز بين الخلايا يعني تصير مرحلة ال
cavitation بسمي ال structure ككل بسميه blastocyst
بسميه blastocyst خلية أو صورة بتوضح الكلام هذا في
عندي هنا وهي عبارة عن بويضة لقحت أعطتني في اليوم
الأول خليتين كانت one cell سميتها as I got بعدين
اتقسمت التلت ل two cells هذا في اليوم الأول في
اليوم الثاني أدتني أربع خلايا كل خلية بتسميها plus
to minus في اليوم الثاني ونص جريبا علشان نتصل
اليوم الثالث وهي 8 من 8 ل 16 خلية في اليوم الثالث
16 خلية اللي بتسميها morula في اليوم الرابع تصير
58 خلية بتسميها plus to sixth في اليوم الخامس
بتنقسم إلى 107 خلية بنسميها blastocyst أيضًا إذا
المورولا بتظهر في اليوم الثالث من التخصيب وتحتوي
على أكثر من 8 خلايا كحد أدنى وحد أقصى 16 خلية
blastocyst بتزيد عن 16 خلية وكل هذه المراحل بتكون
مازالت محاطة بالـ zona pellucida
At the beginning of cleavage, the zona is still in
case or in covering the
cell plus الـ cell المقصود فيها الخلايا الداخلية
ال embryonic stem cell يعني ال embryonic stem cell
مازالت ضمن محفظة واحدة اللي هي ال zona pellucida
وفي الخارج يحيط بيها طبقة رقيقة من ال corona
radiata ال corona radiata تبقى كما هي حتى اليوم
الثاني بعد اليوم الثاني من عملية الإنقسامات تبدأ
بالاختفاء تدريجيًا رغم إن ال corona radiata منها
removing بالـ denudation ولكن ما بنقدر نعمل
removing completely بلقى جزء منها ما زال موجود
الـ zona pellucida remained intact. However, until the
embryo arrives to the uterus
وخذوا بالكم مهم جدا .. هنعرف كمان شوية شو هي
أهمية الـ zona pellucida ده مهم جدا الـ zona pellucida ده
تبقى عشان ما يصيرش تفتت للخلايا ويصير تفرق للخلايا
وبالتالي أفقد الجنين لأنه خلال عملية انتقال البيضة
المخصبة بحكي بشكل طبيعي من قناة فالوب إلى الرحم
بتمر بعوائق كثيرة أقلها حركة السيليا فتصور لو أن
هذه الخلايا الـ embryonic stem cell اللي مش موجود
حولها الزونا بيلوسيدا، هيصيرها تفتت وتفرق، بالتالي،
هيصير المحصلة أنها نهائية صفر مافي عند الـ embryo
completely embryo الـ embryo تبقى في جزء الأنبوبي
من اليوتران تيوب ثلاثة أيام، يعني ببدأ في منطقة
الأنبوبي الخاصة بالفلوبيان تيوب ثلاثة أيام، يعني
البويضة المخصبة تجلس في فلوبيان تيوب، وهي المرحلة
اللي هتنتقل منها، المسافة اللي هتقطعها، حوالي ثلاثة
أيام. It then crossed the isthmus portion of the
tube in the little of eight hours. يعني بويضة
خصبت في الطولة الأول الأعلى من ال fallopian tube،
هذا في الوضع الطبيعي، هتستمر وهتتدهرج لمدة زمنية
تقدر بثلاثة أيام، علشان تقطع طول ال fallopian tube
هتصل إلى منطقة المضيق وهو المنطقة التي تفصل
fallopian tube عن بداية الرحم والتي سميتها في ال
chapter الأول isthmus عشان تخترق ال isthmus وتعمل
scabbing لل isthmus أو entering لل isthmus تأخذ
فقط 8 ساعات. Under the influence of progesterone
neutral tube junction relaxation contraction
relaxation those allow the embryo to enter the
uterine cavity. تحت تأثير الـ Progesterone الذي
يُفرز بشكل مستمر تحت تأثير انقباض وارتخاء العضلات
الخاصة بالرحم والأنابيب المتعلقة بالجهاز الـ
genital الـ reproductive system يسمح بدخول ال
embryo إلى الرحم، طالما دخل الرحم، إذن هيتكون معدل
عملية ال implantation. Couples of day من ستة إلى ستة
تقريبًا days after fertilization the embryo implanted
in the mid portion of the posterior wall of the
uterus. يعني بعد حوالي ستة أيام على الأقل إلى ثلاثة
أيام على الأكثر من عملية ال fertilization المفروض
المفروض يكون الجنين قطع كل المسافة الخاصة بال
Fallopian tube وقطع الإزمس ووصل لمنطقة معينة عشان
يصيله implantation فيهبط في الرحم وفي جدار الرحم
وفي المنطقة بيسموها بالضبط middle portion of
posterior wall of the uterus. يعني لو صارت تلقيح
يوم 13 هتحسب الزوجة 13 14 15 16 17 18 19 20 في
اليوم ال 20 المفروض الجنين يكون صار له implantation
هذا الوضع الطبيعي الوضع الطبيعي علشان كده معظم
المراكز التي بتعمل حقن مجهري بتطلع الجنين في اليوم
بعد اليوم الثالث يا إما الرابع، يا إما الخامس، يا
إما السادس علشان يحاكي الوضع الطبيعي during this
time. خلال هذه الأيام، الـ6 إلى الـ8 أيام بعد عملية
ال fertilization الـ zona pellucida بيصير فيها
تغير في تركيبها علشان تلائم المرحلة الجديدة تغير
في تركيبها تبدأ يصير فيها تغير علشان تبدأ يصيلها
عملية hatching. شو يعني hatching؟ يعني opening طبعا
أتروا contribution from the blastomere and the
maternal reproductive tissue and this change
facilitated the transport and differentiation of
the embryo. هذه مهمة جدا التغييرات التي بتصير في
الزونا بيلوسيدا لأن المفروض الزونا بيلوسيدا ما
تبقى rigid ما تبقى hard لفترة زمنية طويلة مهمة في
مرحلة الانتقال ولكن بمجرد حدوث ووصول إلى مرحلة ال
implantation لازم يصير فيها changing أو يصير فيها
thinning علشان تبدأ وتسمح لل embryo بالخروج طبعا
بعد ما يصل ال embryo لبطانة الرحم أو الرحم أو
تجويف الرحم تبدأ ال zona pellucida بتعمل hatching
أو تعمل removing أو تعمل opening تمهيد لل
implantation وعملية وجود ثقوب وفتح ثقوب في zona
pellucida بنسمي هذه العملية hatching أو بنسميها
blastocyst hatching. Hatching يعني poor formation
متى بيبدأ الهاتشينج؟ بعد ثمانية أيام من عملية
التلقيح وذلك بمجرد وصول الويضة الملقحة التي صارت
embryo إلى تجويف الرحم. A small region of the
navel used a huge one directly over the inner cell
mass in the mammalian for example, the sole and
the blastocyst embedded from the hole. يعني بمعنى آخر
إن الـ zona pellucida ده كمية كبيرة ومناطق معينة من
الـ zona pellucida ده تتحطم تتفتح هذا يسمح بيصيرها
dissolving. بمعنى آخر يسمح بخروج الـ blastocyst و
يحدث لها direct contact مع البطانة الرحم مما يمهد
لعملية ال implantation. يعني كأنه بيصير hole أو
pores في الرحم في الرحم بيصير عندي حاجة بتسميها The
trophoectoderm projections then contact with the
endometrium epithelium cell as the process of
implantation. الـ trophoectoderm هي عبارة عن نوع من
أنواع الخلايا الموجودة في الـ embryo، إذا بتذكروا
في المحاضرة السابقة الـ trophoectoderm و endoderm
و mesoderm. هذا الـ trophoectoderm هي التي تبدأ كبروز
تتحد مع بطانة الرحم، علشان تبدأ تمهيد
للـ implantation. في enzymatic activity around the
enter trophoplast soon beginning to dissolve the
rest of the zona pellucida. بعد ما تبدأ ال
projection تظهر وتصير contact مع ال endometrium
of the epithelium cell. في بعض التغيرات الإنزيمية
والنشاطات الإنزيمية التي تبدأ في الحدوث مما يمهد
إلى اختفاء ما تبقى من ال zona pellucida وتحللها
هذا بالنسبة إلى عملية الحطن. كيف تتم عملية انتقال
البويضة بعد عملية التلقيح الطبيعي في الصورة
التالية بتوضح عند البويضة صار لها عملية
implantation. اعفوا صار لها عملية ovulation ثم في
النهاية implantation. ال ovulation للبويضة البويضة
صار لها بويضة طبعا ناضجة في المبيض صار لها ovulation
في صار contact بين ال male وال female صار عند ال
fertilization الفيرتاليزيشن صار عندي 2 nuclei فداني
الزيجوت تطورت من مادة إلى تكوين 1 cell بعدين 2
cell بعدين 4 cell بعدين 8 cell بعدين morula هي من
أكثر من 8 خلايا إلى 16 خلية بعدين ال blastocyst
بعدين بعد 8 أيام صار عملية ال implantation في جدار
الرحم في جدار الرحم هذه عبارة عن الصور التي تحدد أو
الصورة التي تحدد مراحل عملية انتقال البويضة بعد
التخصيب من ال fallopian tube إلى بطانة الرحم.
طبعا الصورة السفلية بتحدد كيف بيصير عندي عملية
removing للـ half of number of chromosome من أجل
ظهور الـ first و second polar body لأنه قلنا أن أول
علامة من عمليات نجاح الحقن المجهري أو عمليات
التلقيح بشكل عام هي ظهور الـ second polar body طيب
الـ Zona pellucida حكينا عنها بكمية كبيرة جدا ما هي
أهميتها؟ الـ Zona pellucida لها أهمية كبيرة جدا شو
هي أهميتها؟ لماذا تستخدم؟ وكيف تستخدم؟ الـ
Zona pellucida هي عبارة عن طبقة رقيقة في البداية
تحيط بالبويضة لتحمل البويضة وتسهل عملية ال
connection ما بين البويضة والوسط الخارجي أو المحيط
الخارجي أو البيئة الخارجية كما أسلفنا سابقًا هل
لها عوامل أخرى وظائف أخرى؟ أكيد لها وظائف أخرى
وظائف شتى الـ Zona pellucida بنرمز إليها بالـ ZP
وتتكون في الغالب من sulphated glycoprotein يعني
بتتكون من protein plus carbohydrate الـ
Zona pellucida بتلعب دور كبير جدا في عملية ال
protection بتلعب دور كبير جدا في عملية الـ embryo
development بتلعب دور كبير جدا في عملية step by
step أو point by point أول حاجة الـ function
الأساسية للـ Zona pellucida بعد الـ fertilization
إنها بتعمل protection للـ embryo وبتعمل إليه
maintenance of its integrity مهم جدا لأن الـ
Zona pellucida إنها بتحمل الجنين بتحمل خلايا
الجنينية ما بتخلي الخلايا الجنينية متفرقة مبعثرة
فبالتالي تبقى الـ Zona pellucida أشهر وظيفة لها بعد ال
fertilization هي حماية الجنين والمحافظة على
التراكيب الداخلية الخاصة فيه الـ Zona pellucida هي التي
تسمح بعملية الـ maturation للـ oocyte في البداية
الـ Zona pellucida تعتبر عامل مهم جدا حيث تسمح لتمام
عملية الـ Fertilization من خلال وجود Receptor خاصة
بالـ spermatozoa هذه الـ Receptor موجودة في
الـ Zona pellucida ده الـ three لأن قلنا الـ Zona pellucida ده
أكثر من طبقة الـ Zona pellucida ده هي التي تسمح
بعملية الـ Acrosome reaction يعني عملية ال
fertilization مش sperm ارتبط ببويضة فقط لا sperm
وصلت للبويضة ارتبط بالـ Receptor نشطت البويضة الـ
Acrosome reaction علشان يساعد على الاختراق فمهم جدا
after fertilization the modified Zona pellucida
prevent any additional sperm from the arrival to
the zygote or another penetration يعني شفنا
وظيفتها قبل الـ fertilization وشفنا وظيفتها بعد الـ
fertilization قبل الـ fertilization حماية البويضة
تطوير البويضة تسهيل عملية الـ fertilization كمان
تنشيط الـ Acrosome reaction هذا كلها before fertilization
after fertilization تعمل على منع الـ polyspermia
injection أو fertilize the oocyte by two sperms من
خلال تغيير الـ Receptor أيضًا بتحافظ على الجنين زي
ما قلنا و هي الـ main function of Zona pellucida
خلال المراحل المتقدمة أو المراحل المبكرة من مراحل
انقسام الجنين الـ Zona pellucida بتعمل كـ pores أو كشرط
مرور بالضبط تتحكم بما يدخل إلى الخلية وتمنع المواد
الأخرى من الدخول إلى الخلية وذلك بناء على احتياج
الخلية بالضبط تعمل زي إشارة المرور تسمح بدخول
مواد وتمنع دخول مواد أخرى بناء على احتياج الجنين
طبعا بسبب عدم وجود أو فقدان الـ Zona pellucida
الحالية بتسميها histocompatibility وهي نوع من
أنواع الـ human leukocyte antigen الـ
Zona pellucida serve as immunological pairs between
mother and the antigenetical different embryo بسبب
فقدان الـ Zona pellucida الـ human leukocyte
antigen فبتعمل كحاجز مناعي يحمل جنين ويحمل أم
Zona pellucida بتعمل على تسهيل الـ differentiation
للـ trophoplastic cell it is normally prevent
premature implantation of the cleavage embryo into
the wall of the uterine tube طبعا الـ
Zona pellucida وجودها ووجودها بشكل hard إلى حد ما
في أول أربعة أيام إلى ثلاثة أيام من الـ fertilization
تمنع تحافظ على الجنين وتمنع حدوث implantation مبكر
في منطقة غير معدة زي حدوث الـ implantation في منطقة
الـ fallopian tube مما يؤدي إلى حدوث ectopic
pregnancy يعني أحد أسباب الـ ectopic pregnancy
الخلل في الـ Zona pellucida طيب وصلنا لحرفنا أهمية
الـ Zona pellucida الـ function الخاصة فيها بعد كده
كيف يمكن أن نعمل على ترقيق الـ Zona pellucida بمعنى
آخر في الحقن المجهري جاب العملية الـ embryo
transfer أو إرجاع الـ embryo لازم أعمل حاجة بنسميها
thinning يعني بمعنى آخر ترفيه أو ترقيق الـ
Zona pellucida ليه بنرقيق الـ Zona pellucida؟ علشان
أسمح للـ Zona pellucida إنها تتلاشى ببساطة جدا
وبسهولة جدا دون تأخير وتساهم في عملية الـ
Implantation حاجة بنسميها Assisted Hatching in Exit
يا إما بعمل Thinning، ترقيق، يا إما بعمل Pouring،
هنشوف كيف بعمل Pouring الـ Implantation خلال الحقن
المجهري يحتاج إلى عملية بنسميها Hatching technique وهي
عمل ثقوب في جدار الـ Zona pellucida وهذا الثقوب ما
بتكون غائرة أو بعض الأحيان بتسميها filling of
Zona pellucida failure of the embryo to escape the
Zona pellucida is believed to be related to low
implantation rate for poor prognosis patients and
the main goal of assisted hatching is overcome this
obstacle يعني بيقول لي ببساطة جدا أن في حالات يكون
الإجراء فشل في الحصول على جنين صحيح أو جنين سليم
بعد عملية الـ implantation بعد عملية ال
fertilization وبعد عملية الـ embryo transfer بكون
سببها بشكل أساسي أن Zona pellucida فشلت في التكسّر
أو Zona pellucida ما زالت قوية صلبة منعت الجنين من
الخروج فهذا بنسميها embryo to escape prevent the
embryo or failure the embryo to escape from
Zona pellucida بقى الـ embryo محبوس داخل Zona pellucida
Zona pellucida بقيت كما هي قوية لا تسمح بخروج الـ
Embryo فبالتالي فشلت عملية الحقن المجهري في الوصول
إلى الـ True Embryo داخل الرحم فبالتالي ممكن أن
أتغلب على هذا الموضوع من خلال عملية قوية جدا
بنسميها Assisted Hatching حاجة برمز لها بالرمز AH
طبعا هذه العملية بتحدث في الـ Assisted Reproductive
Technology عملية مهمة جدا بتصير من خلالها عمل pores
في الـ Zona pellucida إما هذه الـ pores بتكون
mechanical pore أو chemical pore يعني ممكن أستخدم
مواد كيميائية وأنيمات أو ممكن أستخدم طرق
ميكانيكية باستخدام الـ injection needle و هنشوفها
كمان شوية كيف أنا ممكن أستخدم الـ injection needle
إذا الـ Assisted Hatching في الإجزي بيصير بعد ال
fertilization بعد اليوم الخامس من الـ fertilization
يعني لو صار الـ fertilization والـ injection في
اليوم الأول يعني المفروض تصير في اليوم الخامس وهو
يوم الرابع مثلا إذا كان يوم السبت هتصير يوم
الرابع وظيفتها أن تعمل pores في Zona pellucida
علشان تسمح للجنين بالخروج وأخذ دقيقته ونقله إلى
الرحم هل كل الحالات أعملها Assisted Hatching ولا
حالات معينة؟ في حالات معينة مهم جدا بل لازب يجب
بشكل واجب أن يعمل Assisted Hatching قبل ما يعمل
embryo transfer من أشهر هذه الحالات السيدات اللي
عندهم recurrent failure of embryo implantation
after embryo transfer يعني عند سيدة خضعت للإجزي
ثلاث أربع أو خمس مرات كل مرة برجع جنين بيصير عنده
فشل في الـ implantation فبالتالي النتيجة negative
رجعت الجنين لدورة ثانية، فشل في الـ Implantation
النتيجة نيجاتيف وهي نتيجة البيتا الـ hCG فهذا معناه
أن الـ Zona pellucida ما صار فيها dissolving،
partial dissolving فبالتالي ما صار Implantation
فلازم أعمل Assisted Hatching جاب العملية للـ transfer
الـ embryo exhibiting thickened Zona pellucida و لا
بحكم لجد Zona pellucida very thick مقاومة لعملية ال
penetration فلازم أعمل Hatching السيدات اللي عندهم
advanced age أكثر من 37 سنة السيدات اللي عندهم
مستوى الـ FSH عالي جدا السيدات .. الـ cycle اللي
بدأت من الـ cryopreservation شو يعني cryopreservation؟
أن السيدة خضعت لـ protocol
stimulation أخرجت 35 بويضة حُقّنت 10 بويضات والباقي
عملتلهم preservation جمّعتهم الدورة التانية مش
هتطبطب تخضع لعملية ovulation أو مش هتخضع لعملية
stimulation فبضطر باخد من البويضات اللي مخزنة فهذه
البويضات طالما مخزنة إذا صار في تغير في تركيب
الـ zona pellucida في الـ membrane فبعد عملية الحقل
لازم أعمل assist hatching علشان أسمح للـ embryo
بالخروج بكل بساطة كيف تتم عملية zona pellucida
assist hatching أو zona pellucida thinning؟ ترفيه
الـ zona pellucida لما اقول thinning بيكون مش كاملة مش
completely لأ partially completely لأ partially
because thinning partially أو عمل عدد معين من ال
pores أو الـ holes zona pellucida removal total
zona pellucida removal before embryo transfer has
been expected to bring out closer contact and
communication of the trophoectoderm of the
blastocyst with the endometrium thereby improving
implantation وهذا الهدف الأساسي منها إنه يصير في
عندي direct contact ما بين الخلايا الخاصة بالـ
embryonic stem cell أو الـ embryonic cell و ال
endometrium of female الموجودة في بطانة الرحم مما
يحسن عملية الـ implantation الـ zona pellucida can be
totally removed by chemical or enzymatic method or
by using laser يعني أنا ممكن أعمل pores أو holes أو
completely removing أو partially removing الأربعة
بناء على حالة الـ zona pellucida من خلال طريقة
ميكانيكية طريقة كيميائية أو استخدام إنزيمات أو
باستخدام الـ laser طلاقات الـ laser هناخد أكثر من
طريقة جزء هناخده حاليًا و الجزء الثاني هناخده لما
نقول polar body biopsy أنواع من أنواع التخفيف أول
طريقة هي طريقة الـ traditional method وهي عمل
pores و holes في الـ zona pellucida من خلال الـ
mechanical zona pellucida dissection أو الـ
traditional method ببساطة جدا بجيب الطبق اللي فيه
الجنين بعد عملية تطوره وانقسامه بوضعه على stage
درجة حرارته 37 في منطقة معقمة بنسبة 100% تحت ال
inverted microscope بحمل الجنين وبثبته باستخدام ال
holder أو الـ sucker أو الـ suction holder أو ال
holding tube الموجودة دائما على جهة اليسار اللي
أنا كنت بثبت فيها البويضة أثناء عملية الـ injection
فكده أنا ثبتت الجنين وبجيب الـ injection needle
اللي كنت أحطّ فيها الـ sperm بعمل اختراق بعمل اختراق
للجنين في الغلاف الخارجي ببدأ من الساعة الواحدة و
بصل للساعة 11 الساعة الواحدة للساعة 11 شو يعني
الساعة الواحدة للساعة 11؟ لإن الجنين عبارة عن دائرة
بقسمها ساعات 12 6 3 9 أنا بدخلت بال
injection needle injection needle من الساعة الواحدة هطلع هتخرج
الـ needle من الساعة 11 بعد كده أعمل releasing لل
embryo بإني أخلي الـ holder tube الضغط فيها غير كافي
إنه يبدأ يعمل catching للـ embryo فالـ embryo
بيصير معلق في الـ injection needle باجي بعمل عملية
احتكاك بالـ needle في طرف الـ holder tube علشان أعمل
تآكل للـ zona pellucida فبهذا الشكل بكون عملت تآكل
لجزء من الـ zona pellucida وعملت removing أو
dissolving هدف نسميها طريقة التآكل أو الطريقة
الميكانيكية طريقة الاحتكاك التي تؤدي لتأكل الزونا
pellucida وهي طريقة ميكانيكية خلّينا نشوف بالفيديو
كيف تصير هذه الطريقة الميكانيكية اللي من خلالها
أنا بتخلص من جزء من الزونا pellucida وهي ال
traditional method طبعًا
هي عند البويضة عفوًا للجنين الجنين هذا عند الـ holder
أو الـ suction tube وهذه الـ injection needle أو في
بعض الأحيان بيسموها needle الخاصة بعملية
zona pellucida dissolving باجي بعمل fixation و بعمل
holding للـ embryo باستخدام الـ holder tube هي
الساعة 12 هي الساعة 6 هي الساعة 3 هي الساعة 9 باجي
بأخترق من الساعة 1 في هذا الاتجاه و بطلع بالـ needle
من الساعة 11 إن ما أضرب حوافّها في منطقة الزونا
pellucida الفاتحة دخل
بالـ needle المفروض يخرج من الطرف الآخر خرج
من الطرف الآخر ما بين الساعة الواحدة و 12 و خرج
ما بين الساعة 11 و 12 بعدين ببدأ يعمل
احتكاك بجزء السفلي للـ holder tube كده بيكون بدأ الجنين
يخرج زي ما احنا شايفين في هذه المنطقة هذه معناه
صار في عدة opening للجنين أو الخلايا الـ blastomeres
أو الـ blastocyst بدأت تنفذ للخارج
هذه الفكرة بتسميها الـ traditional method أو
mechanical method for assist hatching فقط لغة هذا
كثير الناس بتسويها و مازالت بتحقق نجاحات قوية طيب
طب أنا عملت hatching وعملت pores أو holes في
الـ zona pellucida هل ممكن أعملها قبل عملية ال
implantation اه ممكن أعملها طب شو هدفها؟ هدفها إن
أحصل على مادة وراثية خاصة بالجنين أو أحصل على مادة
وراثية خاصة بالأم من أجل الفحوصات الوراثية التي
تسمى pre-implantation genetic testing يعني الفحص
الجنيني أو الفحص الجيني قبل عملية الـ implantation
أو الانغراس أو الزراعة أو إعادة الـ embryo هذا
مصطلح بنسميه polar body biopsy ممكن آخذ polar body
biopsy يعني آخذ جزء من الـ polar body و أعمله
genetic testing فلازم عشان أصل للـ polar body أعمل
opening في الـ zona pellucida لأن أحنا عارفين أن
البويضة الملقحة فيها two polar body بتكون ما بين
البويضة و ما بين الـ zona pellucida فلازم أخترق ال
zona pellucida عشان أعمل suction للـ polar body تحت
مصطلح polar body biopsy الـ polar body biopsy كان
أول ما تم تكوينه و إنجازه في عام 1990 ال
polar body بيحتوي على المادة الوراثية الخاصة بالأم
polar body consists of genetic material related to
mother or maternal only خدوا بالكم من القصة يعني
أي مرض وراثي متعلق بالأم بأفحصه من خلال الـ polar
body أي مرض وراثي متعلق بالجنين بأفحصه من خلال ال
embryonic cell
The analysis polar body can be used to determine
chromosomal aneuploidy related to maternal meiosis
and maternal divide-unbalanced translocation
chromosome. To detect single gene defect related
to who related to the mother related to the
maternal allowing for day 3 embryo transfer ممكن
أنا أستخدم الـ polar body علشان أعمل HLA typing وهي
human leukocyte antigen typing وهو التوافق وممكن
أفحص من خلالها الـ X-linked disorder خاصة لما نقول X
linked disorder مفهوم أن معظم الأمراض الوراثية
المرتبطة بالـ X linked سواء كانت X-linked dominant أو X
linked recessive وعارفينها أن مصدر الخلل بيكون الأم
في هذه الحالة إيه الـ polar body؟ هي الـ GVBD طبعًا
هذه الـ spindle الـ simply بعدين صار عندي هجرة
جزء من الخلايا أو عفوًا جزء من الكروموسومات إلى
طرف الخلية والجزء الآخر تبقى توني الـ first
polar body بعد الـ fertilization أي النواة الذكرية
النواة الأنثوية اندمجت صار الـ fertilization خرج ال
second polar body فأنا ممكن أسحب هذا الـ polar body
و ممكن أسحب اثنين مع بعض هذا له وظيفة و هذا له
وظيفة هدف و أهداف و هدف طيب technical aspect of
polar body biopsy عرفنا أن الـ polar body مهم جدا
في تشخيص بعض الأمراض الوراثية الخاصة بالأم بعض
الأمراض المتعلقة بالـ abnormal chromosome
structural or number فبالتالي لازم أعمل opening في
الـ zona pellucida علشان أصل للـ polar body و أعمله
suction مهم جدا الـ time The most relevant part of
polar body biopsy are timing of biopsy, the
opening of zona pellucida, and the removing of
polar body يعني ثلاث مراحل متى أعمل polar body
biopsy و لماذا؟ كيف يمكن فتح الـ zona pellucida و
أعمل opening فيها؟ و كيف يتم إزالة الـ polar body؟
هذه الثلاث نقاط الأساسية والمهمة الـ timing and
oocyte representing a first polar body is
usually considered to be metaphase II يعني أي
بويضة يظهر فيها الـ First Polar Body هي بويضة ناضجة
وقفت في الـ Metaphase 2 يعني الـ Metaphase الخاص
بـ الأقسام الميوز الثاني وتكون صالحة لعملية الحقن
فبالتالي ممكن أحصل على الـ Polar Body منها الـ
Zona pellucida ممكن أعملها Opening من خلال
Mechanical زي ما شوفنا قبل شوية الفيديو أو
Chemical باستخدام انزيم معين هتتكلم عنه وLaser
Hatching Opening إنه أنا أستخدم الـ Laser طلقات
الـ Laser الـ chemical الـ mechanical أتكلمنا عنه
الـ chemical أنه أنا بستخدم solution بيسموه acidic
Tyrode's solution وهي أول طريقة تم فيها استخدام مادة
كيميائية من أجل إزالة جزء من الـ zona pellucida
وعمل zona pellucida opening هذي استخدموها بعد الـ
chemical الـ acidic Tyrode's كان بي applied at the
embryo stage Applied at the embryo stage, there was
an inhibitory effect in the embryonic development
when oocytes were exposed to the ascetic Tyrode's
يعني ال Tyrode's أو ال ascetic Tyrode's okay أنا ممكن
أستخدمه لعمل zona pellucida hatching ولكن ال side
effect ايه له أو ال disadvantage انه ممكن يعمل
inhibition لل embryo development وانا رأسمالي في
هذه الحتة ال embryo مش منطق اعمله inhibition لأنه
ممكن يعملي abnormality في الـ embryo development،
abnormality في الـ embryo development و أخسر
الجنين Therefore, since both oocytes and polar body
are sensitive to the effect of this acid, zona
peellucida draining by acidic Tyrode's solution is unsuitable for
polar body biopsy عشان كده أنا مهمنيش أعمل أو مش
لازم أعمل polar body biopsy أو zona pellucida
opening باستخدام ال chemical material اسمها Tyrode's
acid أو Tyrode's solution اللي هنا بتأثر شكلا سلبيا
بشكل سلبي على ال embryo وعلى ال oocyte وعلى ال
polar body ال laser hatching وهي الطريقة التالية
اللتي تستخدم ببساطة جدا ان انا في عندي مطلق لل
laser هنشوفها في الفيديو كمان شوية بيجي بيعمل
طلقات لل laser في depth معين ب thickness معين بعدد
معين كأنه بيعمل thinning وتقشير للـ zona pellucida
ببساطة جدا طبعا ال laser assisted polar body biopsy
is the best method when the oocyte is fixed with
the holder capillary يعني بداية زي ما شوفنا في
الفيديو بعمل laser hatching إما بعملها للإمبريو أو
بعملها للبويضة وطالما أنا بتعمل polar body biopsy
إذا بعملها للبويضة الغير ملقحة أو الملقحة بناء على
أنا شو ايه بتشتغل والأفضل أعملها للملقحة بعد
تكوين وظهور ال tube polar body ال first وال second
بعمل fixation ل ... أو بعمل حاجة بنسميها fixation ل
... أو catching ل ال oocyte باستخدام ال holder tube
بعدين باجي بشعاع ال laser بحدد عند الساعة 12 لساعة
3 مناطق الطلاقات اللي هيطلق عليها ال laser ب depth
معين كأنه بعملي تقشير للـ zona pellucida هنشوفها
بالفيديو ال opening تقريبا بتكون ال size تبعها من
15 إلى 25 ميكرو متر وبتكون ما بين الساعة الثانية
والساعة الثالثة الساعة الثانية والساعة الثالثة
طبعا بيصير عندي thinning لل zona pellucida and by
pushing the biopsy capillary into the perivitelline space
both polar bodies can be removed together يعني بمعنى
آخر بعد أن أنا معملت holding و fixation ل ال .. ال
oocyte باستخدام ال .. ال holder tube و أعرضت طلقات
ال laser للمنطقة اتنين و تلاتة فصار في عندي فتحة
في المنطقة ما بين الساعة اتنين و تلاتة باجي ال
aspiration tube بدخل من خلال الفتحة و بعمل suction
لل polar body ممكن أعمل لل polar body الأول ممكن
أعمل لل polar body التاني كل واحد على حد أو ممكن
أعملهم مع بعض طبعا أعمل .. بقول في trick فني انه
بقول لي ببساطة وانت داخل ال aspiration tube عملت
catching لل first polar body حاول ارجع جدّام شوية وبعدين
بعدين اعمل aspiration لأن عملية التقديم بتحرك ال
first polar body لان عارفين احنا ال first polar
body بيكون في الأول يلي من جهة اليسار ال second
polar body يعني انت كأنك بتطلع في الأول ال second
polar body بعدين بتطلع ال first polar body لما تعمل
catching للـ second polar body اعمل عملية
إدخال ل ال aspiration tube بزيادة شوية عشان يتحرك
ال first polar body من مكانه ويصير سهل الحركة من
أجل تثير عملية ال suction الخاصة فيه The procedure
is accurate, reproducible and safe and it also
reduces the number of cells which cannot be
diagnosed as a result of a technical problem
during biopsy procedure يعني مهم جدا بيقولك هذا
الطريقة طريقة ال laser hatching طريقة سهلة آمنة
مضمونة إلى حد ما تقلل عدد الخلايا التي تخرج من ال
embryo أو البويضة خلايا ال Polar Body Biopsy والتي
قد لا تساهم في عملية التشخيص الجيني طبعا هذه
الفكرة ببساطة هذه البويضة عند ال first polar body
موجود في ال aspiration needle وعند ال second
polar body وهذا ال first polar body لأن دائما هذه
البويضة يكون ال first polar body عند الساعة 12
for example وال second polar body على يمينه دائما
بيكون على يمينه فبالتالي لما انت تعمل دخول بال
aspiration needle أو aspiration pipet هتسحب في
البداية ال first polar body .. ال second polar
body ولكن في البداية هيكون ال second polar body هنا
هتدخل بال aspiration tube شوية فبالتالي بتكون حركة
ال polar body هذا عن مكانه فبتسحب ال second polar
body بتدخله داخل ال aspiration tube وبعدين بتسحب
ال second polar body كما هو ال first وال second
بيكون سحتهم مع بعض خليني أشوف الفيديو اللي بتكلم
عن هذه العملية وبعدين نرجع للموضوع مرة أخرى
طبعا هنا هيتكلم عن ال assist hatching باستخدام ال
laser طبعا يحدد المناطق هيما بين الساعة 2 والساعة
3 هيعمل اطلاق لشعاع ال laser في المناطق هذه
هو عنده زي حاجة تشبه القناص إلى حد ما زي شريط
القناص بتغطي في هذه المنطقة تشوف حدد ال depth لوين
نهايته هذه حدد وبعمل clicking على الذر كأنه بطلق
لل laser هنا بيكون حدد المكان مجرد ما ضغط على الذر
بيصير اطلاق لشعاع ال laser بيكون معايره ل depth
معين بقوة معينة هذي ال Embryonic stem cell في
الغالب
شوفش هنا كتب start firing لما ضغط على الذر هذا
الذر ده اسمها start firing يعني بداية إطلاق ال
laser فبطلقها ب depth معين في مكان معين بناء على
المنطقة اللي حدث أيضا هنا بيقول يا كام holes بده
بده ال width بده ال size ده ال hole و كام hole بده
ستة سبعة تمانية بناء على حجم الخلية اللي بده
يسحبها طبعا هنا بده يسحب ال embryo cells احنا
بنحكي على ال biopsy بنفس الطريقة ولكن هنا بده يسحب
ال embryo cells فبالتالي بيكون أعمق علشان يصل ال
embryo بشكل أسلوب
هكذا بيكون عمل assist hatching باستخدام ال laser
أخرج embryonic stem cell واحدة طبعا ال polar body
مهم جدا مهم جدا ال polar body علشان يكشف على
الأمراض الوراثية المتعلقة بال female بشكل أساسي
هذا بيقلل كمية ال contamination التي يمكن أن تحدث
فبالتالي من خلال تقليل عدد الخلايا التي يمكن أن
تخرج مع ال polar body مع ال polar body هذا شكل أخر
من الأشكال الخاصة فيه طبعا هذه بدخل ب aspiration
needle سحب أو ثبت ال first polar body بعدين
بيسحبوا بهذا الشكل سحب ال second polar body بعدين
سحب ال first polar body طلع منهم وأضافهم في منطقة
خالية كدا سنكتفي بهذا القدر في هذه المحاضرة على
أمل أن نلتقي في محاضرة قادمة إن شاء الله