Datasets:

AbdulkaderSaoud

/

scifact-tr

like 2

4416964

Tanımlanmış faktörlerle somatik hücrelerden yeniden programlanan uyarılmış pluripotent kök hücreler (iPSC'ler), otolog hücrelerin yenilenebilir kaynağı olarak rejeneratif tıp için büyük umut vaat ediyor. Genel olarak bu otolog hücrelerin, iPSC'lerin türetildiği alıcı tarafından immün tolere edilmesi gerektiği varsayılırken, bunların immünojenisiteleri güçlü bir şekilde incelenmemiştir. Burada, kendilenmiş C57BL/6 (B6) farelerinden türetilen embriyonik kök hücrelerin (ESC'ler), belirgin bir bağışıklık reddi olmadan B6 farelerinde etkili bir şekilde teratom oluşturabildiğini, 129/SvJ farelerinden elde edilen allojenik ESC'lerin ise B6 farelerinde teratom oluşturmada başarısız olduğunu gösterdik. alıcılar tarafından hızlı bir şekilde reddedilmesi nedeniyle. B6 fare embriyonik fibroblastları (MEF'ler), retroviral yaklaşımla (ViPSC'ler) veya genomik entegrasyona neden olmayan yeni bir epizomal yaklaşımla (EiPSC'ler) iPSC'lere yeniden programlandı. B6 ESC'lerin aksine, B6 ViPSC'lerin oluşturduğu teratomlar çoğunlukla B6 alıcıları tarafından bağışıklık reddiyle karşılaşıyordu. Ek olarak, B6 EiPSC'ler tarafından oluşturulan teratomların çoğunluğu, T hücresi infiltrasyonu olan B6 farelerinde immünojenikti ve teratomların küçük bir kısmında belirgin doku hasarı ve gerileme gözlendi. B6 ESC'ler ve EiPSC'ler tarafından oluşturulan teratomların global gen ekspresyon analizi, EiPSC'lerden türetilen teratomlarda sıklıkla aşırı eksprese edilen bir dizi gen ortaya çıkardı ve bu tür birkaç gen ürününün, B6 farelerinde B6 EiPSC'den türetilmiş hücrelerin immünojenitesine doğrudan katkıda bulunduğu gösterildi. Bu bulgular, ESC türevlerinin aksine, iPSC'lerden farklılaşan bazı hücrelerdeki anormal gen ekspresyonunun, sinjeneik alıcılarda T hücresine bağımlı bağışıklık tepkisini indükleyebileceğini göstermektedir. Bu nedenle, hastaya özel iPSC'lerden türetilen terapötik açıdan değerli hücrelerin immünojenitesi, bu otolog hücrelerin hastalara herhangi bir klinik uygulamasından önce değerlendirilmelidir.

4417177

Embriyodan türetilmiş kök hücrelerde olduğu gibi, yeniden programlanmış insan kaynaklı pluripotent kök hücrelerin uygulaması, soy spesifikasyonu anlayışımızla sınırlıdır. Burada pluripotens oluşturmadan doğrudan insan dermal fibroblastlarından hematopoietik kaderin progenitörlerini ve olgun hücrelerini üretme yeteneğini gösteriyoruz. OCT4'ün (POU5F1 olarak da adlandırılır) ektopik ekspresyonu, spesifik sitokin tedavisi ile birlikte aktive edilen hematopoietik transkripsiyon faktörlerinin pan-lökosit işaretleyicisi CD45'i eksprese eden hücrelerin oluşmasına izin verdi. Bu eşsiz fibroblast türevi hücreler granülositik, monositik, megakaryositik ve eritroid soylara yol açtı ve in vivo aşılama kapasitesi gösterdi. Yetişkin hematopoietik programlarının, kan kaderi oluşturmak için pluripotent durumu atlamakla tutarlı olarak etkinleştirildiğini not ediyoruz: bu, embriyonik programların etkinleştirildiği pluripotent kök hücreleri içeren hematopoezden farklıdır. Bu bulgular, insan fibroblastlarından çoklu potansiyelin restorasyonunu göstermektedir ve insan pluripotent kök hücrelerinin kullanımıyla ilişkili komplikasyonları önleyen otolog hücre değiştirme tedavileri için hücresel yeniden programlamaya alternatif bir yaklaşım önermektedir.

4417558

Hücre yüzeyinde mevcut olan öğretici ipuçlarının, aktin hücre iskeleti üzerindeki kesin etkilerinin nasıl olduğu tam olarak anlaşılamamıştır. Semaforinler bu öğretici ipuçlarının en büyük ailelerinden biridir ve hücre hareketi, navigasyon, anjiyogenez, immünoloji ve kanser üzerindeki etkileri açısından geniş çapta araştırılmaktadır. Semaforinler/kollapsinler, kısmen nöronal süreçlerde aktin hücre iskeleti dinamiklerini büyük ölçüde değiştirme yetenekleri temelinde karakterize edildi, ancak semaforin reseptörlerinin ve bunların sinyal yollarının tanımlanmasındaki kayda değer ilerlemeye rağmen, onları hücre iskeleti elemanlarının hassas kontrolüne bağlayan moleküller hala varlığını sürdürüyor. bilinmiyor. Son zamanlarda, Mical enzim ailesinin son derece sıra dışı proteinlerinin, büyük hücre yüzeyi semaforin reseptörleri olan pleksinlerin sitoplazmik kısmı ile ilişkili olduğu ve akson rehberliğine, sinaptogeneze, dendritik budamaya ve diğer hücre morfolojik değişikliklerine aracılık ettiği bulunmuştur. Mikal enzimler indirgeme-oksidasyon (redoks) enzimatik reaksiyonları gerçekleştirir ve ayrıca hücre morfolojisini düzenleyen proteinlerde bulunan alanları içerir. Ancak Mical'in veya onun redoks aktivitesinin morfolojik değişikliklere aracılık etmedeki rolü hakkında hiçbir şey bilinmemektedir. Burada Mical'in semaforinleri ve bunların pleksin reseptörlerini doğrudan aktin filamenti (F-aktin) dinamiklerinin hassas kontrolüne bağladığını rapor ediyoruz. Mical'in in vivo semaforin pleksin aracılı F-aktin yeniden düzenlenmesi için hem gerekli hem de yeterli olduğunu bulduk. Benzer şekilde Mical proteinini de saflaştırdık ve onun doğrudan F-aktin'e bağlandığını ve hem bireysel hem de demetlenmiş aktin filamentlerini parçaladığını bulduk. Ayrıca Mical'in redoks aktivitesini in vivo ve in vitro F-aktin dinamiklerini değiştirmek için kullandığını bulduk; bu, aktin hücre iskeleti düzenlemesinde spesifik redoks sinyalleme olayları için daha önce bilinmeyen bir role işaret ediyor. Bu nedenle Mical, semaforinlere yanıt olarak uzay-zamansal olarak aktin yeniden düzenlenmesinin (akson navigasyonu da dahil olmak üzere hücre morfolojik değişikliklerinin ayırt edici özelliği) tam olarak elde edilebildiği moleküler bir kanal sağlayan yeni bir F-aktin sökme faktörüdür.

4418070

Transkripsiyon faktörü çatal uçlu kutu P3'ün (Foxp3) ekspresyonu ile karakterize edilen düzenleyici T (Treg) hücreleri, kendi kendine zarar veren bağışıklık tepkilerini baskılayarak bağışıklık homeostazisini korur. Foxp3, Treg hücresi homeostazisini ve fonksiyonunu kontrol eden geç etkili bir farklılaşma faktörü olarak işlev görürken, erken Treg hücresi soyunun bağlılığı, Akt kinaz ve çatal uçlu kutu O (Foxo) transkripsiyon faktörleri ailesi tarafından düzenlenir. Ancak Foxo proteinlerinin, Treg hücresi homeostazisini ve fonksiyonunu kontrol etmek için Treg hücresi bağlılığı aşamasının ötesinde etki gösterip göstermediği büyük ölçüde araştırılmamıştır. Burada Foxo1'in Treg hücre fonksiyonunun önemli bir düzenleyicisi olduğunu gösteriyoruz. Treg hücreleri yüksek miktarlarda Foxo1 eksprese eder ve azalmış T hücresi reseptörünün neden olduğu Akt aktivasyonunu, Foxo1 fosforilasyonunu ve Foxo1 nükleer dışlanmasını gösterir. Treg hücresine özgü Foxo1 silinmesi olan fareler, şiddet açısından Foxp3 eksikliği olan farelerde görülene benzer, ancak Treg hücrelerinin kaybı olmadan ölümcül bir inflamatuar bozukluk geliştirir. Foxo1 bağlanma bölgelerinin genom çapında analizi, Foxp3 tarafından doğrudan düzenlenmiyor gibi görünen, proinflamatuar sitokin Ifng dahil olmak üzere ∼300 Foxo1'e bağlı hedef geni ortaya çıkarır. Bu bulgular, evrimsel olarak eski olan Akt-Foxo1 sinyal modülünün, Treg hücre fonksiyonu için vazgeçilmez olan yeni bir genetik programı kontrol ettiğini göstermektedir.

4418112

Memelilerde embriyonik gelişim sırasında kalbin büyümesi öncelikle kardiyomiyosit sayısındaki artışa bağlıdır. Ancak doğumdan kısa bir süre sonra kardiyomiyositlerin çoğalması durur ve mevcut miyositlerin hipertrofik genişlemesi yoluyla miyokardın daha da büyümesi meydana gelir. Erişkin yaşam boyunca kardiyomiyositlerin minimal düzeyde yenilenmesinin bir sonucu olarak, miyokardiyal rejenerasyon yoluyla kardiyak hasarın onarımı çok sınırlıdır. Burada, seçilmiş mikroRNA'ların (miRNA'lar) eksojen uygulamasının, kardiyomiyosit proliferasyonunu belirgin şekilde uyardığını ve kalp onarımını desteklediğini gösteriyoruz. Tam genomlu bir miRNA kütüphanesi kullanarak yenidoğan kardiyomiyosit çoğalmasını teşvik eden insan miRNA'ları için yüksek içerikli bir mikroskopi, yüksek verimli fonksiyonel tarama gerçekleştirdik. Kırk miRNA, yenidoğan fare ve sıçan kardiyomiyositlerinde hem DNA sentezini hem de sitokinezi güçlü bir şekilde arttırdı. Bu miRNA'lardan ikisi (hsa-miR-590 ve hsa-miR-199a) ayrıca test için seçildi ve yetişkin kardiyomiyositlerin ex vivo hücre döngüsüne yeniden girişini teşvik ettiği ve hem yenidoğan hem de yetişkin hayvanlarda kardiyomiyosit proliferasyonunu teşvik ettiği gösterildi. Farelerde miyokard enfarktüsünden sonra, bu miRNA'lar belirgin kardiyak rejenerasyonu ve kardiyak fonksiyonel parametrelerin neredeyse tamamen iyileşmesini uyardı. Tanımlanan miRNA'lar, kardiyomiyosit kaybına bağlı kalp patolojilerinin tedavisi için büyük umut vaat ediyor.

4418269

Spinal reflekslere duyusal aferentler ve motor nöronlar arasındaki sinaptik bağlantılar aracılık eder. Bu devrelerin organizasyonu çeşitli düzeylerde özgüllük gösterir. Sadece belirli propriyoseptif duyu nöronları sınıfları motor nöronlarla doğrudan, monosinaptik bağlantılar kurar. Bunu yapanlar motor havuzu özgüllüğü kurallarına tabidir: Aynı kası besleyen motor nöronlarla güçlü bağlantılar kurarlar, ancak karşıt kasları besleyen motor havuzlarından kaçınırlar. Bu bağlantı modeli başlangıçta doğrudur ve aktivite yokluğunda da korunur, bu da kablolama özgüllüğünün duyusal ve motor nöronların yüzeyindeki tanıma moleküllerinin eşleşmesine bağlı olduğunu ima eder. Bununla birlikte, merkezi sinir sisteminin çoğu bölgesinde olduğu gibi burada da hassas sinaptik özgüllüğün belirleyicileri henüz tanımlanmamıştır. Bu refleks devrelerindeki sinaptik özgüllüğün kökenlerini ele almak amacıyla, duyusal ve motor nöronların alt kümeleri tarafından ifade edilen tanıma proteinlerini manipüle etmek amacıyla moleküler genetik yöntemler kullandık. Burada, sınıf 3 semaforin Sema3e'nin seçilen motor nöron havuzları tarafından ve bunun yüksek afiniteli reseptör pleksini D1'in (Plxnd1) propriyoseptif duyu nöronları tarafından ekspresyonunu içeren bir tanıma sisteminin, duyusal-motor devrelerdeki sinaptik özgüllüğün kritik bir belirleyicisi olduğunu gösteriyoruz. fareler. Duyusal veya motor nöronlarda Sema3e-Plxnd1 sinyalleme profilinin değiştirilmesi, monosinaptik bağlantıların fonksiyonel ve anatomik olarak yeniden düzenlenmesiyle sonuçlanır, ancak motor havuzu özgüllüğünü değiştirmez. Bulgularımız, bu prototipik merkezi sinir sistemi devresindeki monosinaptik bağlantı kalıplarının, itici sinyallemeye dayalı bir tanıma programı yoluyla oluşturulduğunu göstermektedir.

4418582

Ökaryotik genomun kromatin içinde paketlenmesi, DNA'yı işleyen enzimlerin erişimini kısıtlayan engeller oluşturur. Bu engellerin üstesinden gelmek için hücreler, her biri SNF2/SWI2 süper ailesinden bir ATPaz alt birimi içeren bir dizi çoklu protein, ATP'ye bağımlı kromatin yeniden modelleme kompleksine sahiptir. Kromatin yeniden modelleme kompleksleri, nükleozom hareketliliğini artırarak işlev görür ve açıkça transkripsiyona dahil edilir. Burada, potansiyel olarak diğer DNA işlemlerine yardımcı olan yeniden yapılanma komplekslerini tanımlamak için SNF2/SWI2 ve ISWI ile ilişkili proteinleri analiz ettik. Saccharomyces cerevisiae'den Ino80 ATPaz'ı içeren bir kompleksi saflaştırdık. INO80 kompleksi, Holliday bağlantılarının dal göçünü katalize eden bakteriyel RuvB DNA helikazıyla ilişkili iki protein dahil olmak üzere yaklaşık 12 polipeptit içerir. Saflaştırılmış kompleks, kromatini yeniden şekillendirir, in vitro transkripsiyonu kolaylaştırır ve 3' ila 5' DNA helikaz aktivitesi gösterir. İno80'in mutantları, transkripsiyondaki kusurlara ek olarak DNA hasarına neden olan ajanlara karşı aşırı duyarlılık gösterir. Bu sonuçlar, Ino80 ATPase tarafından yürütülen kromatin yeniden yapılanmasının, DNA hasarı onarımının yanı sıra transkripsiyona da bağlanabileceğini göstermektedir.

4418878

Onkogenik bir durumun gelişimi, hücre büyümesinin ve hücre kaderinin kontrolünde merkezi olan hücre sinyal yollarının kuralsızlaştırılmasına yol açan çok sayıda bağımsız mutasyonun birikmesini içeren karmaşık bir süreçtir. DNA mikrodizi bazlı gen ekspresyonu imzalarını kullanarak kanser alt tiplerini, hastalığın tekrarını ve spesifik tedavilere yanıtı tanımlama yeteneği, birçok çalışmada gösterilmiştir. Çeşitli çalışmalar aynı zamanda onkogenik yolların analizi için gen ekspresyon profillerinin kullanılma potansiyelini de ortaya koymuştur. Burada, çeşitli onkogenik yolların aktivasyon durumunu yansıtan gen ekspresyon imzalarının tanımlanabileceğini gösteriyoruz. İnsan kanserlerinin çeşitli geniş koleksiyonlarında değerlendirildiğinde, bu gen ekspresyon imzaları, tümörlerdeki yol serbestleştirme modellerini ve hastalık sonuçlarıyla klinik olarak ilgili ilişkileri tanımlar. İmzaya dayalı tahminleri çeşitli yollarda birleştirmek, belirli kanserler ve tümör alt tipleri arasında ayrım yapan koordineli yol kuralsızlaştırma modellerini tanımlar. Tümörlerin yol imzalarına dayalı olarak kümelenmesi, ilgili hasta alt gruplarında prognozu daha da tanımlar; onkogenik yol kuralsızlaştırma modellerinin onkogenik fenotipin gelişiminin altında yattığını ve spesifik kanserlerin biyolojisini ve sonuçlarını yansıttığını gösterir. Kanser hücre hatlarında yol deregülasyonu tahminlerinin, yolun bileşenlerini hedef alan terapötik ajanlara duyarlılığı da tahmin ettiği gösterilmiştir. Yol deregülasyonunu yolun bileşenlerini hedef alan terapötiklere duyarlılıkla bağlamak, hedeflenen terapötiklerin kullanımına rehberlik etmek için bu onkogenik yol imzalarından yararlanma fırsatı sağlar.

4421547

İnsülin benzeri büyüme faktörü 2 (Igf2) ve H19 genleri damgalanır, bu da sırasıyla anne ve babaya ait alellerin susturulmasıyla sonuçlanır. Bu olay, H19'un iki kilobaz yukarısındaki baskılı kontrol bölgesine bağlıdır (refs 1, 2). Baba kromozomunda bu element metillenmiştir ve H19'un susturulması için gereklidir (refs 2-4). Maternal kromozomdaki bölge metillenmemiştir ve Igf2 geninin 90 kilobaz yukarı yönde susturulması için gereklidir. Metillenmemiş damgalanmış kontrol bölgesinin, Igf2'nin H19'un 3'ünde yer alan arttırıcılarla etkileşimini bloke eden bir kromatin sınırı görevi gördüğünü öne sürdük (refs 5, 6). Bu güçlendirici bloke edici aktivite daha sonra bölge metillendiğinde kaybolacak ve böylece Igf2'nin paternal olarak ekspresyonuna izin verilecektir. Burada, transgenik fareler ve doku kültürü kullanarak, fare ve insan H19'un metillenmemiş damgalanmış kontrol bölgelerinin arttırıcı bloke edici aktivite sergilediğini gösteriyoruz. Ayrıca, omurgalı sınır fonksiyonunda rol oynayan bir çinko parmak proteini olan CTCF'nin, güçlendirici blokaj için gerekli olan metillenmemiş damgalanmış kontrol bölgesindeki çeşitli bölgelere bağlandığını gösterdik. Modelimizle tutarlı olarak CTCF bağlanması, DNA metilasyonuyla ortadan kaldırılır. Bu, bildiğimiz kadarıyla omurgalılarda düzenlenmiş bir kromatin sınırının ilk örneğidir.

4421578

İnsan monoklonal antikorlarının karakterizasyonu, geniş HIV-1 nötralizasyon mekanizmalarına ilişkin önemli bilgiler sağlamaktadır. Burada, test edilen virüslerin ~%98'ini nötralize eden, 10E8 olarak adlandırılan, HIV-1 gp41 membran-proksimal dış bölgeye (MPER) özgü bir antikoru rapor ediyoruz. 78 sağlıklı HIV-1 ile enfekte donörden alınan serumların analizi, %27'sinin MPER'e özgü antikorlar içerdiğini ve %8'inin 10E8 benzeri spesifiklikler içerdiğini gösterdi. Diğer nötralize edici MPER antikorlarının aksine 10E8, fosfolipidlere bağlanmadı, otoreaktif değildi ve hücre yüzeyi zarfına bağlandı. 10E8'in tam MPER ile kompleks halindeki yapısı, yüksek düzeyde korunmuş gp41-hidrofobik kalıntıların dar bir bölümünü ve zar ötesi bölgeden hemen önce kritik bir arginin veya lizini içeren bir güvenlik açığı bölgesini ortaya çıkardı. Dirençli HIV-1 varyantlarının analizi, bu kalıntıların nötralizasyon açısından önemini doğruladı. Yüksek düzeyde korunmuş MPER, güçlü, kendi kendine tepkimeye girmeyen nötrleştirici antikorların hedefidir; bu da HIV-1 aşılarının, HIV-1 zarf glikoproteininin bu bölgesine karşı antikorları indüklemeyi hedeflemesi gerektiğini düşündürür.

4421742

Ortaya çıkan kanıtlar, pulmoner demir birikiminin bir dizi kronik akciğer hastalığında rol oynadığını göstermektedir. Ancak pulmoner demir birikiminde yer alan mekanizma(lar) ve bunun akciğer hastalıklarının in vivo patogenezindeki rolü hala bilinmemektedir. Burada, kalıtsal hemokromatoz tip 4'e (Slc40a1C326S) neden olan fare ferroportin genindeki bir nokta mutasyonun, alveolar makrofajlarda, iletici hava yollarını ve akciğer parankimini kaplayan epitelyal hücrelerde ve vasküler düz kas hücrelerinde demir seviyelerini arttırdığını gösteriyoruz. Pulmoner demir aşırı yüklenmesi, vahşi tip kontrollerle karşılaştırıldığında homozigot Slc40a1C326S/C326S farelerinde oksidatif stres, toplam akciğer kapasitesinin azalmasıyla birlikte kısıtlayıcı akciğer hastalığı ve azalmış kan oksijen saturasyonu ile ilişkilidir. Bu bulgular, şimdiye kadar klasik demirle ilişkili bir bozukluk olarak kabul edilmeyen akciğer patolojisinde demirin rol oynadığını göstermektedir.

4421746

Poliploidi, yani kromozom setlerinin artması, gelişim, hücresel stres, hastalık ve evrim sırasında ortaya çıkar. Yaygınlığına rağmen poliploidiye eşlik eden fizyolojik değişiklikler hakkında çok az şey bilinmektedir. Daha önce haploid veya diploid tomurcuklanan mayalarda öldürücü olmayan bir gen silinmesinin triploidlerde veya tetraploidlerde öldürücülüğe neden olduğu 'ploidiye özgü ölümcüllüğü' tanımlamıştık. Burada ploidiye özgü öldürücü işlevleri tanımlamak için genom çapında bir tarama rapor ediyoruz. Taranan 3.740 mutasyondan yalnızca 39'u ploidiye özgü öldürücülük sergiledi. Bu mutasyonların neredeyse tamamı homolog rekombinasyonu, kardeş kromatid uyumunu veya mitotik iğ fonksiyonunu bozarak genomik stabiliteyi etkiler. Tarama tarafından tahmin edilen vahşi tipte tetraploidlerdeki kusurları ortaya çıkardık ve tetraploidizasyonun genomik stabiliteyi etkilediği mekanizmaları belirledik. Tetraploidlerin iş mili kutbuna yüksek oranda sentetik/monopolar kinetokore bağlanma insidansına sahip olduğunu gösterdik. Bu kusurun, iş mili kutup gövdesinin, iş milinin ve kinetokorların boyutunu ölçeklendirme yeteneğindeki uyumsuzluklarla açıklanabileceğini öneriyoruz. Dolayısıyla geometrik kısıtlamaların genom stabilitesi üzerinde derin etkileri olabilir; Burada açıklanan olgu, kanser gibi hastalık durumları da dahil olmak üzere çeşitli biyolojik bağlamlarla ilgili olabilir.

4421787

Hematopoietik kök hücreler (HSC'ler) ve bunların sonraki progenitörleri kan hücreleri üretir, ancak bu üretimin kesin doğası ve kinetiği tartışmalı bir konudur. Bir modelde, lenfoid ve miyeloid üretim, lenfoidle hazırlanmış multipotent progenitörden (LMPP) sonra dallanır ve her iki dal da daha sonra dendritik hücreler üretir. Bununla birlikte, bu model esas olarak in vitro klonal analizlere ve in vivo popülasyona dayalı izlemeye dayanmaktadır; bu, in vivo tek hücreli karmaşıklığı gözden kaçırabilir. Burada, yüzlerce LMPP ve HSC'nin in vivo kaderini tek hücre düzeyinde izlemek için 'hücresel barkodlamanın' yeni bir kantitatif versiyonunu kullanarak bu sorunlardan kaçınıyoruz. Bu veriler, LMPP'lerin ürettikleri hücre tiplerinde oldukça heterojen olduğunu ve lenfoid, miyeloid ve dendritik hücre taraflı üreticilerin kombinasyonlarına ayrıldığını göstermektedir. Tersine, bazı HSC'lerin bilinen bir soy önyargısını gözlemlememize rağmen, hücresel çıktıların çoğu, her biri tüm hücre türlerini üreten az sayıda HSC'den türetilir. Tek LMPP'lerden türetilen kardeş hücrelerin çıktısının in vivo analizi, bunların sıklıkla benzer bir kaderi paylaştıklarını gösteriyor; bu da bu progenitörlerin kaderinin damgalanmış olduğunu gösteriyor. Ayrıca, bu damgalama aynı zamanda dendritik hücre taraflı LMPP'ler için de gözlemlendiğinden, dendritik hücrelerin ayrı atalara dayalı olarak ayrı bir soy olduğu düşünülebilir. Bu veriler, kalıtsal ve çeşitli soy damgalamasının önceden düşünülenden daha erken gerçekleştiği, hematopoezin 'kademeli bağlılık' modelini önermektedir.

4422723

Bir epitelyumun koruyucu bir bariyer sağlaması için, bölünen hücrelerin sayısını ölen hücrelerin sayısıyla eşleştirerek homeostatik hücre sayılarını sürdürmesi gerekir. Telafi edici hücre bölünmesi ölen hücreler tarafından tetiklenebilse de, hücre ölümünün çoğalmaya bağlı aşırı kalabalığı nasıl giderebileceği bilinmemektedir. Epitelde apoptozu tetiklediğimizde, işlevsel bir bariyeri korumak için ölen hücreler dışarı atılır. Ekstrüzyon, ölmeye mahkum hücrelerin çevredeki epitel hücrelere, ölmekte olan hücreyi dışarı doğru sıkıştıran bir aktomiosin halkasını daraltmaları için sinyal göndermesiyle meydana gelir. Ancak normal homeostaz sırasında hücre ölümüne neyin yol açtığı açık değildir. Burada insan, köpek ve zebra balığı hücrelerinde çoğalma ve göç nedeniyle aşırı kalabalıklaşmanın, epitelyal hücre sayılarını kontrol etmek için canlı hücrelerin ekstrüzyonuna neden olduğunu gösteriyoruz. Canlı hücrelerin ekstrüzyonu, en yüksek kalabalığın in vivo olarak meydana geldiği bölgelerde meydana gelir ve in vitro olarak deneysel olarak aşırı kalabalıklaşan tek katmanlar tarafından indüklenebilir. Apoptotik hücre ekstrüzyonu gibi, aşırı kalabalıklaşmadan kaynaklanan canlı hücre ekstrüzyonu da sfingozin 1-fosfat sinyali ve Rho-kinaz bağımlı miyozin kasılmasını gerektirir, ancak gerilmeyle aktive olan kanallar aracılığıyla sinyal göndererek ayırt edilir. Ayrıca, zebra balığı içinde gerilmeyle aktive olan bir kanalın Piezo1'in bozulması, ekstrüzyonu önler ve epitel hücre kütlelerinin oluşumuna yol açar. Bulgularımız, homeostatik dönüşüm sırasında, sınırlı bir substrat üzerindeki epitel hücrelerinin büyümesi ve bölünmesinin aşırı kalabalıklaşmaya neden olduğunu ve bunun da hayatta kalma faktörlerinin kaybı nedeniyle bunların ekstrüzyonuna ve bunun sonucunda ölüme yol açtığını ortaya koymaktadır. Bu sonuçlar, canlı hücre ekstrüzyonunun, aşırı epitel hücrelerinin birikmesini önleyen tümör baskılayıcı bir mekanizma olabileceğini düşündürmektedir.

4422734

T hücrelerinin, T hücresi reseptörlerinin, antijen sunan hücrelerin (APC'ler) yüzeyindeki ana doku uyumluluk kompleksine (MHC) bağlı antijenik peptid ile etkileşimi yoluyla aktivasyonu, adaptif bağışıklıkta çok önemli bir adımdır. Burada, T hücresi duyarlılığını ve tek hücrelerde immünolojik bir sinaps oluşturma gerekliliklerini karakterize etmek amacıyla fikobiliprotein fikoeritrin ile etiketlenmiş bireysel peptid-I-Ek sınıf II MHC komplekslerini görselleştirmek için üç boyutlu floresan mikroskobu kullanıyoruz. CD4 antijenini eksprese eden T hücrelerinin, tek bir agonist peptit-MHC ligandına bile geçici kalsiyum sinyali ile yanıt verdiğini ve T hücresi ile APC'nin temas bölgesindeki moleküllerin organizasyonunun, yalnızca bir immünolojik sinapsın özelliklerini aldığını gösterdik. yaklaşık on agonist mevcuttur. Bu hassasiyet büyük ölçüde CD4'e bağlıdır, çünkü bu molekülün antikorlarla bloke edilmesi, T hücrelerinin yaklaşık 30'dan az ligandı tespit edememesine neden olur.

4422868

Bağırsak kanseri, adenomatoz polipozis koli (APC) gibi genlerdeki Wnt yolunu aktive eden mutasyonlar tarafından başlatılır. Çoğu kanserde olduğu gibi, kaynak hücrenin bulunması zor kalmıştır. Daha önce oluşturulmuş bir Lgr5 (lösin açısından zengin tekrar içeren G-protein-bağlı reseptör 5) nakavt fare modelinde, uzun ömürlü bağırsak kök hücrelerinde tamoksifen ile indüklenebilir bir Cre rekombinazı eksprese edilir. Burada, bu kök hücrelerde Apc'nin silinmesinin, bunların birkaç gün içinde dönüşümüne yol açtığını gösteriyoruz. Dönüştürülmüş kök hücreler, büyüyen bir mikroadenomu beslerken, kripta diplerinde kalır. Bu mikroadenomlar engelsiz bir büyüme gösterir ve 3-5 hafta içinde makroskopik adenomlara dönüşürler. Lgr5+ hücrelerinin kök hücre kaynaklı adenomlar içindeki dağılımı, erken neoplastik lezyonlarda bir kök hücre/progenitör hücre hiyerarşisinin korunduğunu gösterir. Farklı bir cre fare kullanılarak kısa ömürlü transit çoğaltıcı hücrelerde Apc silindiğinde, indüklenen mikroadenomların büyümesi hızla durur. 30 haftadan sonra bile bu farelerde büyük adenomlar çok nadir görülüyor. Kök hücreye özgü Apc kaybının, giderek büyüyen neoplaziye yol açtığı sonucuna vardık.

4423203

Mikroorganizmalar tarafından üretilen gelişmiş biyoyakıtlar, petrol bazlı yakıtlarla benzer özelliklere sahiptir ve mevcut ulaşım altyapısına 'düşebilir'. Ancak bu biyoyakıtların faydalı olacak kadar yüksek verimle üretilmesi, mikroorganizma metabolizmasının mühendisliğini gerektirir. Bu tür mühendislik yalnızca belirli bir hammaddeye veya konakçı organizmaya dayanmaz. Yakıt üretimini en üst düzeye çıkarmak için hem konakçıyı hem de yolları optimize etmek için veriye dayalı ve sentetik biyoloji yaklaşımları kullanılabilir. Bazı başarılara rağmen, gelişmiş biyoyakıtların ticarileşmeye doğru ilerlemesi ve daha geleneksel yakıtlarla rekabet edebilmesi için hala zorlukların aşılması gerekiyor.

4423220

Erkek kısırlığı uzun süredir devam eden önemli tıbbi kaygılardan biridir. Sperm kromatininin bütünlüğü, erkek doğurganlığının ve in vitro fertilizasyon potansiyelinin klinik bir göstergesidir: kromozom anöploidisi ve DNA yoğunlaşması veya hasarı, üreme yetmezliği ile ilişkilidir. Sperm kromatin yapısı ve paketlemesi için önemli olan korunmuş proteinlerin belirlenmesi, kısırlığın evrensel nedenlerini ortaya çıkarabilir. Burada doğurganlık için önemli olan spermatojenik kromatinle ilişkili proteinleri tanımlamak için Caenorhabditis elegans'taki proteomik, sitoloji ve fonksiyonel analizi birleştiriyoruz. Stratejimiz birden fazla adımdan oluşuyordu: kromatinin karşılaştırılabilir mayotik hücre tiplerinden, yani spermatogenez veya oogenez geçirenlerden saflaştırılması; kromatin ile birlikte saflaştırılan faktörlerin çok boyutlu protein tanımlama teknolojisi (MudPIT) ile proteomik analizi; sperm proteinlerinin bolluğa göre önceliklendirilmesi; ve genel kromatin ve mayotik faktörleri ortadan kaldırmak için ortak proteinlerin çıkarılması. Yaklaşımımız, şu anda en kapsamlı katalog olan spermatojenik kromatin ile birlikte saflaştırılan 1.099 proteini, fonksiyonel analiz için 132 proteine ​​indirdi. Protein lokalizasyon çalışmaları ile birlikte RNA etkileşimi yoluyla gen fonksiyonunun azaltılması, DNA sıkışması, kromozom ayrımı ve doğurganlık için hayati önem taşıyan korunmuş spermatogeneze özgü proteinleri ortaya çıkardı. Diğer süreçlerde yer alan faktörler için de spermatogenezde beklenmeyen roller tespit edildi. C. elegans'tan memelilere kadar korunan doğurganlık faktörlerini bulma stratejimiz amacına ulaştı: nematod proteinlerine karşılık gelen fare geni nakavtlarının %37'si (7/19) erkek kısırlığına neden oluyor. Bu nedenle listemiz, erkek kısırlığının nedenlerini ve erkek kontraseptiflerine yönelik hedefleri belirlemek için önemli bir fırsat sunmaktadır.

4423327

Nanog, memeli pluripotent hücrelerinde ve gelişmekte olan germ hücrelerinde bulunan farklı bir homeodomain proteinidir. Nanog'un silinmesi erken embriyonik ölümcüllüğe neden olurken, kurucu ifade embriyonik kök hücrelerin otonom olarak kendini yenilemesini sağlar. Buna göre Nanog, pluripotent transkripsiyonel ağın çekirdek elemanı olarak kabul edilir. Ancak burada Nanog'un fare embriyonik kök hücrelerinde dalgalanmalar gösterdiğini rapor ediyoruz. Nanog'un geçici aşağı regülasyonu, hücreleri farklılaşmaya yatkın hale getiriyor gibi görünüyor, ancak kararlılığa işaret etmiyor. Genetik silme yoluyla, farklılaşmaya yatkın olmalarına rağmen embriyonik kök hücrelerin, Nanog'un kalıcı yokluğunda süresiz olarak kendini yenileyebildiğini gösterdik. Genişletilmiş Nanog boş hücreleri embriyonik germ katmanlarını kolonize eder ve hem fetal hem de yetişkin kimeralarda çok soylu farklılaşma sergiler. Her ne kadar onlar da germ hattına alınmış olsalar da, Nanog'dan yoksun ilkel germ hücreleri genital çıkıntıya ulaştıklarında olgunlaşmayı başaramazlar. Bu kusur, mutant alelin onarılmasıyla kurtarılır. Dolayısıyla Nanog, somatik pluripotensitenin ifadesi için vazgeçilmezdir ancak özellikle germ hücrelerinin oluşumu için gereklidir. Bu nedenle Nanog, pluripotensin temizlik mekanizmasından ziyade öncelikle iç hücre kütlesinin ve germ hücresi durumlarının inşasında görev alır. Nanog'un, alternatif gen ekspresyon durumlarına direnerek veya bunları tersine çevirerek kültürdeki embriyonik kök hücreleri stabilize ettiğini tahmin ediyoruz.

4423401

Gram-negatif bakteri ürünü lipopolisakkarit tarafından aktive edilen makrofajlar, çekirdek metabolizmalarını oksidatif fosforilasyondan glikolize değiştirir. Burada, glikolizin 2-deoksiglikoz ile inhibisyonunun, fare makrofajlarında lipopolisakkarid kaynaklı interlökin-1β'yı baskıladığını ancak tümör nekroz faktörü-α'yı baskılamadığını gösterdik. Lipopolisakkaritle aktifleştirilen makrofajların kapsamlı bir metabolik haritası, glikolitiklerin yukarı regülasyonunu ve mitokondriyal genlerin aşağı regülasyonunu göstermektedir; bu, değiştirilmiş metabolitlerin ekspresyon profilleriyle doğrudan ilişkilidir. Lipopolisakkarit, trikarboksilik asit döngüsü ara süksinatının seviyelerini güçlü bir şekilde artırır. Glutamin bağımlı anerpleroz süksinatın ana kaynağıdır, ancak 'GABA (γ-aminobütirik asit) şant' yolunun da bir rolü vardır. Lipopolisakkarit kaynaklı süksinat, önemli bir hedef olarak interlökin-1β ile 2-deoksiglikoz tarafından inhibe edilen bir etki olan hipoksi ile indüklenebilir faktör-1a'yı stabilize eder. Lipopolisakkarit ayrıca çeşitli proteinlerin süksilasyonunu da arttırır. Bu nedenle süksinatı, doğuştan gelen bağışıklık sinyallemesinde, iltihaplanma sırasında interlökin-1β üretimini artıran bir metabolit olarak tanımlıyoruz.

4423559

Çevresel ve genetik anormallikler, her 1000 doğumdan 1'inde nöral tüp kapanma kusurlarına (NTD'ler) neden olur. Bu doğum kusurlarına yönelik fare ve kurbağa modelleri, Van Gogh benzeri 2'nin (Vangl2, aynı zamanda Şaşılık olarak da bilinir) ve düzlemsel hücre polaritesi (PCP) sinyalinin diğer bileşenlerinin, nöral progenitörlerin orta hatta yakınlaşmasını teşvik ederek nörülasyonu kontrol edebileceğini göstermiştir. Burada zebra balığındaki nörülasyon sırasında PCP sinyallemesinin yeni bir rolünü gösteriyoruz. Kanonik olmayan Wnt/PCP sinyallemesinin nöral progenitörleri ön-arka eksen boyunca polarize ettiğini gösterdik. Bu polarite, sinir omurgasındaki hücre bölünmesi sırasında geçici olarak kaybolur, ancak yavru hücreler nöroepitel ile yeniden bütünleştikçe yeniden kurulur. Zebra balığı Vangl2'nin kaybı (trilobit mutantlarda) nöral omurga hücrelerinin polarizasyonunu ortadan kaldırır, yavru hücrelerin nöroepitelyuma yeniden eklenmesini bozar ve ektopik nöral progenitör birikimleri ve NTD'lerle sonuçlanır. Dikkat çekici bir şekilde hücre bölünmesinin bloke edilmesi, yakınsama ve uzamadaki kalıcı kusurlara rağmen trilobit nöral tüp morfogenezinin kurtarılmasına yol açar. Bu sonuçlar, hücre bölünmesi ve nörülasyonda morfogenezin birleştirilmesinde PCP sinyallemesinin bir fonksiyonunu ortaya çıkarır ve NTD'lerin altında yatan daha önce bilinmeyen bir mekanizmaya işaret eder.

4424888

Tüberküloz (TB) bugün dünyada insanlık tarihinin herhangi bir döneminde olduğundan daha yaygındır. Tüberkülozdan sorumlu patojen olan Mycobacterium tuberculosis, çeşitli konak lezyonlarında hayatta kalmak ve bağışıklık gözetiminden kaçınmak için çeşitli stratejiler kullanır. Temel soru, yeni TB ilaçlarını keşfetmeye yönelik yaklaşımlarımızın ne kadar sağlam olduğu ve yeni ilaçların uzun ve uzun süren klinik gelişimini azaltmak için ne gibi önlemlerin alınabileceğidir. Çoklu ilaca dirençli M. tuberculosis türlerinin ortaya çıkışı, yeni moleküler yapı iskelelerinin keşfini bir öncelik haline getiriyor ve hatta mevcut durum, etkili kontrolün sağlanması için bazı eski ilaç ailelerinin yeniden yapılandırılmasını ve yeniden konumlandırılmasını bile gerektiriyor. Kullanılan strateji ne olursa olsun, başarı büyük ölçüde patojen ile onun insan konakçısı arasındaki karmaşık etkileşimleri doğru anlamamıza bağlı olacaktır. Bu derlemede TB ilaç keşfindeki yenilikleri ve yeni ajanları hastalara daha hızlı ulaştırmak için gelişen stratejileri tartışıyoruz.

4425507

Anti-hipertansif ajan ifenprodilin, NMDA (N-metil-D-aspartat) reseptörleri üzerindeki etkileri yoluyla nöroprotektif aktiviteye sahip olduğunun keşfedilmesinden bu yana, etki mekanizmasının anlaşılması ve bu etki üzerinde iyileştirilmiş terapötik bileşiklerin geliştirilmesi için kararlı bir çaba sarf edilmiştir. bu bilginin temeli. NMDA reseptörlerinin aracılık ettiği nörotransmisyon, temel beyin gelişimi ve fonksiyonu için gereklidir. Bu reseptörler heteromerik iyon kanalları oluşturur ve glisin ve glutamatın sırasıyla GluN1 ve GluN2 alt birimlerine eşzamanlı bağlanmasından sonra aktive olur. NMDA reseptörlerinin fonksiyonel bir özelliği, iyon kanalı aktivitelerinin, küçük bileşiklerin alt tipe özgü bir şekilde amino terminal alanına (ATD) bağlanmasıyla allosterik olarak düzenlenmesidir. GluN1 ve GluN2B NMDA reseptörlerini spesifik olarak inhibe eden Ifenprodil ve ilgili feniletanolamin bileşikleri, depresyon, Alzheimer hastalığı ve Parkinson hastalığı dahil olmak üzere çeşitli nörolojik bozuklukların ve hastalıkların tedavisinde potansiyel kullanımları açısından yoğun bir şekilde incelenmiştir. Büyük ilgiye rağmen, feniletanolaminlerin ve ATD aracılı allosterik inhibisyonun tanınmasının altında yatan mekanizmalar, yapısal bilgi eksikliği nedeniyle sınırlı kalmaktadır. Burada GluN1 ve GluN2B ATD'lerin bir heterodimer oluşturduğunu ve feniletanolaminin GluN2B yarığı yerine GluN1 ve GluN2B arasındaki arayüze bağlandığını rapor ediyoruz. Xenopus laevis'ten GluN1b ATD ile Rattus norvegicus'tan GluN2B ATD arasında oluşan heterodimerin kristal yapısı, homodimerik NMDA olmayan reseptörlerde gözlemlenen düzenlemelerden farklı olan oldukça farklı bir alt birim düzenleme modeli gösterir ve feniletanolamin bağlanması için moleküler belirleyicileri ortaya çıkarır . GluN2B ATD'nin iki loblu yapısındaki alan hareketinin, alt birimler arası bir disülfür bağının tasarlanması yoluyla kısıtlanması, ifenprodile duyarlılığı belirgin şekilde azaltır; bu, GluN2B ATD'deki konformasyonel özgürlüğün, NMDA reseptörlerinin ifenprodil aracılı allosterik inhibisyonu için gerekli olduğunu gösterir. . Bu bulgular, nörolojik bozukluklar ve hastalıklar için terapötik değeri olan alt tipe özgü bileşiklerin tasarımının geliştirilmesinin yolunu açıyor.

4427060

Kronik inflamatuar bağırsak hastalığının iki ana türü olan Crohn hastalığı ve ülseratif kolit, etiyolojisi bilinmeyen çok faktörlü durumlardır. Crohn hastalığı için bir duyarlılık lokusu, kromozom 16'ya haritalanmıştır. Burada, Crohn hastalığı için üç bağımsız ilişkiyi tanımlamak üzere bağlantı analizini ve ardından bağlantı dengesizliği haritalamasını temel alan konumsal bir klonlama stratejisi kullandık: bir çerçeve kayması varyantı ve iki yanlış anlam varyantı. Monositlerde eksprese edilen apoptoz düzenleyicilerinin Apaf-1/Ced-4 süper ailesinin bir üyesini kodlayan NOD2. Bu NOD2 varyantları, proteinin lösin açısından zengin tekrar alanının veya bitişik bölgenin yapısını değiştirir. NOD2 nükleer faktör NF-kB'yi aktive eder; bu aktive edici fonksiyon, inhibitör bir role sahip olan ve aynı zamanda mikrobiyal patojenlerin bileşenleri için hücre içi bir reseptör görevi gören karboksi terminali lösin açısından zengin tekrar alanı tarafından düzenlenir. Bu gözlemler, NOD2 gen ürününün, bu bileşenlerin tanınmasını değiştirerek ve/veya monositlerde NF-kB'yi aşırı aktive ederek Crohn hastalığına duyarlılık kazandırdığını, böylece Crohn hastalığının patojenik mekanizması için şimdi daha ileri düzeyde incelenebilecek bir moleküler modeli belgelediğini ileri sürmektedir. araştırıldı.

4427392

Fonksiyonel kalp, kardiyomiyositler, endotel hücreleri ve vasküler düz kas hücreleri dahil olmak üzere mezodermden türetilen farklı soylardan oluşur. Fare embriyosu ve fare embriyonik kök hücre farklılaşma modeli üzerinde yapılan çalışmalar, bu üç soyun, en erken aşamalardan birini temsil eden ortak bir Flk-1+ (Kdr olarak da bilinen kinaz eklenti alanı protein reseptörü) kardiyovasküler progenitörden geliştiğini gösteren kanıtlar sağlamıştır. mezoderm spesifikasyonunda kardiyovasküler soylara yönelik. İnsan kardiyogenezi sırasında benzer bir progenitörün mevcut olup olmadığını belirlemek için insan embriyonik kök hücre farklılaşma kültürlerindeki kardiyovasküler soyların gelişimini analiz ettik. Burada aktivin A, kemik morfogenetik protein 4 (BMP4), temel fibroblast büyüme faktörü (bFGF, aynı zamanda FGF2 olarak da bilinir), vasküler endotelyal büyüme faktörü (VEGF, ayrıca VEGFA olarak da bilinir) ve dickkopf homolog 1'in kombinasyonları ile indüksiyondan sonra gösterdik ( DKK1), serumsuz ortamda, insan embriyonik kök hücre türevli embriyoid gövdeleri, in vitro ve transplantasyondan sonra in vivo olarak kardiyak, endotelyal ve vasküler düz kas potansiyelini gösteren bir KDRlow/C-KIT(CD117)neg popülasyonu oluşturur. Tek katmanlı kültürlere ekildiğinde bu KDRlow/C-KITneg hücreleri, %50'den fazla kasılan kardiyomiyositlerden oluşan popülasyonlar oluşturmak üzere farklılaşır. KDRlow/C-KITneg fraksiyonundan türetilen popülasyonlar, metilselüloz kültürlerine ekildiğinde üç soyun tümünü içeren kolonilere yol açar. Sınırlayıcı seyreltme çalışmalarından ve hücre karıştırma deneylerinden elde edilen sonuçlar, bu kolonilerin klon olduğu yorumunu destekler ve bunların kardiyovasküler koloni oluşturan bir hücreden geliştiklerini gösterir. Bu bulgular birlikte, insan kalp gelişiminin en erken aşamalarından birini tanımlayan bir insan kardiyovasküler progenitörünü tanımlamaktadır.

4429118

Enflamasyonun aracıları ve hücresel efektörleri, tümörlerin yerel ortamının önemli bileşenleridir. Bazı kanser türlerinde, malign bir değişiklik meydana gelmeden önce inflamatuar durumlar mevcuttur. Tersine, diğer kanser türlerinde onkogenik bir değişiklik, tümörlerin gelişimini destekleyen inflamatuar bir mikroçevreyi tetikler. Kökeni ne olursa olsun, tümör mikroçevresindeki 'için için yanan' inflamasyonun birçok tümör teşvik edici etkisi vardır. Malign hücrelerin çoğalmasına ve hayatta kalmasına yardımcı olur, anjiyogenezi ve metastazı teşvik eder, edinsel bağışıklık tepkilerini bozar ve hormonlara ve kemoterapötik ajanlara verilen tepkileri değiştirir. Bu kansere bağlı inflamasyonun moleküler yolları artık çözülüyor ve bu da daha iyi teşhis ve tedaviye yol açabilecek yeni hedef moleküllerin tanımlanmasıyla sonuçlanıyor.

4429388

ESCRT (taşıma için gerekli endozomal sıralama kompleksi) yolu, endozomal intralüminal vezikül oluşumu, HIV tomurcuklanması ve sitokinez dahil olmak üzere birçok önemli biyolojik süreçteki terminal membran fisyon olayları için gereklidir. VPS4 ATPaz'lar, membranla ilişkili ESCRT-III düzeneklerini tanıyarak ve muhtemelen membran fisyonu ile birlikte bunların sökülmesini katalize ederek bu yolda önemli bir işlevi yerine getirir. Burada, insan VPS4A ve VPS4B'nin mikrotübül etkileşim ve taşıma (MIT) alanlarının, ESCRT-III proteinlerinin CHMP1-3 sınıfının karboksi terminallerinde bulunan korunmuş dizi motiflerini bağladığını gösterdik. VPS4A MIT-CHMP1A ve VPS4B MIT-CHMP2B komplekslerinin yapıları, C-terminal CHMP motifinin, VPS4 MIT alanının tetratrikopeptid benzeri tekrarının (TPR) son iki sarmalı arasındaki bir oluğa bağlanan bir amfipatik sarmal oluşturduğunu ortaya koymaktadır, ancak kanonik bir TPR etkileşiminin tersi yöndedir. MIT alanındaki farklı cepler, CHMP motifinin üç korunmuş lösin kalıntısını bağlar ve bu etkileşimleri engelleyen mutasyonlar, VPS4 alımını bloke eder, endozomal protein sıralamasını bozar ve HIV tomurcuklanmasının baskın-negatif VPS4 inhibisyonunu hafifletir. Bu nedenle çalışmalarımız, VPS4 ATPaz'ların, virüslerin, endozomal veziküllerin ve yavru hücrelerin salınması için gerekli olan membran fisyon olaylarını kolaylaştırmak için CHMP substratlarını nasıl tanıdığını ortaya koymaktadır.

4429668

Saccharomyces cerevisiae Pif1 helikazı, bakterilerden insanlara kadar korunan Pif1 DNA helikaz ailesinin prototip üyesidir. Burada, Pif1 helikazları arasında son derece güçlü G-dörtlü gevşemenin korunduğunu gösteriyoruz. Dahası, 3 milyar yılı aşkın evrimle ayrılmış organizmalardan gelen Pif1 helikazları, mayadaki G-dörtlü motiflerdeki DNA hasarını baskıladı. Pif1 helikazlarının yokluğunda oluşan G-dörtlü kaynaklı hasar, yeni genetik ve epigenetik değişikliklere yol açtı. Ayrıca, mayada eksprese edildiğinde insan PIF1'i hem G-dörtlü bağlantılı DNA hasarını hem de telomer uzamasını baskıladı.

4429932

Metastaz, kanser ölümlerinin çoğundan sorumlu olan çok adımlı bir süreçtir ve hem anlık mikro ortamdan (hücre-hücre veya hücre-matriks etkileşimleri) hem de genişletilmiş tümör mikro ortamından (örneğin vaskülarizasyon) etkilenebilir. Hipoksi (düşük oksijen), klinik olarak metastaz ve kötü hasta sonuçlarıyla ilişkilidir, ancak altta yatan süreçler belirsizliğini koruyor. Mikrodizi çalışmaları, hipoksik insan tümör hücrelerinde lisil oksidaz (LOX) ekspresyonunun yükseldiğini göstermiştir. Paradoksal olarak, LOX ekspresyonu hem tümörün baskılanması hem de tümörün ilerlemesi ile ilişkilidir ve bunun tümör oluşumundaki rolü hücresel lokasyona, hücre tipine ve transformasyon durumuna bağlı görünmektedir. Burada LOX ekspresyonunun hipoksi ile indüklenebilir faktör (HIF) tarafından düzenlendiğini ve insan meme ve baş ve boyun tümörlerinde hipoksi ile ilişkili olduğunu gösterdik. Yüksek LOX eksprese eden tümörleri olan hastaların uzak metastazsız ve genel sağkalımları zayıftır. LOX'in inhibisyonu, ortotopik olarak büyümüş meme kanseri tümörleri olan farelerde metastazı ortadan kaldırır. Mekanik olarak salgılanan LOX, fokal adezyon kinaz aktivitesi ve hücreden matrikse adezyon yoluyla hipoksik insan kanser hücrelerinin istilacı özelliklerinden sorumludur. Ayrıca, LOX'un metastatik büyümeye izin veren bir niş yaratması gerekebilir. Bulgularımız LOX'in hipoksinin neden olduğu metastaz için gerekli olduğunu ve metastazların önlenmesi ve tedavisinde iyi bir terapötik hedef olduğunu göstermektedir.

4430962

Kanser kök hücresi (CSC) hipotezi, neoplastik klonların yalnızca kök hücre özelliklerine sahip nadir bir hücre fraksiyonu tarafından muhafaza edildiğini ileri sürmektedir. İnsan lösemisinde CSC'lerin varlığı kanıtlanmış olmasına rağmen, meme kanseri dışında katı tümörlerdeki CSC'lere ilişkin çok az kanıt mevcuttur. Son zamanlarda, in vitro kök hücre özellikleri sergileyen insan beyni tümörlerinden bir CD133+ hücre alt popülasyonunu prospektif olarak izole ettik. Bununla birlikte, CSC'lerin gerçek ölçümleri, kendi kendini yenileme kapasiteleri ve orijinal tümörün tam olarak özetlenmesidir. Burada, in vivo tümörleri başlatan insan beyni tümörü başlatan hücreleri tanımlayan bir ksenograft tahlilinin gelişimini rapor ediyoruz. Yalnızca CD133+ beyin tümörü fraksiyonu, NOD-SCID (obez olmayan diyabetik, ciddi kombine immün yetmezlikli) fare beyinlerinde tümör başlatma kapasitesine sahip hücreleri içerir. 100 kadar az sayıda CD133+ hücrenin enjeksiyonu, seri olarak nakledilebilen ve hastanın orijinal tümörünün bir fenkopisi olan bir tümör üretti; oysa aşılanmış ancak bir tümöre neden olmayan 105 CD133- hücresinin enjeksiyonu, bir tümöre neden olmadı. Böylece, beyin tümörü başlatan hücrelerin tanımlanması, birçok katı tümörün temeli olarak CSC hipotezine güçlü bir destek vererek insan beyni tümörü patogenezine ilişkin bilgiler sağlar ve daha etkili kanser tedavileri için daha önce tanımlanamayan bir hücresel hedef oluşturur.

4432763

Dünya Sağlık Örgütü (WHO), sağlık, beslenme ve sosyal refahı değerlendirmek amacıyla antropometrinin farklı yaşlardaki kullanımını yeniden değerlendirmek üzere bir Uzman Komitesi topladı. Komitenin görevi, uygun olduğunda antropometrik indeksler için referans verilerinin belirlenmesini ve verilerin nasıl kullanılması gerektiğine ilişkin yönergelerin sağlanmasını içeriyordu. Fetal büyüme için Komite, mevcut cinsiyete özgü çok ırklı bir referansı önerdi. Mevcut Ulusal Sağlık İstatistikleri Merkezi (NCHS)/WHO referansının önemli teknik dezavantajları ve anne sütüyle beslenen bebeklerin büyümesini değerlendirmedeki yetersizliği göz önüne alındığında, Komite, bebekler için ağırlık ve boy/boy ile ilgili yeni bir referansın geliştirilmesini tavsiye etti. karmaşık ve maliyetli bir girişim olacak bebekler ve çocuklar. Okul öncesi çocuklar için orta üst kol çevresinin doğru yorumlanması yaşa özel referans verileri gerektirir. Ergenlerin yaşa göre boylarını değerlendirmek için Komite mevcut NCHS/WHO referansını önerdi. NCHS vücut kitle indeksi (BMI) verilerinin, üst yüzdelik dilimlerdeki artışları ve çarpıklıkları ile birlikte kullanılması, sağlık hedeflerinin belirlenmesinde arzu edilmez; ancak bu veriler, yüksek BMI ve yüksek deri altı yağ kombinasyonuna dayalı olarak obeziteyi tanımlamak için geçici olarak önerildi. NCHS değerleri, subskapular ve triseps deri kıvrım kalınlıkları için referans verileri olarak geçici olarak önerildi. Ergen antropometrik karşılaştırmalarının olgunlaşma durumuna göre ayarlanması için de kılavuzlar sağlandı. Şu anda BMI için yetişkin referans verilerine ihtiyaç yoktur; yorum pragmatik BMI kesintilerine dayanmalıdır. Son olarak Komite, yaşlılar, özellikle de 80 yaşın üzerindekiler için çok az normatif antropometrik verinin bulunduğunu belirtti. Bu grup için sağlık durumu, fonksiyon ve biyolojik yaşın doğru tanımlarının geliştirilmesi gerekmektedir.

4434951

ARKA PLAN Yaşla ilişkili epigenetik değişiklikler yaşlanmayla ilişkilidir. Özellikle yaşla ilişkili DNA metilasyon değişiklikleri, yaşlanmanın güçlü bir biyobelirteci olan yaşlanma "saati" olarak adlandırılan bir mekanizmayı içerir. Bununla birlikte, genetik, diyet ve ilaç müdahaleleri yaşam süresini uzatabilirken, bunların epigenom üzerindeki etkisi tanımlanmamıştır. Bu bilgi boşluğunu doldurmak için, fare karaciğerinde tüm genom, tek nükleotid seviyesinde yaşla ilişkili DNA metilasyon değişikliklerini tanımladık ve uzun ömürlülüğü teşvik eden müdahalelerin, özellikle Ames cüce Prop1 df/df mutasyonunun, kalori kısıtlamasının ve rapamisin. SONUÇLAR Takviye edilmemiş, isteğe bağlı bir diyetle beslenen vahşi tip farelerde, yaşla ilişkili hipometilasyon, karaciğer fonksiyonu için kritik olan yüksek düzeyde eksprese edilen genlerdeki süper arttırıcılar açısından zenginleştirildi. Hipometillenmiş güçlendiricileri barındıran genler, yaşla birlikte ifadeyi değiştiren genler açısından zenginleştirildi. Hipermetilasyon, iki değerlikli aktive edici ve baskılayıcı histon modifikasyonları ile işaretlenmiş CpG adalarında zenginleşmişti ve karaciğer kanserindeki hipermetilasyona benziyordu. Yaşla ilişkili metilasyon değişiklikleri, Ames cücesi ve kalorisi kısıtlı farelerde ve rapamisin ile tedavi edilen farelerde daha seçici ve daha az spesifik olarak baskılanır. SONUÇLAR Yaşla ilişkili hipo ve hipermetilasyon olayları, genomun farklı düzenleyici özelliklerinde meydana gelir. Uzun ömürlülüğü teşvik eden farklı müdahaleler, özellikle genetik, diyet ve ilaç müdahaleleri, yaşla ilişkili bazı metilasyon değişikliklerini bastırır; bu müdahalelerin, kısmen epigenomun modülasyonu yoluyla yararlı etkilerini gösterdiği fikriyle tutarlıdır. Bu çalışma, sağlıklı yaşlanmaya ve uzun ömürlülüğe epigenetik katkıyı ve DNA metilasyon saatinin moleküler temelini anlamak için bir temel oluşturmaktadır.

4435369

Hücre dışı veziküller (EV'ler), hücre kaynaklı membran kesecikleridir ve hücreler arası iletişim için endojen bir mekanizmayı temsil eder. EV'lerin biyolojik bilgiyi işlevsel olarak aktarabildiğinin keşfedilmesinden bu yana, EV'lerin ilaç dağıtım aracı olarak potansiyel kullanımı önemli ölçüde bilimsel ilgi kazanmıştır. EV'ler, doğal engellerin üstesinden gelme yetenekleri, içsel hücre hedefleme özellikleri ve dolaşımdaki stabilite gibi mevcut ilaç dağıtım araçlarına göre birçok avantaja sahip olabilir. Bununla birlikte, EV'lerin ilaç dağıtım sistemleri olarak terapötik uygulamaları, ölçeklenebilir EV izolasyonu ve etkili ilaç yükleme yöntemlerinin bulunmaması nedeniyle sınırlı olmuştur. Ayrıca, hedeflenen ilaç dağıtımını gerçekleştirmek için, bunların içsel hücre hedefleme özelliklerinin EV mühendisliği yoluyla ayarlanması gerekir. Burada, ilaç dağıtım aracı olarak EV'lerin geliştirilmesindeki son gelişmeleri ve kalan zorlukları gözden geçirip tartışıyoruz.

4442799

ARKA PLAN Soya proteini veya bileşenleri, genellikle menopozla birlikte artan aterosklerotik kardiyovasküler hastalık (CVD) risk faktörleri total homosistein (tHcy), C-reaktif protein (CRP) ve aşırı vücut demirine karşı koruma sağlayabilir. AMAÇ Bu çalışmanın temel amacı, menopoz sonrası kadınlarda soya proteini bileşenleri izoflavonlar ve fitatın KVH risk faktörleri üzerindeki bağımsız etkisini belirlemekti. İkincil amaç ise tHcy ve CRP konsantrasyonlarına katkıda bulunan faktörleri (kan lipitleri, oksidatif stres indeksleri, serum ferritini, plazma folatı, plazma B-12 vitamini ve vücut kitle indeksi (BMI)) tanımlamaktı. TASARIM Çift kör, 6 haftalık bir çalışmada, yaşları 47-72 arasında değişen 55 menopoz sonrası kadın, rastgele olarak 4 soya proteini (40 g/gün) izolat tedavisinden birine atandı: doğal fitat ve doğal izoflavon (n = 14), doğal fitat ve düşük izoflavon (n = 13), düşük fitat ve doğal izoflavon (n = 14) veya düşük fitat ve düşük izoflavon (n = 14). Demir indekslerini, tHcy'yi, CRP'yi ve BMI'yi ölçtük. SONUÇLAR Doğal fitatlı soya proteini, tHcy'yi (P = 0.017), transferrin doygunluğunu (P = 0.027) ve ferritini (P = 0.029) önemli ölçüde azaltırken, doğal izoflavonlu soya proteininin herhangi bir değişken üzerinde etkisi yoktu. Başlangıçta BMI, tHcy (r = 0.39, P = 0.003) ve CRP (r = 0.55, P < 0.0001) ile yüksek korelasyona sahipken HDL kolesterol, CRP (r = -0.30, P = 0.02) ile koreleydi. Çoklu regresyon analizi, LDL kolesterol ve BMI'nin tHcy'deki genel varyansa önemli ölçüde katkıda bulunduğunu gösterdi (R2= %19,9, P = 0,003). SONUÇ Fitat açısından zengin gıdalar tüketmek ve sağlıklı kiloyu korumak, menopoz sonrası kadınlarda aterosklerotik KVH risk faktörlerini azaltabilir.

4444861

Brca1 ve Brca2 genlerinde eksik olan hücrelerin, homolog rekombinasyon yoluyla DNA çift sarmal kırılmalarını onarma kapasitesi azalmıştır ve sonuç olarak sisplatin ve poli(ADP-riboz) polimeraz (PARP) inhibitörleri dahil olmak üzere DNA'ya zarar veren ajanlara karşı aşırı duyarlıdırlar. Burada, MLL3/4 kompleks proteini PTIP'nin kaybının, Brca1/2 eksikliği olan hücreleri DNA hasarından koruduğunu ve Brca2 eksikliği olan embriyonik kök hücrelerin ölümcüllüğünü kurtardığını gösteriyoruz. Ancak PTIP eksikliği, çift sarmal kırılmalarındaki homolog rekombinasyon aktivitesini geri getirmez. Bunun yerine, onun yokluğu, MRE11 nükleazının durmuş replikasyon çatallarına toplanmasını engeller, bu da yeni oluşan DNA iplikçiklerini kapsamlı bozulmadan korur. Daha genel olarak, PARP inhibitörlerinin ve sisplatin direncinin kazanılması, Brca2 reversiyon mutasyonları geliştirmeyen Brca2 eksikliği olan tümör hücrelerinde replikasyon çatalı koruması ile ilişkilidir. PARP1 ve CHD4 de dahil olmak üzere birden fazla proteinin bozulması, replikasyon çatalı korumasında aynı son noktaya yol açar ve tümör hücrelerinin kemoterapötik müdahalelerden kaçtığı ve ilaca direnç kazandığı karmaşıklıkları vurgular.

4445629

AMAÇLAR Bu çalışmanın amacı kronik kalp yetmezliği (KKY) olan hastalarda plazma korinin prognostik değerini belirlemekti. ARKA PLAN Son yıllarda biriken kanıtlar, korinin kan basıncını ve kalp fonksiyonunu düzenlemede kritik bir rol oynadığını göstermiştir. YÖNTEMLER Prospektif bir kohort çalışmasına ardışık 1.148 KKY hastasını kaydettik ve çok değişkenli Cox regresyon analizini kullanarak plazma korin seviyeleri ile klinik prognoz arasındaki ilişkiyi araştırdık. BULGULAR Düşük korin düzeylerine (<458 pg/ml) sahip hastaların kadın olma ve hipertansif olma olasılıkları daha yüksekti. Düşük korinin, New York Kalp Derneği (NYHA) fonksiyonel sınıfında ve N-terminal pro-B tipi natriüretik peptid (NT-proBNP) düzeylerinde artış ve sol ventriküler ejeksiyon fraksiyonunda (LVEF) azalma ile ilişkili olduğu bulundu. tahmini glomerüler filtrasyon hızı (eGFR). Çok değişkenli Cox regresyon analizi, log korinin yaş, diyabet, NYHA fonksiyonel sınıfı, LVEF ile birlikte majör olumsuz kardiyak olay(lar)ın (MACE) (tehlike oranı: 0,62; %95 güven aralığı: 0,39 ila 0,95) bağımsız bir belirleyicisi olduğunu ileri sürdü. , eGFR ve log NT-proBNP. Ayrıca log corin, klinik değişkenler ve olumsuz prognozun yerleşik biyobelirteçleri için düzeltmeler yapıldıktan sonra kardiyovasküler ölüm (p = 0,041) ve kalp yetmezliğine yeniden hastaneye yatış (p = 0,015) için de önemli bir öngörücüydü. Kaplan-Meier hayatta kalma eğrileri, NT-proBNP düzeyleri medyanın üstünde ve altında olan hastalarda düşük korinin MACE'nin anlamlı bir belirleyicisi olduğunu gösterdi. SONUÇ Çalışmamız, konvansiyonel risk faktörlerinden bağımsız olarak, KKY'li hastalarda plazma korinin MACE'nin değerli bir prognostik belirteci olduğunu göstermektedir.

4446814

Alzheimer hastalığı en sık görülen nörodejeneratif hastalıktır ve mekanizmaya dayalı tedaviler yoktur. Hastalık serebral kortekste bol miktarda nörofibriler lezyon ve nöritik plakların varlığı ile tanımlanır. Nörofibriler lezyonlar eşleştirilmiş sarmal ve düz tau filamentlerinden oluşurken, farklı morfolojilere sahip tau filamentleri diğer nörodejeneratif hastalıkları karakterize eder. Tau filamentlerinin yüksek çözünürlüklü yapıları mevcut değildir. Burada 3,4-3,5 Å çözünürlükte kriyo-elektron mikroskobu (kriyo-EM) haritalarını ve Alzheimer hastalığı olan bir bireyin beynindeki eşleştirilmiş sarmal ve düz filamanların karşılık gelen atom modellerini sunuyoruz. Filament çekirdekleri, tau proteininin 306-378 kalıntılarını içeren, birleşik bir çapraz-p/p-sarmal yapısını benimseyen ve tau toplanması için tohumu tanımlayan iki özdeş protofilamentten yapılır. Eşleştirilmiş sarmal ve düz filamentler, protofilamentler arası paketlenmelerinde farklılık gösterir, bu da bunların ultrastrüktürel polimorflar olduğunu gösterir. Bu bulgular, kriyo-EM'nin hastadan türetilmiş materyalden amiloid filamentlerinin atomik karakterizasyonuna izin verdiğini ve bir dizi nörodejeneratif hastalığın araştırılmasının önünü açtığını göstermektedir.

4447055

Kontüzif omurilik yaralanması, sınırlı nöronal rejenerasyon ve fonksiyonel esneklik nedeniyle çeşitli sakatlıklara yol açar. Glial yara izi ve perinöron ağı içindeki glial türevli kondroitin sülfat proteoglikanların (CSPG'ler) yukarı regülasyonunun aksonal yeniden büyüme ve filizlenmeye karşı bir engel oluşturduğu iyi bilinmektedir. Protein tirozin fosfataz σ (PTPσ), kardeş fosfataz lökosit ortak antijenle ilişkili (LAR) ve nogo reseptörleri 1 ve 3 (NgR) ile birlikte, yakın zamanda CSPG'lerin inhibitör glikosile edilmiş yan zincirleri için reseptörler olarak tanımlanmıştır. Burada farelerde, PTPσ'nun büyüme konilerini CSPG açısından zengin substratlar içinde sıkı bir şekilde stabilize ederek distrofik bir duruma dönüştürmede kritik bir role sahip olduğunu bulduk. PTPσ'ya bağlanan ve CSPG aracılı inhibisyonu hafifleten, PTPσ kama alanının membran geçirgen bir peptid taklidini ürettik. Bu peptidin haftalar boyunca sistemik olarak verilmesi, yaralanma seviyesinin altındaki omuriliğe önemli miktarda serotonerjik innervasyonu geri kazandırdı ve hem lokomotor hem de üriner sistemlerin fonksiyonel iyileşmesini kolaylaştırdı. Sonuçlarımız, PTPσ'nun yaralı yetişkin omuriliğindeki CSPG'lere bağlı olarak nöronların büyümesinin engellendiği duruma aracılık etmedeki kritik rolüne yeni bir anlayış katmanı ekliyor.

4447785

Enflamasyon, bazıları interlökin (IL)-6 aile üyelerini içeren, tam olarak anlaşılamayan mekanizmalar yoluyla yaralı dokuların yenilenmesini destekler; bu mekanizmaların ekspresyonu, inflamatuar barsak hastalıkları ve kolorektal kanser dahil olmak üzere birçok hastalıkta yükselir. Burada farelerde ve insan hücrelerinde, IL-6 sitokinleri için bir ortak reseptör olan gp130'un, gp130 efektör STAT3'ten bağımsız olarak doku büyümesini ve yenilenmesini kontrol eden transkripsiyonel düzenleyiciler olan YAP ve Notch'un aktivasyonunu tetiklediğini gösterdik. YAP ve Notch aracılığıyla, bağırsak gp130 sinyali epitelyal hücre proliferasyonunu uyarır, anormal farklılaşmaya neden olur ve mukozal erozyona karşı direnç kazandırır. gp130, YAP'yi fosforile etmek ve stabilizasyonunu ve nükleer translokasyonunu indüklemek için reseptör etkileşimi üzerine aktive edilen ilgili tirozin kinazlar Src ve Yes ile birleşir. Bu sinyal modülü, iyileşmeyi teşvik etmek ve bariyer fonksiyonunu sürdürmek için mukozal hasar durumunda güçlü bir şekilde aktive edilir.

4449524

Çeşitli büyük araştırmalarda siyahlardaki hemoglobin konsantrasyonunun, gelir durumu uygun beyazlara göre 0,5 ila 1,0 g/dl daha düşük olduğu bulunmuştur. Bu farklılık siyahların ırksal bir özelliği olabilir veya talasemi minör ve hemoglobinopatiler gibi genetik özelliklerin daha sık görülmesinden veya demir eksikliği gibi çevresel faktörlerden kaynaklanabilir. Bu ayrımın yapılmasına yardımcı olmak için, 5 ila 14 yaşları arasındaki 1718 beyaz, 741 siyah ve 315 Doğulu sağlıklı, yoksul olmayan çocuk üzerinde çok aşamalı muayenelerden (1973'ten 1975'e) elde edilen verileri analiz ettik. Tüm popülasyonda, ortalama hemoglobin konsantrasyonu siyahlarda her iki cinsiyetteki beyazlara göre ortalama 0,5 g/dl daha düşüktü (t testi, P 0,001'den az). Elektroforezle (Hgb S ve C) anormal hemoglobine sahip olanların ve ortalama korpüsküler hacmi yaşa göre normal ortalamanın %5'inden daha fazla altında olanların (hariç tutmak için) tümünün hariç tutulmasından sonra, farkların ortalaması hâlâ 0,5 g/dl'dir (P 0,001'den az). demir eksikliği veya talasemi minör). Veriler, siyahların normalde beyazlara göre ortalama 0,5 g/dl daha az hemoglobin konsantrasyonuna sahip olduğu izlenimini güçlendiriyor. Durum böyleyse, aynı normların uygulanması durumunda normal siyahların yaklaşık %10'u yanlışlıkla anemik olarak adlandırılacaktır.

4452318

Pluripotency, bir hücrenin üç embriyonik germ katmanının (ektoderm, mezoderm ve endoderm) türevlerine farklılaşma yeteneği ile tanımlanır. Pluripotent hücreler, embriyonik kök hücrelerin arketipsel türetilmesi yoluyla veya somatik hücrenin yeniden programlanması yoluyla yakalanabilir. Somatik hücreler, anahtar transkripsiyon faktörlerinin zorla ekspresyonu yoluyla bir pluripotent kök hücre (iPSC) durumu elde etmek üzere uyarılır ve farede bu hücreler, tamamen iPSC'den türetilmiş embriyolar ve fareler üreterek pluripotent hücrelere yönelik tüm gelişimsel analizlerin en katısını yerine getirebilir. Bununla birlikte, pluripotent hücrelerin ek sınıflarının olup olmadığı veya yeniden programlanmış fenotiplerin spektrumunun neleri kapsadığı bilinmemektedir. Burada, iPSC durumlarının önceden belirlenmiş tanımlarından bağımsız olarak yeniden programlanmış hücreleri tam olarak karakterize ederek somatik yeniden programlamanın alternatif sonuçlarını araştırıyoruz. Yüksek yeniden programlama faktörü ekspresyon seviyelerini koruyarak, fare embriyonik fibroblastlarının, stabil, Nanog-pozitif, alternatif bir pluripotent duruma ulaşmak için benzersiz epigenetik modifikasyonlardan geçtiğini gösterdik. Bunu yaparak pluripotent spektrumun birden fazla benzersiz hücre durumunu kapsayabileceğini kanıtlıyoruz.

4452659

Makrootofaji (bundan sonra otofaji olarak anılacaktır), çeşitli hücresel bileşenleri bozan ve insan hastalıklarıyla ilişkili olan katabolik bir membran kaçakçılığı işlemidir. Kapsamlı çalışmalar sitoplazmik materyallerin otofajik dönüşümüne odaklanmış olmasına rağmen, nükleer bileşenlerin parçalanmasında otofajinin rolü hakkında çok az şey bilinmektedir. Burada otofaji makinesinin memelilerde nükleer lamina bileşenlerinin bozulmasına aracılık ettiğini rapor ediyoruz. Otofaji membran trafiği ve substrat dağıtımında rol oynayan otofaji proteini LC3/Atg8, çekirdekte bulunur ve doğrudan nükleer lamina proteini lamin B1 ile etkileşime girer ve kromatin üzerindeki laminle ilişkili alanlara bağlanır. Bu LC3-lamin B1 etkileşimi, açlık sırasında lamin B1'i aşağı regüle etmez, ancak aktive edilmiş RAS gibi onkogenik hakaretler üzerine bozulmasına aracılık eder. Lamin B1 bozunması, lamin B1'i lizozoma ileten çekirdekten sitoplazmaya taşınmayla sağlanır. Otofajinin veya LC3-lamin B1 etkileşiminin engellenmesi, aktive edilmiş RAS'ın neden olduğu lamin B1 kaybını önler ve birincil insan hücrelerinde onkogenin neden olduğu yaşlanmayı hafifletir. Çalışmamız, otofajinin bu yeni fonksiyonunun, hücreleri tümör oluşumundan koruyan bir koruma mekanizması görevi gördüğünü öne sürüyor.

4454788

Akut enflamasyonun çözülmesini sağlayan mekanizmalara ilişkin anlayışımızdaki ilerlemeler, toplu olarak uzmanlaşmış pro-çözünme aracıları olarak adlandırılan, lipoksin, resolvin, koruyucu ve maresin ailelerini içeren yeni bir pro-çözünme lipid medyatörleri cinsini ortaya çıkarmıştır. Bu aracıların sentetik versiyonları, in vivo uygulandığında güçlü biyolojik etkilere sahiptir. Hayvan deneylerinde aracılar, anti-inflamatuar ve yeni pro-çözümleme mekanizmalarını harekete geçirir ve mikrobiyal temizliği arttırır. Enflamasyonun çözülmesinde tanımlanmış olmalarına rağmen, özel ön-çözümleme aracıları, aynı zamanda konak savunmasında, ağrıda, organ korumasında ve doku yeniden modellenmesinde de işlev gören korunmuş yapılardır. Bu İnceleme, fizyolojik fonksiyonlarını anlamamıza yardımcı olabilecek özel ön-çözünme aracılarının mekanizmalarını ve omega-3 esansiyel yağ asidi yolaklarını kapsamaktadır.

4455466

Modifiye histonların 'okuyucu' proteinler tarafından tanınması, kromatinin düzenlenmesinde kritik bir rol oynar. H3K36 trimetilasyonu (H3K36me3), RNA polimeraz II uzamasından sonra kopyalanan bölgelerdeki nükleozomlar üzerinde biriktirilir. Mayada bu işaret, kromatini nispeten baskılayıcı bir duruma sıfırlamak için epigenetik düzenleyicileri görevlendirir, böylece kriptik transkripsiyonu bastırır. Ancak H3K36me3'ün memelilerde transkripsiyon düzenlemesindeki rolü hakkında çok daha az şey bilinmektedir. Bu, histon varyantı H3.3'ün gen gövdelerine transkripsiyonla eşleştirilmiş olarak dahil edilmesiyle daha da karmaşık hale gelir. Burada aday tümör baskılayıcı ZMYND11'in H3.3 (H3.3K36me3) üzerindeki H3K36me3'ü spesifik olarak tanıdığını ve RNA polimeraz II uzamasını düzenlediğini gösterdik. Yapısal çalışmalar, PWWP alanı içindeki aromatik bir kafes tarafından trimetil-lizin bağlanmasına ek olarak, H3.3'e bağımlı tanımanın, H3.3'e özgü 'Ser 31' tortusunun oluşturulan bir kompozit cep içinde kapsüllenmesiyle aracılık ettiğini göstermektedir. ZMYND11'in tandem bromo-PWWP alanları tarafından. Kromatin immünopresipitasyonu ve ardından sekanslama, ZMYND11'in gen gövdelerinde H3K36me3 ve H3.3 ile genom çapında ortak lokalizasyonunu gösterir ve bunun doluluğu, H3.3K36me3'ün önceden biriktirilmesini gerektirir. ZMYND11 yüksek oranda eksprese edilen genlerle ilişkili olmasına rağmen, uzama aşamasında RNA polimeraz II'yi modüle ederek alışılmadık bir transkripsiyon ortak baskılayıcısı olarak işlev görür. ZMYND11, tümör hücresi büyümesi için gerekli olan bir transkripsiyonel programın baskılanması için kritik öneme sahiptir; Meme kanseri hastalarında ZMYND11'in düşük ekspresyon seviyeleri daha kötü prognozla ilişkilidir. Tutarlı bir şekilde ZMYND11'in aşırı ekspresyonu, in vitro kanser hücresi büyümesini ve farelerde tümör oluşumunu baskılar. Birlikte bu çalışma, ZMYND11'i, histon değişken aracılı transkripsiyon uzama kontrolünü tümör baskılamasına bağlayan H3K36me3'ün H3.3'e özgü bir okuyucusu olarak tanımlar.

4456756

Beyinden türetilen nörotrofik faktör (BDNF) ve onun reseptörü TrkB, bir hayvanın öğrenmesinin bir korelasyonu olan yapısal uzun vadeli güçlenme (sLTP) dahil olmak üzere birçok nöronal plastisite formu için çok önemlidir. Ancak sLTP sırasında BDNF salınımı ve TrkB aktivasyonunun gerçekleşip gerçekleşmediği, eğer öyleyse, ne zaman ve nerede olduğu bilinmiyor. Burada, TrkB için bir floresans rezonans enerji aktarımına dayalı sensör ve iki fotonlu floresans ömür boyu görüntüleme mikroskobu kullanarak, kültürlenmiş fare hipokampal dilimlerindeki CA1 piramidal nöronların tek dendritik dikenlerindeki TrkB aktivitesini izliyoruz. sLTP indüksiyonuna yanıt olarak, uyarılmış omurgada NMDAR (N-metil-d-aspartat reseptörü) ve CaMKII sinyallemesine ve postsinaptik olarak sentezlenen TrkB'nin hızlı (başlangıç ​​<1 dakika) ve sürekli (>20 dakika) aktivasyonunu bulduk. BDNF. Endojen BDNF'yi hipokampal CA1 piramidal nöronların dendritlerine ve dikenlerine lokalize etmek için elektron mikroskobu kullanarak postsinaptik BDNF'nin varlığını doğruladık. Bu bulgularla tutarlı olarak, süperekliptik pHluorine kaynaşmış BDNF kullanılarak tek dendritik dikenlerden hızlı, glutamatla kafeslenmeyen uyarılmış, zaman kilitli BDNF salınımını da gösterdik. Bu postsinaptik BDNF-TrkB sinyal yolunun hem yapısal hem de fonksiyonel LTP için gerekli olduğunu gösterdik. Birlikte, bu bulgular, uyarılmış dendritik dikenlerden NMDAR-CaMKII'ye bağımlı BDNF salınımını ve yapısal ve fonksiyonel esneklik için çok önemli olan aynı dikenler üzerinde daha sonra TrkB aktivasyonunu içeren omurga otonom, otokrin sinyalleşme mekanizmasını ortaya koymaktadır.

4457160

Pankreas kanseri, maligniteler arasında en ölümcül olanlardan biri ve büyük bir sağlık yükü olmaya devam ediyor. 100 pankreas duktal adenokarsinomunun (PDAC'ler) tam genom dizilimi ve kopya sayısı değişimi (CNV) analizini gerçekleştirdik. Gen bozulmasına yol açan kromozomal yeniden düzenlemeler yaygındı ve pankreas kanserinde önemli olduğu bilinen genleri (TP53, SMAD4, CDKN2A, ARID1A ve ROBO2) ve pankreas karsinogenezinin yeni aday sürücülerini (KDM6A ve PREX2) etkiliyordu. Yapısal varyasyon modelleri (kromozomal yapıdaki varyasyon), PDAC'leri potansiyel klinik kullanıma sahip 4 alt tipte sınıflandırmıştır: alt tipler stabil, lokal olarak yeniden düzenlenmiş, dağınık ve kararsız olarak adlandırılmıştır. Önemli bir oranda, birçoğu ilaçla kullanılabilir onkogenler (ERBB2, MET, FGFR1, CDK6, PIK3R3 ve PIK3CA) içeren, ancak bireysel hasta prevalansı düşük olan fokal amplifikasyonlar barındırıyordu. DNA bakım genlerinin (BRCA1, BRCA2 veya PALB2) inaktivasyonu ve DNA hasarı onarım eksikliğinin mutasyonel imzası ile birlikte genomik istikrarsızlık. Platin tedavisi alan 8 hastadan 5 kişiden 4'ü bu kusurlu DNA bakımı önlemlerine yanıt verdi.

4457834

Somatik hücre çekirdeklerinin oositlere transferi, embriyonik kök hücrelere tutarlı bir şekilde eşdeğer olan pluripotent kök hücrelerin ortaya çıkmasına neden olabilir ve bu da otolog hücre replasman tedavisi için umut vaat eder. Her ne kadar somatik hücrelerden pluripotent kök hücrelerin transkripsiyon faktörleriyle uyarılmasına yönelik yöntemler temel araştırmalarda yaygın olarak kullanılsa da, uyarılmış pluripotent kök hücreler ile embriyonik kök hücreler arasında klinik kullanımlarını potansiyel olarak etkileyen çok sayıda farklılık rapor edilmiştir. Hastalıklı insan deneklerin yetişkin hücrelerinden elde edilen diploid embriyonik kök hücre dizilerinin terapötik potansiyeli nedeniyle, blastokist gelişiminin ve kök hücre türevinin verimliliğini etkileyen parametreleri sistematik olarak araştırdık. Burada, hem kinaz hem de translasyon inhibitörlerinin kullanımı da dahil olmak üzere oosit aktivasyon protokolünde ve histon deasetilaz inhibitörlerinin varlığında hücre kültüründe yapılan iyileştirmelerin, blastosist aşamasına kadar gelişimi desteklediğini gösteriyoruz. Gelişimsel verimlilik, oosit donörleri arasında farklılık gösteriyordu ve oosit olgunlaşması için gerekli olan hormonal stimülasyonun gün sayısıyla ters orantılıydı, oysa gonadotropinin günlük dozu veya alınan metafaz II oositlerin toplam sayısı gelişimsel sonucu etkilemedi. Hücre füzyonu için konsantre Sendai virüsünün kullanılması, hücre içi kalsiyum konsantrasyonunda bir artışa neden olarak erken oosit aktivasyonuna neden olduğundan, kalsiyum içermeyen ortamda seyreltilmiş Sendai virüsünü kullandık. Bu değiştirilmiş nükleer transfer protokolünü kullanarak, yeni doğmuş bir bebeğin ve ilk kez tip 1 diyabetli bir yetişkinin somatik hücrelerinden diploid pluripotent kök hücre çizgileri elde ettik.

4459491

Alzheimer hastalığı demansın en yaygın şeklidir ve iki patolojik özellik ile karakterize edilir: amiloid-β plakları ve nörofibriler yumaklar. Alzheimer hastalığının amiloid hipotezi, amiloid-β peptidinin aşırı birikiminin, birikmiş hiperfosforile tau'dan oluşan nörofibriler yumaklara yol açtığını öne sürmektedir. Ancak bugüne kadar hiçbir hastalık modeli, insan nöron hücrelerini kullanarak bu iki patolojik olayı seri olarak birbirine bağlamadı. Ailesel Alzheimer hastalığı (FAD) mutasyonlarına sahip fare modelleri, amiloid-β kaynaklı sinaptik ve hafıza eksiklikleri sergiler ancak farklı nörofibriler dolaşma patolojisi de dahil olmak üzere Alzheimer hastalığının diğer önemli patolojik olaylarını tam olarak özetlemezler. Alzheimer hastalarından elde edilen insan nöronlarında yüksek düzeyde toksik amiloid-β türleri ve fosforile tau görüldü ancak amiloid-β plakları veya nörofibriler yumaklar görülmedi. Burada, β-amiloid öncü proteini ve presenilin 1'deki FAD mutasyonlarının, insan sinir kök hücresinden türetilmiş üç boyutlu (3D) kültür sisteminde amiloid-β plakları da dahil olmak üzere amiloid-β'nın güçlü hücre dışı birikimini indükleyebildiğini rapor ediyoruz. . Daha da önemlisi, FAD mutasyonlarını eksprese eden 3 boyutlu farklılaşmış nöron hücreleri, immünelektron mikroskobu ile tespit edildiği gibi, soma ve nöritlerde fosforile edilmiş tau'nun yanı sıra filamentli tau'nun yüksek seviyelerde deterjana dirençli, gümüş pozitif agregatları sergiledi. Amiloid-β üretiminin β- veya γ-sekretaz inhibitörleriyle inhibisyonu, yalnızca amiloid-β patolojisini azaltmakla kalmamış, aynı zamanda tauopatiyi de zayıflatmıştır. Ayrıca glikojen sentaz kinaz 3'ün (GSK3) amiloid-β aracılı tau fosforilasyonunu düzenlediğini de bulduk. Tek bir 3 boyutlu insan sinir hücre kültürü sisteminde amiloid-β ve tau patolojisini başarıyla özetledik. Alzheimer hastalığı patolojisini 3 boyutlu nöral hücre kültürü modelinde özetlemeye yönelik benzersiz stratejimiz, aynı zamanda diğer nörodejeneratif bozukluklara ilişkin daha kesin insan nöral hücre modellerinin geliştirilmesini kolaylaştırmaya da hizmet etmelidir.

4460880

Endotel hücreleri, endotelyal-mezenkimal geçişe uğrayarak kardiyak fibroblastların bir alt kümesine katkıda bulunur, ancak kardiyak fibroblastların endotelyal hücre kaderini benimseyip kardiyak hasardan sonra neovaskülarizasyona doğrudan katkıda bulunup bulunamayacağı bilinmemektedir. Burada, genetik kader haritası tekniklerini kullanarak, kardiyak fibroblastların, akut iskemik kalp hasarından sonra hızla endotel hücre benzeri bir fenotipi benimsediğini gösteriyoruz. Fibroblasttan türetilen endotel hücreleri, doğal endotel hücrelerinin anatomik ve fonksiyonel özelliklerini sergiler. Transkripsiyon faktör p53'ün kardiyak fibroblast kaderindeki böyle bir değişimi düzenlediğini gösterdik. Kardiyak fibroblastlarda p53 kaybı, fibroblast kaynaklı endotel hücrelerinin oluşumunu ciddi şekilde azaltır, enfarktüs sonrası damar yoğunluğunu azaltır ve kalp fonksiyonunu kötüleştirir. Tersine, kalp fibroblastlarındaki p53 yolunun uyarılması, mezenkimal-endotelyal geçişi arttırır, vaskülariteyi arttırır ve kalp fonksiyonunu iyileştirir. Bu gözlemler, mezenkimal-endotelyal geçişin, yaralı kalbin neovaskülarizasyonuna katkıda bulunduğunu ve kalp onarımını arttırmak için potansiyel bir terapötik hedefi temsil ettiğini göstermektedir.

4462079

Son kanıtlar, mevcut önerilerin üzerindeki D vitamini alımlarının daha iyi sağlık sonuçlarıyla ilişkili olabileceğini düşündürmektedir. Ancak 25-hidroksivitamin D'nin [25(OH)D] optimal serum konsantrasyonları tanımlanmamıştır. Bu derleme, kemik mineral yoğunluğu (BMD), alt ekstremite fonksiyonu, diş sağlığı ve düşme, kırık ve kolorektal kanser riski ile ilişkili olarak serum 25(OH)D konsantrasyonlarının eşik değerlerini değerlendiren çalışmalardan elde edilen kanıtları özetlemektedir. Tüm son noktalar için, 25(OH)D'nin en avantajlı serum konsantrasyonları 75 nmol/L'den (30 ng/mL) başlar ve en iyisi 90 ila 100 nmol/L (36-40 ng/mL) arasındadır. Çoğu kişide bu konsantrasyonlara, genç ve yaşlı yetişkinler için sırasıyla 200 ve 600 IU D vitamini/günlük tavsiye edilen alımlarla ulaşılamamıştır. Optimal alımları tahmin etmek amacıyla D vitamini alımlarının elde edilen serum 25(OH)D konsantrasyonlarıyla karşılaştırılması, genç yetişkinlerde kemik sağlığı ve yaşlı yetişkinlerde incelenen tüm sonuçlar için şu anda önerilen alımda bir artış olduğunu öne sürmemize yol açtı. D vitamini garantilidir. Tüm yetişkinler için > veya =1000 IU (25 mikrog) [DOZAJ HATASI DÜZELTİLDİ] D vitamini (kolekalsiferol)/gün alımı, popülasyonun en az %50'sindeki D vitamini konsantrasyonlarını 75 nmol/L'ye çıkarmak için gereklidir. Daha yüksek dozların yetişkin popülasyonun tamamı üzerindeki etkileri gelecekteki çalışmalarda ele alınmalıdır.

4462139

Ökaryotik genomlar, kendi kendine birleşen topolojik alanlar gibi üç boyutlu yapılara katlanır; bunların sınırları, uzun menzilli etkileşimler için gerekli olan kohezin ve CCCTC bağlama faktörü (CTCF) açısından zenginleştirilmiştir. Lokal kromatin etkileşimlerinin, kromatin liflerinin yüksek dereceli katlanmasını nasıl yönettiği ve bu süreçte kohezinin işlevi tam olarak anlaşılmamıştır. Burada, küçük boyutuna rağmen diğer ökaryotlarda bulunan temel özellikleri sergileyen Schizosaccharomyces pombe genomunun yüksek çözünürlüklü organizasyonunu keşfetmek için genom çapında kromatin konformasyon yakalama (Hi-C) analizi gerçekleştiriyoruz. Yabani tip ve mutant suşlara ilişkin analizlerimiz, kromozom mimarisinin ve genom organizasyonunun temel unsurlarını ortaya koyuyor. Kromozom kollarında, küçük kromatin bölgeleri lokal olarak etkileşime girerek 'kürecikler' oluşturur. Bu özellik, kardeş kromatid uyumundaki rolünden farklı bir kohezin fonksiyonu gerektirir. Kohezin kürecik sınırlarında zenginleşir ve kaybı yerel kürecik yapılarının ve küresel kromozom bölgelerinin bozulmasına neden olur. Buna karşılık, perisentromerik ve subtelomerik alanlar da dahil olmak üzere belirli bölgelere kohezin yükleyen heterokromatin, globül oluşumu için vazgeçilmezdir ancak yine de genom organizasyonunu etkiler. Heterokromatinin, sentromerlerde kromatin lifi sıkışmasına aracılık ettiğini ve sentromer-proksimal bölgelerde belirgin kollar arası etkileşimleri teşvik ederek uygun genom organizasyonu için hayati önem taşıyan yapısal kısıtlamalar sağladığını gösterdik. Heterokromatin kaybı, kromozomlar üzerindeki kısıtlamaları gevşeterek kromozom içi ve kromozomlar arası etkileşimlerde artışa neden olur. Analizlerimiz birlikte, nükleer işlevleri koordine etmek için hayati önem taşıyan yüksek dereceli kromozom organizasyonunu yönlendiren temel genom katlama ilkelerini ortaya çıkarıyor.

4462155

Korku anıları, hayvanların tehlikeden kaçınmasına olanak tanır ve böylece hayatta kalma şanslarını artırır. Korku anıları öğrenmeden uzun süre sonra hatırlanabilir, ancak geri çağırma devrelerinin zamanla nasıl değiştiği hakkında çok az şey bilinmektedir. Burada, öğrenmeden sonra erken (0,5 saat, 6 saat) değil, geç (24 saat, 7 gün, 28 gün) işitsel koşullu korkunun geri kazanılması için sıçanların dorsal orta hat talamusunun gerekli olduğunu gösteriyoruz. Bununla tutarlı olarak, dorsal orta hat talamusunun bir alt bölgesi olan talamusun paraventriküler çekirdeği (PVT), yalnızca geç zaman noktalarında artan c-Fos ekspresyonu gösterdi; bu, PVT'nin korkuyu geri almak için kademeli olarak toplandığını gösteriyor. Buna göre, PVT nöronlarının koşullu ton tepkileri eğitimden sonraki zamanla arttı. Korkunun geri getirilmesi için gerekli olan prelimbik (PL) prefrontal korteks, PVT'ye yoğun projeksiyonlar gönderir. Geç zaman noktalarında geri alma, PVT'ye projeksiyon yapan PL nöronlarını aktive etti ve bu projeksiyonların optogenetik susturulması, erken olmasa da geç zaman noktalarında geri alımı bozdu. Buna karşılık, bazolateral amigdalaya verilen PL girdilerinin susturulması, geri alma devrelerinde zamana bağlı bir değişime işaret ederek, erken fakat geç olmayan zaman noktalarında geri almayı engelledi. Geç zaman noktalarında geri alma aynı zamanda amigdalanın merkezi çekirdeğine projeksiyon yapan PVT nöronlarını da aktive etti ve bu projeksiyonları erken değil geç zaman noktalarında susturmak, korkunun kalıcı bir şekilde azalmasına neden oldu. Bu nedenle PVT, uzun vadeli korku anılarının geri getirilmesi ve sürdürülmesi için kortiko-amigdalar ağlara katılan önemli bir talamik düğüm görevi görebilir.

4462419

Fare embriyonik kök (ES) hücreleri, blastosistlerin iç hücre kütlesinden izole edilir ve lösemi inhibitör faktör (LIF) ve küçük molekül inhibisyonu ile ekzojen uyarım sağlanarak saf iç hücre kütlesi benzeri konfigürasyonda in vitro olarak korunabilir. ERK1/ERK2 ve GSK3β sinyali (2i/LIF koşulları olarak adlandırılır). Saf pluripotensitenin ayırt edici özellikleri arasında, uzak güçlendirici tarafından Oct4 (Pou5f1 olarak da bilinir) transkripsiyonunun sürülmesi, inaktivasyon öncesi bir X kromozomu durumunun korunması ve DNA metilasyonunda ve gelişimsel düzenleyici gen promotörleri üzerinde H3K27me3 baskılayıcı kromatin işareti birikiminde küresel azalma yer alır. 2i/LIF'in geri çekilmesi üzerine saf fare ES hücreleri, implantasyon sonrası epiblastınkine benzeyen hazırlanmış bir pluripotent duruma doğru sürüklenebilir. İnsan ES hücreleri, saf fare ES hücreleriyle çeşitli moleküler özellikleri paylaşsa da, aynı zamanda hazırlanmış fare epiblast kök hücreleriyle (EpiSC'ler) çeşitli epigenetik özellikleri de paylaşırlar. Bunlar arasında, OCT4 ekspresyonunu sürdürmek için proksimal güçlendirici elemanın baskın kullanımı, çoğu kadın insan ES hücresinde X kromozomu inaktivasyonuna yönelik belirgin eğilim, DNA metilasyonunda artış ve belirgin H3K27me3 birikimi ve soy düzenleyici genler üzerinde iki değerlikli alan edinimi yer alır. Fare ES hücrelerinde karakterize edilenlere eşdeğer moleküler ve fonksiyonel özelliklere sahip, in vitro insan temel durum saf pluripotensitesini oluşturmanın fizibilitesi henüz tanımlanmayı beklemektedir. Burada, genetik olarak değiştirilmemiş insan saf pluripotent kök hücrelerinin halihazırda oluşturulmuş prime edilmiş insan ES hücrelerinden, indüklenmiş pluripotent kök (iPS) hücre yeniden programlaması yoluyla somatik hücrelerden veya doğrudan blastosistlerden türetilmesini kolaylaştıran tanımlanmış koşullar oluşturuyoruz. Burada doğrulanan yeni saf pluripotent hücreler, fare saf ES hücrelerine oldukça benzeyen ve geleneksel hazırlanmış insan pluripotent hücrelerinden farklı olan moleküler özellikleri ve fonksiyonel özellikleri korur. Bu, insan saf iPS hücrelerinin fare morulalarına mikroenjekte edilmesinin ardından organogenez uygulanan türler arası kimerik fare embriyolarının üretilmesindeki yetkinliği de içerir. Toplu olarak, bulgularımız rejeneratif tıp, hastaya özel iPS hücre hastalığı modellemesi ve in vitro ve in vivo erken insan gelişimi çalışmaları için yeni yollar oluşturuyor.

4462777

İnsan tümörleri tipik olarak dikkate değer sayıda somatik mutasyon barındırır. Bu mutasyonları içeren peptitler, majör doku uyumluluk kompleksi sınıf I molekülleri (MHCI) üzerinde sunulursa, adaptif bağışıklık sistemi tarafından 'kendinden olmayan' neo-antijenler olarak tanınmaları gerektiğinden potansiyel olarak immünojenik olabilir. Son çalışmalar, mutant peptidlerin T hücresi epitopları olarak görev yapabileceğini doğruladı. Bununla birlikte, az sayıda mutant epitop tarif edilmiştir, çünkü bunların keşfi, hastaya tümör sızan lenfositlerin, tümör ekzom dizilimi sonrasında oluşturulan antijen kütüphanelerini tanıma yetenekleri açısından zahmetli bir taramayı gerektirmiştir. Genel özelliklerini karakterize ederek immünojenik mutant peptidlerin keşfini basitleştirmeye çalıştık. Yaygın olarak kullanılan iki fare tümör modelinde neo-epitopları tanımlamak için tam ekzom ve transkriptom dizileme analizini kütle spektrometrisiyle birleştiren bir yaklaşım geliştirdik. Tanımlanan >1.300 amino asit değişikliğinden yaklaşık %13'ünün MHCI'ye bağlanacağı tahmin edildi ve bunların küçük bir kısmı kütle spektrometresi ile doğrulandı. Peptitler daha sonra yapısal olarak MHCI'ye bağlı olarak modellendi. Çözücüye maruz kalan ve dolayısıyla T hücresi antijen reseptörleri tarafından erişilebilen mutasyonların immünojenik olduğu tahmin edildi. Farelerin aşılanması, tahmin edilen immünojenik peptitlerin her birinin terapötik açıdan aktif T hücresi tepkileri vermesiyle yaklaşımı doğruladı. Tahminler aynı zamanda aşılamadan önce ve sonra anti-tümör T hücresi tepkisinin kinetiğini ve dağılımını izlemek için kullanılabilecek peptit-MHCI dekstramerlerinin üretilmesini de mümkün kıldı. Bu bulgular, uygun bir tahmin algoritmasının, kanser hastalarında kişiselleştirilmiş aşıların geliştirilmesinin yanı sıra T hücresi yanıtlarının farmakodinamik izlenmesi için de bir yaklaşım sağlayabileceğini göstermektedir.

4462919

RNA kılavuzlu endonükleaz Cas9, çok yönlü bir genom düzenleme platformu olarak ortaya çıktı. Bununla birlikte, Streptococcus pyogenes'ten (SpCas9) yaygın olarak kullanılan Cas9'un boyutu, oldukça çok yönlü adeno-ilişkili virüs (AAV) dağıtım aracını kullanan temel araştırma ve terapötik uygulamalar için kullanımını sınırlamaktadır. Burada, altı küçük Cas9 ortologunu karakterize ediyoruz ve Staphylococcus aureus'tan (SaCas9) Cas9'un, 1 kilobazdan daha kısa olmasına rağmen SpCas9'unkine benzer verimliliklerle genomu düzenleyebildiğini gösteriyoruz. SaCas9'u ve onun tek kılavuzlu RNA ekspresyon kasetini tek bir AAV vektörüne paketledik ve fare karaciğerindeki kolesterol düzenleyici gen PCSK9'u hedefledik. Enjeksiyondan sonraki bir hafta içinde, serum PCSK9 ve toplam kolesterol seviyelerinde önemli azalmaların eşlik ettiği >%40'lık gen modifikasyonu gözlemledik. BLESS kullanarak SaCas9 ve SpCas9'un genom çapında hedefleme özgüllüğünü daha da değerlendiriyoruz ve SaCas9 aracılı in vivo genom düzenlemenin etkili ve spesifik olma potansiyeline sahip olduğunu gösteriyoruz.

4463588

ARKA PLAN Egzersiz yoğunluğunun özellikle obez ergenlerde kardiyovasküler kondisyon ve vücut kompozisyonunu nasıl etkilediği hakkında çok az şey bilinmektedir. AMAÇ Amacımız fiziksel antrenman yoğunluğunun obez ergenlerin kardiyovasküler kondisyon, vücut yağ yüzdesi (%BF) ve visseral yağ dokusu (KDV) üzerindeki etkilerini belirlemekti. TASARIM 13-16 yaşlarındaki obezlere (n = 80) 1) iki haftada bir yaşam tarzı eğitimi (LSE), 2) LSE + orta yoğunlukta beden eğitimi veya 3) LSE + yüksek yoğunlukta beden eğitimi verildi. Müdahale 8 ay sürdü. Haftada 5 gün beden eğitimi verildi ve beden eğitimi gruplarındaki tüm denekler için hedef enerji harcaması 1047 kJ (250 kcal)/seans oldu. Kardiyovasküler kondisyon çok aşamalı bir koşu bandı testiyle, %BF çift enerjili X-ışını absorpsiyometrisiyle ve KDV manyetik rezonans görüntülemeyle ölçüldü. SONUÇLAR Yüksek yoğunluklu fiziksel antrenman grubunda kardiyovasküler kondisyondaki artış, ancak orta yoğunluklu grupta değil, yalnızca LSE grubundaki artıştan önemli ölçüde daha fazlaydı (P = 0.009); 3 grubun başka hiçbir karşılaştırması anlamlı değildi. Tek başına LSE grubuyla karşılaştırıldığında, her iki fiziksel antrenman grubundaki deneklerden oluşan ve haftada > veya=2 gün antrenman seanslarına katılan deneklerden oluşan bir grup, kardiyovasküler kondisyonda (P < 0.001), %BF'de (P = 0.001) ve olumlu değişiklikler gösterdi. KDV (P = 0,029). Vücut kompozisyonunu geliştirmede yüksek yoğunluklu fiziksel antrenmanın orta yoğunluklu fiziksel antrenmandan daha etkili olduğuna dair hiçbir kanıt bulamadık. SONUÇLAR Obez ergenlerin kardiyovasküler kondisyonu, özellikle yüksek yoğunluklu fiziksel antrenman olmak üzere fiziksel antrenmanla önemli ölçüde iyileştirildi. Fiziksel antrenman aynı zamanda hem iç organ hem de toplam vücut yağlanmasını da azalttı, ancak fiziksel antrenman yoğunluğunun net bir etkisi yoktu.

4463811

Diyette enerji kısıtlaması, memelilerin ömrünü deneysel olarak uzatmak için yaygın olarak kullanılan bir araç olmuştur. Burada, tek bir diyet bileşeni olan esansiyel amino asit L-metiyonin konsantrasyonunun yaşam boyu azaltılmasının, diyetin %0,86'sından %0,17'sine düşürülmesinin, erkek Fischer 344 sıçanlarının ömrünün %30 daha uzun olmasıyla sonuçlandığını rapor ediyoruz. Metiyonin kısıtlaması büyümeyi tamamen ortadan kaldırdı, ancak gıda alımı aslında vücut ağırlığı bazında daha fazlaydı. Yaşamın erken dönemlerinde enerji tüketimine ilişkin çalışmalar, %0,17 metioninle beslenen hayvanların enerji alımının, kendi boyutlarındaki hayvanlar için normale yakın olduğunu, ancak hayvan başına tüketimin, çok daha büyük olan %0,86 metiyoninle beslenen sıçanların enerji alımının altında olduğunu gösterdi. %0,17 metiyoninle beslenen sıçanların enerji alımının arttırılması, büyüme hızlarını arttırmada başarısız olurken, %0,85 metiyoninle beslenen sıçanları, %0,17 metiyoninle beslenen hayvanların gıda alımıyla sınırlamak, büyümeyi maddi olarak azaltmadı; bu, gıda kısıtlamasının bir sorun olmadığını gösterir. Bu deneylerde yaşam süresinin uzatılmasındaki faktör. Metiyonin metabolizması ve kullanımının biyokimyasal olarak iyi tanımlanmış yolları, bu spesifik diyet kısıtlamasına bağlı yaşam süresinin uzamasının altında yatan kesin mekanizmaların ortaya çıkarılması için potansiyel sunar.

4464565

Epikateşin ve polifenolik kakao ekstraktının insan kolon adenokarsinomu hücre dizisi Caco-2'deki etkisini incelemek için fonksiyonel bir genomik analiz gerçekleştirdik. Clontech'in iki kopya halinde 406 gen içeren spesifik İnsan Hematoloji/İmmünoloji cDNA dizileri kullanıldı. Diferansiyel olarak eksprese edilen genler, her tedaviden sonra elde edilen değerin kontrol hücrelerine oranı olarak hesaplanan ekspresyon seviyelerine göre sınıflandırıldı; istatistiksel anlamlılık P < 0,05 (yukarı regüle edilmiş: oran > 1,5; aşağı regüle edilmiş: oran < 0,6) . Epikateşin tedavisi 21 genin ekspresyonunu azalttı ve 24 genin ekspresyonunu artırdı. Kakao polifenolik ekstraktı ile inkübasyonun ardından 24 gen az eksprese edildi ve 28 gen aşırı eksprese edildi. Ferritin ağır polipeptit 1 (FTH1), mitojenle aktifleşen protein kinaz kinaz 1 (MAPKK1), sinyal transdüseri ve transkripsiyon aktivatörü 1 (STAT1) ve epikateşin ile inkübasyon sonrasında topoizomeraz 1 ve miyeloid lösemi faktörü 2'nin ekspresyonundaki değişiklikler ( MLF2), CCAAT/güçlendirici bağlayıcı protein gama (C/EBPG), MAPKK1, ATP bağlayıcı kaset, alt aile c üyesi 1 (MRP1), STAT1, topoizomeraz 1 ve inkübasyon sonrasında kusurlu onarım 1'i (XRCC1) tamamlayan x-ışını onarımı kakao polifenolik ekstraktı RT-PCR ile doğrulandı. Epikateşin veya kakao ekstraktı ile inkübasyonun ardından MAPKK1, STAT1, MRP1 ve topoizomeraz 1 için haberci RNA seviyelerindeki değişiklikler, Western blotlama ile protein seviyesinde daha da doğrulandı. Oksidatif strese hücresel yanıtta rol oynayan STAT1, MAPKK1, MRP1 ve FTH1 genlerinin ekspresyonundaki değişiklikler, kakao flavonoidlerinin antioksidan özellikleriyle uyum içindedir. Ek olarak C/EBPG, topoizomeraz 1, MLF2 ve XRCC1 ekspresyonundaki değişiklikler, flavonoidlerin moleküler düzeyde yeni etki mekanizmalarına işaret etmektedir.

4465608

Güçlendiriciler, çok hücreli ökaryotlarda gen ifadesinin doğru zamansal ve hücre tipine özgü aktivasyonunu kontrol eder. Özelliklerini, düzenleyici faaliyetlerini ve hedeflerini bilmek, farklılaşma ve homeostazisin düzenlenmesini anlamak için çok önemlidir. Burada aktif, in vivo kopyalanmış güçlendiricilerin bir atlasını üretmek için insan dokularının ve hücre tiplerinin çoğunu kapsayan FANTOM5 numune panelini kullanıyoruz. Arttırıcıların, CpG açısından zayıf haberci RNA destekleyicileri ile aynı özellikleri paylaştıklarını, ancak çift yönlü, eksozoma duyarlı, nispeten kısa eklenmemiş RNA'lar ürettiklerini ve bunların üretiminin güçlendirici aktiviteyle güçlü bir şekilde ilişkili olduğunu gösterdik. Atlas, farklı hücreler arasındaki düzenleyici programları benzeri görülmemiş bir derinlikte karşılaştırmak, hastalıkla ilişkili düzenleyici tek nükleotid polimorfizmlerini tanımlamak ve hücre tipine özgü ve her yerde bulunan güçlendiricileri sınıflandırmak için kullanılır. Ekspresyon modellerinden ziyade gen ekspresyon gücünü açıklayan güçlendirici fazlalığının faydasını daha da araştırıyoruz. Çevrimiçi FANTOM5 güçlendirici atlası, hücre tipine özgü güçlendiriciler ve gen düzenlemesi üzerine çalışmalar için benzersiz bir kaynağı temsil eder.

4465735

Memelilerin gastrointestinal yolları, bağırsak patojenlerine karşı kolonizasyon direnci de dahil olmak üzere sağlığa katkıda bulunan yüzlerce mikrobiyal tür tarafından kolonize edilir. Birçok antibiyotik bağırsak mikrobiyal topluluklarını yok eder ve bağırsak patojenlerine karşı duyarlılığı artırır. Bunlar arasında antibiyotiğe bağlı ishalin önemli bir nedeni olan Clostridium difficile, hastanede yatan hastalarda morbidite ve mortaliteyi büyük ölçüde artırmaktadır. Hangi bağırsak bakterilerinin C. difficile enfeksiyonuna direnç sağladığı ve bunların in vivo inhibitör mekanizmaları belirsizliğini koruyor. Burada, fareleri farklı mikrobiyota değişiklikleriyle sonuçlanan ve C. difficile'ye karşı çeşitli duyarlılığa yol açan farklı antibiyotiklerle tedavi ederek spesifik bakteriyel taksonların kaybını enfeksiyon gelişimiyle ilişkilendiriyoruz. Hastanede yatan hastaların mikrobiyotasının analiziyle desteklenen matematiksel modelleme, farelerde ve insanlarda yaygın olan dirençle ilişkili bakterileri tanımlar. Bu platformları kullanarak, bir safra asidi 7a-dehidroksile edici bağırsak bakterisi olan Clostridium scindens'in C. difficile enfeksiyonuna karşı dirençle ilişkili olduğunu ve uygulama üzerine ikincil safra asidine bağlı bir şekilde enfeksiyona karşı direnci arttırdığını belirledik. Fare modellerini, klinik çalışmaları, metagenomik analizleri ve matematiksel modellemeyi içeren bir iş akışı kullanarak, klinik açıdan anlamlı bir mikrobiyom eksikliğini düzelten bir probiyotik adayı belirliyoruz. Bu bulguların, hedeflenen antimikrobiyallerin rasyonel tasarımının yanı sıra C. difficile enfeksiyonu riski taşıyan bireylere yönelik mikrobiyom bazlı teşhis ve tedavi yöntemlerine yönelik çıkarımları vardır.

4465762

Ökaryotik protein kodlayan genlerin transkripsiyonu, RNA polimeraz (Pol) II başlatma kompleksinin birleşmesi ve promotör DNA'nın açılmasıyla başlar. Burada sırasıyla 8,8 Å ve 3,6 Å çözünürlüklerde kapalı ve açık DNA içeren maya başlatma komplekslerinin kriyo-elektron mikroskobu (kriyo-EM) yapılarını rapor ediyoruz. DNA, TATA kutusu bağlayıcı protein TBP ile transkripsiyon faktörleri TFIIA, TFIIB, TFIIE ve TFIIF arasındaki etkileşimler ağı tarafından Pol II yarığı üzerinde konumlandırılır ve tutulur. DNA açılması Pol II kelepçesinin ucu ve TFIIE 'genişletilmiş kanatlı sarmal' alanı çevresinde meydana gelir ve TFIIH'nin yokluğunda meydana gelebilir. DNA şablon ipliğinin aktif merkeze yüklenmesi, TFIIE 'E-şerit' alanının allosterik bağlanmasıyla tetiklenen engelleyici protein elemanlarının hareketleri ile kolaylaştırılabilir. Sonuçlar, anahtar bir olayla, açık promotör DNA'nın genişletilmiş protein-protein ve protein-DNA temasları tarafından yakalanmasıyla transkripsiyonun başlatılması için birleşik bir model önermektedir.

4467129

Nöroblastomda kötü prognoz, MYCN'nin genetik amplifikasyonu ile ilişkilidir. MYCN'nin kendisi, çok sayıda kanserde rol oynayan mikroRNA'ların tümör baskılayıcı ailesi olan let-7'nin hedefidir. Let-7 biyogenezinin bir inhibitörü olan LIN28B'nin nöroblastomada aşırı eksprese edildiği ve MYCN'yi düzenlediği rapor edilmiştir. Ancak burada, let-7'nin baskısının kaldırılmasına rağmen, MYCN ile güçlendirilmiş nöroblastoma hücre hatlarında LIN28B'nin vazgeçilmez olduğunu gösterdik. Ayrıca, güçlendirilmiş hastalıktaki MYCN haberci RNA seviyelerinin son derece yüksek ve LIN28B'nin vazgeçilebilirliğini uzlaştıran let-7'yi süngerlemek için yeterli olduğunu gösterdik. Let-7'nin genetik kaybının nöroblastomda yaygın olduğunu, MYCN amplifikasyonu ile ters ilişkili olduğunu ve bağımsız olarak kötü sonuçlarla ilişkili olduğunu, nöroblastomdaki kromozomal kayıp modelleri için bir gerekçe sağladığını bulduk. LIN28B, MYCN süngerleşmesi veya genetik kaybın neden olduğu let-7 bozulmasının, kanser patogenezi için geniş etkileri olan birleştirici bir nöroblastom gelişimi mekanizması olduğunu öneriyoruz.

4468861

Bağışıklık kontrol noktası inhibitörleri etkileyici klinik yanıtlarla sonuçlanır, ancak en iyi sonuçlar birbirleriyle ve diğer tedavilerle kombinasyon gerektirecektir. Bu, artıklık ve direnç mekanizmaları hakkında temel soruları gündeme getiriyor. Burada, bir anti-CTLA4 antikoru (anti-CTLA4) ve radyasyonla tedavi edilen metastatik melanomlu hastaların bir alt grubunda majör tümör gerilemelerini rapor ediyoruz ve bu etkiyi fare modellerinde yeniden üretiyoruz. Kombine tedavi ışınlanmış ve ışınlanmamış tümörlerde yanıtları iyileştirse de direnç yaygındı. Farelerin tarafsız analizleri, direncin melanom hücrelerinde PD-L1'in yukarı regülasyonundan kaynaklandığını ve T hücresi tükenmesi ile ilişkili olduğunu ortaya çıkardı. Buna göre melanom ve diğer kanser türlerinde optimal yanıt radyasyon, anti-CTLA4 ve anti-PD-L1/PD-1 gerektirir. Anti-CTLA4 ağırlıklı olarak T-düzenleyici hücreleri (Treg hücreleri) inhibe eder, böylece CD8 T-hücresinin Treg'e (CD8/Treg) oranını artırır. Radyasyon, intratümöral T hücrelerinin T hücresi reseptörü (TCR) repertuarının çeşitliliğini arttırır. Anti-CTLA4 birlikte T hücrelerinin genişlemesini desteklerken radyasyon, genişletilmiş periferik klonların TCR repertuarını şekillendirir. PD-L1 blokajının eklenmesi, CD8/Treg oranındaki depresyonu hafifletmek için T hücresi tükenmesini tersine çevirir ve oligoklonal T hücresi genişlemesini daha da teşvik eder. Farelerden elde edilen sonuçlara benzer şekilde, klinik denememizde yüksek PD-L1 gösteren melanomlu hastalar radyasyon artı anti-CTLA4'e yanıt vermedi, kalıcı T hücresi tükenmesi gösterdi ve hızla ilerledi. Böylece, melanom hücreleri üzerindeki PD-L1, tümörlerin anti-CTLA4 bazlı tedaviden kaçmasına izin verir ve radyasyon, anti-CTLA4 ve anti-PD-L1 kombinasyonu, farklı mekanizmalar yoluyla tepkiyi ve bağışıklığı destekler.

4469125

Anoreksijenik a-melanosit uyarıcı hormonun (a-MSH) ve oreksijenik Agouti ile ilişkili proteinin (AgRP) ayrı hipotalamik kavisli nöronlardan merkezi sinir sistemindeki ortak hedef bölgelere düzenlenmiş salınımı, enerji homeostazisinin düzenlenmesinde temel bir role sahiptir. Her iki peptit de melanokortin-4 reseptörüne (MC4R) yüksek afiniteyle bağlanır; Mevcut veriler, a-MSH'nin, reseptörü Gas sinyal yoluna bağlayan bir agonist olduğunu, AgRP'nin ise a-MSH bağlanmasını bloke etmek için rekabetçi bir şekilde bağlandığını ve reseptörün ligand-mimetik amino terminal alanının aracılık ettiği yapısal aktiviteyi bloke ettiğini göstermektedir. Burada, farelerde, hipotalamusun paraventriküler çekirdeğindeki (PVN) nöronların ateşleme aktivitesinin a-MSH ve AgRP tarafından düzenlenmesine, MC4R'nin ligand kaynaklı bağlanmasıyla içe doğru doğrultucu potasyumun kapatılmasıyla Gαs sinyallemesinden bağımsız olarak aracılık edilebileceğini gösterdik. kanal, Kir7.1. Ayrıca AgRP, a-MSH bağlanmasını inhibe etmesinden bağımsız olarak MC4R'ye bağlanarak ve Kir7.1'i açarak nöronları hiperpolarize eden taraflı bir agonisttir. Sonuç olarak, Kir7.1 sinyallemesi, PVN içindeki enerji homeostazisinin melanokortin aracılı düzenlenmesinde merkezi bir rol oynuyor gibi görünmektedir. MC4R'nin Kir7.1'e bağlanması, MC4R'nin gen dozaj etkisi ve AgRP'nin gıda alımı üzerindeki sürekli etkileri dahil olmak üzere melanokortin sinyallemesi yoluyla enerji homeostazisinin kontrolünün olağandışı yönlerini açıklayabilir.

4474874

ARKA PLAN VE AMAÇLAR Ghrelin, gastroprokinetik etkileri olan oreksijenik bir peptiddir. Streptozotosin (STZ) kaynaklı diyabeti olan farelerde hiperfaji, gastrik boşalmada değişiklik ve plazma ghrelin seviyelerinde artış görülür. Burada grelinin nedensel rolünü, grelin reseptörü devre dışı bırakılmış (büyüme hormonu salgılatıcı reseptör [GHS-R](-/-)) ve vahşi tip (GHS-R(+/+)) farelerdeki değişiklikleri STZ ile indüklenenlerle karşılaştırarak araştırdık. diyabet. YÖNTEMLER Mide boşalması [(13)C]oktanoik asit nefes testi ile ölçüldü. Nöropeptid Y'nin (NPY), agouti ile ilişkili peptidin (AgRP) ve proopiomelanokortinin haberci RNA (mRNA) ifadesi, gerçek zamanlı ters transkripsiyon polimeraz zincir reaksiyonu ile ölçüldü. Fundik düz kas şeritlerinde elektriksel alan uyarımı ile nöral kasılmalar ortaya çıkarıldı. BULGULAR Diyabet her iki genotipte de plazma ghrelin düzeylerini benzer oranda artırdı. Hiperfaji, 12. ve 21. günler arasında GHS-R(+/+) farelerinde GHS-R(-/-) farelere göre daha belirgindi. NPY ve AgRP mRNA ekspresyonundaki artışlar diyabetik GHS-R(-/-)'de daha az belirgindi 15. günden itibaren GHS-R(+/+) farelere kıyasla proopiomelanokortin mRNA seviyelerindeki azalmalar her iki genotipte de benzerdi. Mide boşalması her iki genotipte de 16. günden itibaren benzer ölçüde hızlandı. Diyabetik GHS-R(+/+) ve GHS-R(-/-) farelerin fundus düz kas şeritlerinde nöronal gevşemeler azalırken kasılmalar azaldı. arttırıldı; bu artış muskarinik ve taşikinerjik reseptörlerin artan afinitesi ile ilişkiliydi. SONUÇLAR Diyabetik hiperfaji, ghrelin sinyal yolunun hipotalamusta NPY ve AgRP ekspresyonunu etkilediği merkezi mekanizmalar tarafından düzenlenir. Ghrelin sinyalinden etkilenmeyen mide boşalmasının hızlanması diyabetik hiperfajinin nedeni değildir ve muhtemelen fundustaki lokal kasılma değişikliklerini içerir.

4483571

ARKA PLAN Herhangi bir serum 25-hidroksikolekalsiferol konsantrasyonunu elde etmek veya sürdürmek için gereken kolekalsiferol girdileri, özellikle vitaminin olası fizyolojik tedarikiyle karşılaştırılabilir aralıklar dahilinde bilinmemektedir. AMAÇLAR Amaçlar, kararlı durum kolekalsiferol girdisi ile sonuçta ortaya çıkan serum 25-hidroksikolekalsiferol konsantrasyonu arasındaki niceliksel ilişkiyi kurmak ve vücut doku depolarındaki kolekalsiferol rezervleri tarafından karşılanan kış aylarında günlük gereksinimin oranını tahmin etmekti. TASARIM Kolekalsiferol, Omaha'da (41.2 derece Kuzey enlemi) yaşayan 67 erkeğe kış boyunca yaklaşık 20 hafta boyunca 0, 25, 125 ve 250 mikrog kolekalsiferol etiketli kontrollü oral dozlarda günlük olarak uygulandı. Serum 25-hidroksikolekalsiferol konsantrasyonunun zaman süreci, tedavi süresi boyunca aralıklarla ölçüldü. SONUÇLAR 70,3 nmol/L'lik ortalama başlangıç ​​değerinden itibaren, serum 25-hidroksikolekalsiferolün denge konsantrasyonları kış aylarında dozla doğru orantılı olarak her ilave 1 mikrog kolekalsiferol girişi için yaklaşık 0,70 nmol/L'lik bir eğimle değişti. Çalışmadan önce (yani sonbaharda) mevcut olan serum 25-hidroksikolekalsiferol konsantrasyonunu sürdürmek için gereken hesaplanan oral girdi 12,5 mikrog (500 IU)/gün iken tüm kaynaklardan (takviye, gıda, doku depoları) gelen toplam miktar Başlangıçtaki 25-hidroksikolekalsiferol konsantrasyonunun sürdürülmesi için gereken konsantrasyonun yaklaşık 96 mikrog (yaklaşık 3800 IU)/gün olduğu tahmin edilmiştir. Farklı olarak doku depoları yaklaşık 78-82 mikrog/gün sağlıyordu. SONUÇLAR Sağlıklı erkekler günde 3000-5000 IU kolekalsiferol kullanıyor gibi görünmektedir ve görünüşe göre kış kolekalsiferol ihtiyacının >%80'ini önceki yaz aylarında güneş kaynaklarından kutanöz olarak sentezlenen birikimlerle karşılamaktadır. Mevcut önerilen D vitamini girdileri, önemli miktarda deride D vitamini üretimi olmadığında serum 25-hidroksikolekalsiferol konsantrasyonunu korumak için yetersizdir.

4489217

ARKA PLAN Tümör içi heterojenite, tümör evrimini ve adaptasyonunu teşvik edebilir ve tek tümör biyopsi örneklerinden elde edilen sonuçlara bağlı olan kişiselleştirilmiş tıp stratejilerini engelleyebilir. YÖNTEMLER İntratümör heterojenliğini incelemek için, primer böbrek karsinomlarından ve ilişkili metastatik bölgelerden elde edilen çok sayıda mekansal olarak ayrılmış numuneler üzerinde ekzom dizilimi, kromozom aberasyon analizi ve ploidi profili oluşturduk. İmmünhistokimyasal analiz, mutasyon fonksiyonel analizi ve haberci RNA ekspresyonunun profilini kullanarak tümör içi heterojenitenin sonuçlarını karakterize ettik. SONUÇLAR Filogenetik yeniden yapılanma, dallanmış evrimsel tümör büyümesini ortaya çıkardı; tüm somatik mutasyonların %63 ila 69'u her tümör bölgesinde tespit edilemedi. Rapamisin (mTOR) kinazın memeli hedefinin oto-inhibitör alanı içindeki, in vivo S6 ve 4EBP fosforilasyonu ve in vitro mTOR kinaz aktivitesinin kurucu aktivasyonu ile ilişkili olan bir mutasyon için intratümör heterojenliği gözlendi. Fonksiyon kaybında birleşen çoklu tümör baskılayıcı genler için mutasyonel tümör içi heterojenite görüldü; SETD2, PTEN ve KDM5C, tek bir tümör içinde çok sayıda farklı ve mekansal olarak ayrılmış etkisizleştirici mutasyonlara maruz kaldı; bu, yakınsak fenotipik evrimi düşündürüyor. Aynı tümörün farklı bölgelerinde iyi ve kötü prognozun gen ekspresyonu imzaları tespit edildi. Alelik kompozisyon ve ploidi profilleme analizi, farklı alelik dengesizlik profilleri barındıran dört tümörden alınan 30 tümör numunesinden 26'sı ve dört tümörden ikisinde ploidi heterojenliği ile kapsamlı intratümör heterojenliğini ortaya çıkardı. SONUÇLAR Tümör içi heterojenite, tek tümör biyopsi örneklerinden gösterilen tümör genomik manzarasının küçümsenmesine yol açabilir ve kişiselleştirilmiş ilaç ve biyobelirteç geliştirmede büyük zorluklar ortaya çıkarabilir. Heterojen protein fonksiyonuyla ilişkili intratümör heterojenliği, Darwinci seçilim yoluyla tümör adaptasyonunu ve terapötik başarısızlığı teşvik edebilir. (Tıbbi Araştırma Konseyi ve diğerleri tarafından finanse edilmiştir.).

4492358

Bebek bağırsak mikrobiyomunun kolonizasyon süreci kaotik olarak adlandırılmıştır, ancak bu görüş mikrobiyomu etkileyen faktörlerin yetersiz belgelenmesini yansıtıyor olabilir. Yaşam olaylarını mikrobiyom bileşimi ve işleviyle ilişkilendirmek için insan bebeğinin bağırsak mikrobiyomunun bir araya getirilmesine ilişkin 2,5 yıllık bir vaka çalışması gerçekleştirdik. Sağlıklı bir bebekten altmış dışkı örneği, diyet ve sağlık durumu günlüğüyle birlikte toplandı. 300.000'den fazla 16S rRNA geninin analizi, mikrobiyomun filogenetik çeşitliliğinin zaman içinde kademeli olarak arttığını ve topluluk kompozisyonundaki değişikliklerin yumuşak bir zamansal değişime uyduğunu gösterdi. Buna karşılık, büyük taksonomik gruplar, beslenme veya sağlıktaki değişikliklere karşılık gelen bollukta ani değişimler gösterdi. Topluluk toplantısı rastgele değildi: yaşam olaylarıyla noktalanan bakteri diziliminin ayrık adımlarını gözlemledik. Ayrıca, 12 dışkı örneğinden alınan yaklaşık 500.000 DNA metagenomik okumasının analizi, en eski mikrobiyomun laktat kullanımını kolaylaştıran genler açısından zengin olduğunu ve bitki polisakkarit metabolizmasında yer alan fonksiyonel genlerin, katı gıdanın tanıtılmasından önce mevcut olduğunu ve bebek bağırsağını yeni bir yaşam için hazırladığını ortaya çıkardı. yetişkin diyeti. Bununla birlikte, sofralık gıdaların tüketilmesi, Bacteroidetes bolluğunda sürekli bir artışa, dışkıda kısa zincirli yağ asidi düzeylerinin yükselmesine, karbonhidrat kullanımıyla ilişkili genlerin zenginleşmesine, vitamin biyosentezine ve ksenobiyotik bozunmasına ve daha stabil bir topluluk bileşimine neden olmuştur; Yetişkin mikrobiyomunun karakteristik özelliği. Bu çalışma, mikrobiyomdaki görünüşte kaotik değişimlerin yaşam olaylarıyla ilişkili olduğunu ortaya çıkardı; ancak farklı bebeklerin benzer yaşam olaylarına nasıl tepki verdiğini değerlendirmek için ek deneyler yapılmalıdır.

4500832

Gama-tokoferol, birçok bitki tohumunda ve ABD diyetinde E vitamininin ana formudur, ancak E vitamininin dokularda baskın formu ve takviyelerdeki birincil form olan alfa-tokoferol ile karşılaştırıldığında çok az ilgi görmüştür. Ancak son araştırmalar gama-tokoferolün insan sağlığı açısından önemli olabileceğini ve onu alfa-tokoferolden ayıran benzersiz özelliklere sahip olduğunu gösteriyor. Gama-Tokoferol, lipofilik elektrofiller için alfa-tokoferolden daha etkili bir tuzak gibi görünmektedir. Gama-Tokoferol iyi emilir ve bazı insan dokularında önemli derecede birikir; ancak büyük oranda idrarla atılan 2,7,8-trimetil-2-(beta-karboksietil)-6-hidroksikroman'a (gamma-CEHC) metabolize edilir. Gama-CEHC, ancak alfa-tokoferolden türetilen karşılık gelen metabolit değil, fizyolojik öneme sahip olabilecek natriüretik aktiviteye sahiptir. Hem gama-tokoferol hem de gama-CEHC, ancak alfa-tokoferol değil, siklooksijenaz aktivitesini inhibe eder ve dolayısıyla antiinflamatuar özelliklere sahiptir. Bazı insan ve hayvan çalışmaları, gama-tokoferolün plazma konsantrasyonlarının, kardiyovasküler hastalık ve prostat kanseri görülme sıklığı ile ters ilişkili olduğunu göstermektedir. Gama-tokoferol ve metabolitinin bu ayırt edici özellikleri, gama-tokoferolün insan sağlığına daha önce fark edilmeyen şekillerde önemli ölçüde katkıda bulunabileceğini göstermektedir. Bu olasılık, özellikle yüksek dozda alfa-tokoferolün, her ikisini de artıran gama-tokoferol takviyesinin aksine, plazma ve doku gama-tokoferolünü tükettiği göz önüne alındığında daha fazla değerlendirilmelidir. Gama-tokoferolün biyoyararlanımı, metabolizması, kimyası ve antioksidan olmayan aktiviteleri hakkındaki güncel bilgileri ve gama-tokoferol ile kardiyovasküler hastalık ve kanser arasındaki ilişkiye ilişkin epidemiyolojik verileri gözden geçiriyoruz.

4505748

ARKA PLAN Apolipoprotein E (APOE) genotipi, Alzheimer hastalığı riski hakkında bilgi sağlar, ancak hastaların ve aile üyelerinin genotiplenmesi önerilmez. Prospektif, randomize, kontrollü bir çalışmada genotip açıklamasının etkisini inceledik. YÖNTEMLER Ebeveynleri Alzheimer hastalığı olan 162 asemptomatik yetişkini, kendi APOE genotipleme sonuçlarını almak (açıklama grubu) veya bu sonuçları almamak üzere (açıklama grubu) rastgele olarak atadık. Anksiyete, depresyon ve sınava bağlı sıkıntı semptomlarını, açıklama veya açıklamama sonrasında 6 hafta, 6 ay ve 1 yıl sonra ölçtük. SONUÇLAR Anksiyetenin zaman ortalamalı ölçümlerindeki değişiklikler (açıklama grubunda 4,5 ve açıklamayan grupta 4,4, P=0,84), depresyon (sırasıyla 8,8 ve 8,7; P=0,98), iki grup arasında anlamlı bir fark yoktu. veya testle ilgili sıkıntı (sırasıyla 6,9 ve 7,5; P=0,61). Açıklamayan grup ile APOE epsilon4 aleli (artmış riskle ilişkili olan) taşıyan deneklerden oluşan bir açıklama alt grubu arasındaki ikincil karşılaştırmalar da önemli bir fark ortaya çıkarmadı. Bununla birlikte, epsilon4-negatif alt grup, epsilon4-pozitif alt gruba göre önemli ölçüde daha düşük düzeyde testle ilişkili sıkıntıya sahipti (P=0.01). Psikolojik sonuçlarda klinik olarak anlamlı değişiklikler olan kişiler, ifşa edilmeyen grup ile epsilon4-pozitif ve epsilon4-negatif alt gruplar arasında eşit olarak dağıtıldı. Anksiyete ve depresyona ilişkin başlangıç ​​puanları, bu önlemlerin ifşaat sonrası puanlarıyla güçlü bir şekilde ilişkiliydi (her iki karşılaştırma için de P<0,001). SONUÇLAR APOE genotipleme sonuçlarının Alzheimer hastalarının yetişkin çocuklarına açıklanması, kısa vadeli önemli psikolojik risklere yol açmadı. APOE epsilon4-negatif olduklarını öğrenenler arasında teste bağlı sıkıntı azaldı. Genetik test yapılmadan önce yüksek düzeyde duygusal sıkıntı yaşayan kişilerin, açıklama sonrasında duygusal zorluklar yaşama olasılıkları daha yüksekti. (ClinicalTrials.gov numarası, NCT00571025.)

4506414

ARKA PLAN Çağdaş bir popülasyonda kan basıncı ile kardiyovasküler hastalığın farklı belirtileri arasındaki ilişkiler karşılaştırılmamıştır. Bu çalışmada kan basıncının 12 farklı kardiyovasküler hastalık sunumuyla ilişkisini analiz etmeyi amaçladık. YÖNTEMLER 30 yaşında veya daha büyük ve başlangıçta kardiyovasküler hastalığı olmayan 1.25 milyon hastadan oluşan bir kohort oluşturmak için CALIBER (LInked Ismarlama çalışmalar ve Elektronik Sağlık Kayıtlarını kullanan CARdiovasküler araştırma) programında 1997'den 2010'a kadar bağlantılı elektronik sağlık kayıtlarını kullandık. beşte biri kan basıncını düşürücü tedaviler aldı. Klinik olarak ölçülen kan basıncı ile 12 akut ve kronik kardiyovasküler hastalık arasındaki yaşa özel ilişkilerdeki heterojenliği inceledik ve diğer risk faktörlerine göre düzeltilmiş yaşam boyu riskleri (95 yaşına kadar) ve kardiyovasküler hastalıksız kaybedilen yaşam yıllarını tahmin ettik. endeks yaşları 30, 60 ve 80'dir. Bu çalışma ClinicalTrials.gov adresinde NCT01164371 numarasıyla kayıtlıdır. BULGULAR 5.2 yıllık ortalama takip sırasında 83.098 kardiyovasküler hastalık başlangıcı kaydettik. Her yaş grubunda, kardiyovasküler hastalık açısından en düşük risk, sistolik kan basıncı 90-114 mm Hg ve diyastolik kan basıncı 60-74 mm Hg olan kişilerde görüldü; düşük kan basınçlarında J şeklinde bir risk artışı olduğuna dair hiçbir kanıt yoktu. Yüksek kan basıncının etkisi, kardiyovasküler hastalık sonlanım noktasına göre, güçlü pozitiften etkisizliğe kadar değişiklik göstermiştir. Yüksek sistolik kan basıncı ile ilişkiler intraserebral kanama (tehlike oranı 1.44 [%95 CI 1.32-1.58]), subaraknoid kanama (1.43 [1.25-1.63]) ve stabil için en güçlüydü. anjina (1.41 [1.36-1.46]) ve abdominal aort anevrizması için en zayıf (1.08 [1.00-1.17]). Diyastolik kan basıncı ile karşılaştırıldığında, yüksek sistolik kan basıncının anjina, miyokard enfarktüsü ve periferik arter hastalığı üzerinde daha büyük bir etkisi varken, yüksek diyastolik kan basıncının abdominal aort anevrizması üzerinde sistolik basınçtaki artıştan daha büyük bir etkisi vardı. Nabız basıncı ilişkileri abdominal aort anevrizması için ters (10 mm Hg başına HR 0.91 [%95 GA 0.86-0.98]) ve periferik arter hastalığı için en güçlüydü (1.23 [1.20-1.27] ). Hipertansiyonu olan kişilerin (kan basıncı ≥140/90 mm Hg veya kan basıncını düşüren ilaçlar alan kişiler) 30 yaşındayken yaşam boyu genel kardiyovasküler hastalık riski %63.3 (%95 CI 62.9-63.8) idi. ) normal kan basıncı olanlarda %46.1 (45.5-46.8) ile karşılaştırıldığında ve 5.0 yıl önce kardiyovasküler hastalık gelişenlerde (%95 CI 4.8-5.2) görüldü. İndeks yaştan itibaren hipertansiyonla ilişkili kardiyovasküler hastalıksız yaşam yıllarının çoğunu (%43) stabil ve kararsız anjina oluştururken, kalp yetmezliği ve stabil anjina yaşam yıllarının en büyük oranını (her biri %19) oluşturuyordu indeks yaşından 80 yıl kaybetti. YORUM Kan basıncının geniş bir yaş aralığındaki tüm kardiyovasküler hastalıkların ortaya çıkmasıyla güçlü bir ilişkisi olduğu ve diyastolik ve sistolik ilişkilerin uyumlu olduğu yönünde yaygın olarak kabul edilen varsayımlar, bu yüksek çözünürlüklü çalışmanın bulguları tarafından desteklenmemektedir. Modern tedavilere rağmen hipertansiyonun yaşam boyu yükü oldukça büyüktür. Bu bulgular yeni kan basıncını düşürme stratejilerine olan ihtiyacı vurguluyor ve bunları değerlendirecek randomize araştırmaların tasarımına bilgi sağlamaya yardımcı olacak. FİNANSMAN Tıbbi Araştırma Konseyi, Ulusal Sağlık Araştırmaları Enstitüsü ve Wellcome Trust.

4506702

ARKA PLAN Çevrimiçi sağlık aramalarını filtrelemeye yönelik devam eden girişimler, tüketici tarafından oluşturulan içeriği arama sonuçlarından hariç tutar, ancak profesyonelce kontrol edilen içerikle karşılaştırıldığında daha düşük olduğu kanıtlanmamıştır. Antidepresan essitalopram ve antipsikotik ketiapin, son 5 yılda kendi ilaç sınıflarında en çok satan ilaçlar arasında yer aldı. Her iki ilacın da uykusuzluk ve migren ağrılarının hafifletilmesinden ciddi gelişimsel bozuklukların tedavisine kadar çeşitli ruh sağlığı ve akıl sağlığı dışı kullanımları vardır. AMAÇ Amacımız, çevrimiçi tüketici incelemelerinde essitalopram ve ketiapinin en sık bildirilen etkilerini tanımlamak, bunları profesyonelce kontrol edilen ticari sağlık web sitelerinde açıklanan etkilerle karşılaştırmak ve çevrimiçi tüketici ilaç incelemelerinin kullanılabilirliğini ölçmekti. YÖNTEMLER 2 tüketici tarafından oluşturulan (www.aska Patient.com ve www.crazymeds.us) ve 2 profesyonelce kontrol edilen (www.webmd.com ve www.webmd.com ve www.revolutionhealth.com) sağlık web siteleri. Profesyonel ilaç açıklamaları, son 2 web sitesindeki ilaçlarla ilgili tüm standart bilgileri içeriyordu. Tüm metinsel veriler ilaç etkileri açısından tümevarımsal olarak kodlandı ve kodlayıcılar arası uyum değerlendirildi. Tüketici tarafından bildirilen etkiler ile web sitesi oluşumu arasındaki ilişkileri test etmek için ki-kare kullanıldı. SONUÇLAR Essitalopram (n = 480) veya ketiapin (n = 480) alan tüketiciler en sık semptomlarda iyileşme (%30,4 veya 146/480, %24,8 veya 119/480) veya semptomlarda kötüleşme (%15,8 veya 76/480, %10,2) bildirdiler veya 49/480), uykudaki değişiklikler (%36 veya 173/480, %60,6 veya 291/480) ve kilo ve iştahtaki değişiklikler (%22,5 veya 108/480, %30,8 veya 148/480). Profesyonel olarak kontrol edilen web siteleri yerine tüketici tarafından oluşturulan web sitelerinde yorum yayınlayan daha fazla tüketici, ketiapin kullanırken semptomların kötüleştiğini bildirdi (%17,3 veya 38/220'ye karşı %5 veya 11/220, P < 0,001), profesyonel olarak kontrol edilen web sitelerine yorum yazan daha fazla tüketici ise semptomlarda iyileşme bildirdi (%32,7 veya 72/220'ye karşı %21,4 veya 47/220, P = 0,008). Profesyonel açıklamalarda fiziksel olumsuz etkiler ve intihar düşüncesiyle ilgili uyarılar daha sık sıralanırken, tüketici incelemeleri günlük rutinleri bozan etkileri vurguladı ve bağlam içinde etkilerle ilgili daha zengin açıklamalar sağladı. Her web sitesindeki her bir ilaca ilişkin en son 20 tüketici incelemesi (n = 80), yaygın olarak bildirilen etkilerin sıklığı açısından incelemelerin tam örneğiyle karşılaştırılabilir düzeydeydi. SONUÇ Tüketici incelemeleri ve profesyonel ilaç açıklamaları genellikle iki psikotrop ilacın benzer etkilerini bildirdi ancak açıklamaları ve raporlama sıklığı açısından farklıydı. Profesyonel ilaç açıklamaları, ilaç etkilerinin kısa ama kapsamlı bir listesinin avantajını sunarken, tüketici incelemeleri, etkilerin çeşitli kombinasyonlarda ve değişen derecelerde nasıl ortaya çıkabileceğine dair daha fazla bağlam ve durumsal örnekler sunar. Tüketici incelemelerinin web siteleri arasında dağılması entegrasyonlarını sınırlamaktadır, ancak iki hedef ilaca ilişkin kısa bir tarama stratejisi yine de temsili tüketici içeriğine ulaşılmasını sağlamıştır. Yalnızca güvenilen veya onaylanmış web sitelerini döndürecek şekilde çevrimiçi sağlık aramalarını filtrelemeye yönelik mevcut stratejiler, İnternet'teki kaliteli sağlık kaynaklarının belirlenmesi sorununu uygunsuz bir şekilde ele alabilir; çünkü bu tür stratejiler, sağlık bilgileri için tamamlayıcı bir kaynağın tamamına erişimi aşırı derecede sınırlandırır.

4515975

ARKA PLAN Çinko takviyesinin çocukların büyümesi üzerindeki etkisini değerlendirmek için çok sayıda çalışma yapılmıştır. Bu çalışmaların sonuçları tutarsızdır ve bu farklı sonuçlardan sorumlu olan faktörler bilinmemektedir. AMAÇ Bu nedenle, çinko takviyesinin ergenlik öncesi çocukların fiziksel büyümesi ve serum çinko konsantrasyonları üzerindeki etkisini değerlendirmek için randomize kontrollü müdahale çalışmalarının meta-analizleri tamamlandı. TASARIM MEDLINE (Ulusal Tıp Kütüphanesi, Bethesda, MD) aramaları ve diğer yöntemlerle uygun verilere sahip toplam 33 kabul edilebilir çalışma belirlendi. Rastgele etki modelleri kullanılarak boy, ağırlık, boya göre ağırlık ve serum çinko konsantrasyonundaki değişiklikler için ağırlıklı ortalama etki büyüklükleri (SD birimleriyle ifade edilir) hesaplandı; Etki büyüklükleriyle ilişkili faktörler meta-regresyon teknikleriyle araştırıldı. SONUÇLAR Çinko takviyesi, sırasıyla 0,350 (%95 GA: 0,189, 0,511) ve 0,309 (0,178, 0,439) etki büyüklükleriyle boy ve kilo artışlarında son derece anlamlı, pozitif tepkiler üretti. Çinkonun boya göre ağırlık indeksleri üzerinde anlamlı bir etkisi yoktu [ağırlıklı ortalama etki büyüklüğü: -0,018 (-0,132, 0,097)]. Çinko takviyesi çocukların serum çinko konsantrasyonlarında 0,820 (0,499, 1,14) etki büyüklüğünde büyük bir artışa neden oldu. Başlangıçta yaşa-göre-ağırlık z skorları düşük olan çocuklarda ve başlangıçta yaşa-göre-boy z skorları düşük olan 6 aydan büyük çocuklarda büyüme tepkileri daha fazlaydı. SONUÇLAR Çocukların çinko beslenmesini iyileştirmeye yönelik müdahaleler, çinko eksikliği riski taşıyan popülasyonlarda, özellikle de düşük kiloluluk veya bodurluk oranlarının yüksek olduğu durumlarda dikkate alınmalıdır. Popülasyonun ortalama serum çinko konsantrasyonu, çocuklarda çinko takviyelerinin başarılı bir şekilde verilmesi ve emilmesinin yararlı bir göstergesidir.

4530659

Hastaların %90'ına kadar tedavi edilemeyen ilerleyici bir durum olan yaşa bağlı makula dejenerasyonu (YBMD), dünya çapında yaşlılarda körlüğün önde gelen nedenidir. AMD'nin ıslak ve kuru olmak üzere iki formu, sırasıyla retinayı rahatsız edici şekilde istila eden kan damarlarının varlığına veya yokluğuna göre sınıflandırılır. Islak AMD'nin altında yatan moleküler mekanizmaların ayrıntılı bir şekilde anlaşılması, FDA onaylı birçok sağlam tedaviye yol açmıştır. Bunun aksine, kuru AMD için onaylanmış bir tedavi yoktur. Bu derlemede, hastalığın her bir formuna aracılık eden kritik efektör yolaklara ilişkin bilgi sağlıyoruz. AMD patogenezinin birçok yönünü kapsayan yinelenen bir tema, klasik olarak bağışıklık ayrıcalıklı oküler cennetteki kusurlu bağışıklık modülasyonudur. İlginç bir şekilde AMD araştırmalarındaki son gelişmeler, diğer nörodejeneratif hastalıklarla ortak moleküler hastalık yolaklarını da vurguluyor. Son olarak AMD patogenezinin bilinen mekanik adımlarına müdahale etmenin terapötik potansiyeli tartışılmaktadır.

4544916

Patojenlere etkili bir şekilde karşı koymak için bitkiler, zamanında aktivasyona, uygun süreye ve savunma programlarının yeterli genliğine izin verecek şekilde sıkı bir şekilde düzenlenen karmaşık bir dizi bağışıklık tepkisine güvenir. Bitki bağışıklık tepkisinin koordinasyonunun, ökaryotlardaki proteinlerin stabilitesini kontrol eden ubikuitin/proteazom sisteminin aktivitesini gerektirdiği bilinmektedir. Burada, ubikuitin/proteazom sisteminin bir alt kümesi olan N-ucu kural yolunun, Arabidopsis thaliana model bitkisinde çok çeşitli bakteriyel ve fungal patojenlere karşı savunmayı düzenlediğini gösterdik. Bu yolun, glukozinolatlar gibi bitki savunma metabolitlerinin biyosentezini, ayrıca bitki bağışıklığında önemli bir rol oynayan fitohormon jasmonik asit biyosentezini ve tepkisini pozitif olarak düzenlediğini gösterdik. Sonuçlarımız ayrıca N-ucu kural yolunun arginilasyon dalının, model patojen Pseudomonas syringae AvrRpm1'e karşı savunma programının zamanlamasını ve genliğini düzenlediğini göstermektedir.

4547102

Anormal epigenetik yeniden programlama sıklıkla embriyonik genom aktivasyonu (EGA) sırasında somatik hücre nükleer transferi (SCNT) embriyolarında gelişimsel kusurlarla sonuçlanır. Sığır sekiz hücreli SCNT embriyoları, histon H3 lizin 9 tri- ve di-metilasyonunun (H3K9me3/2) genel hipermetilasyonunu sergiler, ancak bunun asıl nedeni hala belirsizliğini koruyor. Burada, iki H3K9 demetilaz geninin, lizine spesifik demetilaz 4D (KDM4D) ve 4E'nin (KDM4E), in vitro fertilize (IVF) embriyolarda aktif H3K9me3/2 demetilasyonu ile ilişkili olduğuna ve klonlanmış embriyolarda yetersiz şekilde eksprese edildiğine dair kanıt sağlıyoruz. EGA zamanı. Üstelik KDM4E, IVF ve SCNT embriyonik gelişiminde daha önemli bir rol oynar ve KDM4E'nin aşırı ekspresyonu, global transkriptomu eski haline getirebilir, blastosist oluşumunu iyileştirebilir ve SCNT embriyolarının klonlama verimliliğini artırabilir. Dolayısıyla sonuçlarımız, KDM4E'nin, EGA'nın önemli bir epigenetik düzenleyicisi olarak ve SCNT aracılı yeniden programlamaya karşı kalıcı H3K9me3/2 engellerinden sorumlu dahili kusurlu bir faktör olarak işlev görebileceğini göstermektedir. Ayrıca, RNA ve KDM4E arasındaki etkileşimlerin EGA sırasında H3K9 demetilasyonu için gerekli olduğunu gösterdik. Bu gözlemler, tamamlanmamış nükleer yeniden programlamanın anlaşılmasını ilerletir ve transgenik sığır üremesi için büyük önem taşır.

4550036

Yazarlar folik asit takviyesi ile gebelik hipertansiyonu arasındaki ilişkiyi araştırdılar. Çalışma popülasyonu, 1993 ve 2000 yılları arasında Slone Epidemiyoloji Merkezi Doğum Kusurları Çalışmasına katılan, Amerika Birleşik Devletleri ve Kanada'da malformasyona sahip olmayan bebekleri olan kadınları içeriyordu. Kadınlarla doğumdan sonraki 6 ay içinde sosyodemografik ve tıbbi faktörler, hipertansiyon veya hipertansiyon oluşumu hakkında görüşmeler yapıldı. preeklampsi olmadan ve gebelikte multivitamin kullanımı. Kilo, parite, ikiz gebelik, diyabet, sigara içme, eğitim ve aile gelirine göre düzeltilmiş göreceli riskler Cox regresyon modelleri kullanılarak tahmin edildi. 2.100 kadından 204'ü (%9,7) gestasyonel hipertansiyon (gebeliğin 20. haftasından sonra başlayan) bildirdi. Folik asit takviyesinden sonraki ay içinde gestasyonel hipertansiyon gelişmesinin çok değişkenli düzeltilmiş bağıl riski, aynı ay içinde folik asit kullanılmamasına kıyasla 0,55 (%95 güven aralığı: 0,39, 0,79) idi. Bu bulgu folik asit içeren multivitaminlerin gebelik hipertansiyonu riskini azaltabileceğini düşündürmektedir.

4561402

Otoimmün poliendokrinopati sendromu tip 1, yeni bir gen olan AIRE'deki mutasyonlardan kaynaklanan resesif bir Mendel hastalığıdır ve organa özgü otoimmün hastalıkların bir spektrumu ile karakterize edilir. AIRE mutasyonu sonucunda hangi tolerans mekanizmalarının bozulduğu bilinmemektedir. Aire mutasyonlu transgenik farelerde pankreas antijenine karşı yüksek afiniteye sahip otoreaktif CD4+ T hücrelerinin kaderinin izini sürerek, Aire eksikliğinin timustaki organa özgü hücrelerin silinmesinde neredeyse tamamen başarısızlığa neden olduğunu gösterdik. Bu sonuçlar, otoimmün poliendokrinopati sendromu 1'in, yasak T hücresi klonlarının silinmesine yönelik özel bir mekanizmanın başarısızlığından kaynaklandığını ve bu tolerans mekanizması için merkezi bir rol oluşturduğunu göstermektedir.

4583180

Hipoksi ve besin açlığı gibi tümör mikro ortamının koşulları, kanserin ilerlemesinde kritik rol oynar. Ancak asidik hücre dışı pH'ın kanser ilerlemesindeki rolü hipoksi kadar kapsamlı bir şekilde araştırılmamıştır. Burada, hücre dışı asidik pH'ın (pH 6,8), hücre içi asitleşmenin yanı sıra nükleer translokasyonu ve destekleyicinin hedeflerine bağlanmasını uyararak sterol düzenleyici element bağlayıcı protein 2'nin (SREBP2) aktivasyonunu tetiklediğini gösterdik. İlginç bir şekilde, SREBP2'nin inhibisyonu, ancak SREBP1'in inhibisyonu, düşük pH'ın indüklediği kolesterol biyosenteziyle ilişkili genlerin yukarı regülasyonunu baskıladı. Ayrıca, doğrudan bir SREBP2 hedefi olan asil-CoA sentetaz kısa zincirli aile üyesi 2 (ACSS2), asidik pH altında kanser hücrelerine büyüme avantajı sağladı. Ayrıca asidik pH'a duyarlı SREBP2 hedef genleri, kanser hastalarının genel hayatta kalma oranının azalmasıyla ilişkilendirildi. Dolayısıyla bulgularımız, SREBP2'nin, kısmen hücre dışı asitleşmeye yanıt olarak, metabolik genlerin ve kanser hücrelerinin ilerlemesinin önemli bir transkripsiyonel düzenleyicisi olduğunu göstermektedir.

4587978

Günlük insan aktivitesinin kalıpları, birçok davranışsal ve fizyolojik süreçte yaklaşık 24 saatlik ritimleri teşvik eden içsel bir sirkadiyen saat tarafından kontrol edilir. Bu sistem, uyku epizodlarının toplumsal normlara göre daha sonraki zamanlara kaydırıldığı yaygın bir uykusuzluk türü olan gecikmiş uyku fazı bozukluğunda (DSPD) değişir. Burada, sirkadiyen aktivatör proteinler Clock ve Bmal1 için arttırılmış afiniteye sahip bir transkripsiyonel inhibitör oluşturan çekirdek sirkadiyen saat geni CRY1'deki baskın kodlama varyasyonuyla ilişkili kalıtsal bir DSPD formunu rapor ediyoruz. Bu fonksiyon kazanımı sağlayan CRY1 varyantı, anahtar transkripsiyonel hedeflerin ekspresyonunun azalmasına neden olur ve sirkadiyen moleküler ritimlerin periyodunu uzatarak DSPD semptomlarına mekanik bir bağlantı sağlar. Alelin %0,6'ya varan bir frekansı vardır ve ilgisiz ailelerin ters fenotipi, taşıyıcılardaki geç ve/veya parçalanmış uyku düzenlerini doğrular; bu da bunun insan popülasyonunun büyük bir bölümünde uyku davranışını etkilediğini düşündürür.

4611267

Sıçanlarda beslenme birçok yaklaşım kullanılarak deneysel olarak tetiklenebilir. Bunlar arasında (1) gıda yoksunluğu ve (2) nörotransmiter l-glutamatın (Glu) veya reseptör agonisti NMDA'nın lateral hipotalamik alana (LHA) akut mikroenjeksiyonu yer alır. Her iki paradigmaya göre, LHA içindeki NMDA reseptörü (NMDA-R), beslenmeyi uyarmak için Glu tarafından kodlanan sinyallerin aktarılmasında kritik bir rol oynuyor gibi görünüyor. Ancak bu sinyal aktarımının altında yatan hücre içi mekanizmalar bilinmemektedir. Protein-tirozin kinazlar (PTK'ler) NMDA-R sinyal mekanizmalarına katıldığı için, gıda alımı ve biyokimyasal ölçümler yoluyla her iki beslenme uyarımı türünün altında yatan LHA mekanizmalarına PTK'nın dahil olduğunu belirledik. PTK inhibitörlerinin LHA enjeksiyonları, LHA NMDA enjeksiyonu ile ortaya çıkan beslenmeyi önemli ölçüde bastırdı (%69'a kadar), ancak yoksunluk beslemesini yalnızca hafifçe bastırdı (%24), bu da PTK'ların bu beslenme davranışının altında yatan sinyaller için daha az kritik olabileceğini düşündürmektedir. Tersine, gıda yoksunluğu, ancak NMDA enjeksiyonu, Src PTK'ler için görünür aktivitede ve Src'yi aktive eden bir PTK olan Pyk2'nin ifadesinde belirgin artışlar üretti. Birlikte ele alındığında, davranışsal ve biyokimyasal sonuçlar, PTK inhibitörleri tarafından NMDA'nın yol açtığı beslenmeyi bastırmanın daha kolay olmasına rağmen, gıda yoksunluğunun in vivo olarak PTK aktivitesini kolaylıkla tetiklediğini göstermektedir. İkinci sonuç, NMDA-R'den farklı olan, yoksunluğun yol açtığı ancak NMDA'nın yol açtığı beslenme sırasında aktive olan nörotransmiter reseptörleri tarafından daha fazla PTK alımını yansıtabilir. Bu sonuçlar aynı zamanda yalnızca bir beslenme uyarımı paradigmasının kullanılmasının, sinyal moleküllerinin in vivo beslenme davranışının altında yatan yolaklara gerçek katkılarını ortaya çıkarmakta nasıl başarısız olabileceğini de göstermektedir.

4627816

AMAÇ Bu çalışmanın amacı orta yaşlı ve yaşlı Japon kadın ve erkeklerde ileri glikasyon son ürün birikimi ile iskelet kası kütlesi arasındaki ilişkiyi araştırmaktı. YÖNTEMLER Bu kesitsel çalışmaya toplam 132 katılımcı kaydoldu. Deri otofloresansı ileri glikasyon son ürünlerinin bir ölçüsü olarak değerlendirildi. Apendiküler iskelet kası kütlesi, çift enerjili X-ışını absorpsiyometrisi kullanılarak ölçüldü ve iskelet kası indeksi, apendiküler iskelet kası kütlesinin boyun karesine bölünmesiyle hesaplandı. Katılımcılar, sarkopeni tanısı için Asya Sarkopeni Çalışma Grubu'nun iskelet kası indeksi kriterleri kullanılarak iki gruba (düşük iskelet kası indeksi ve normal iskelet kası indeksi) ayrıldı. Düşük iskelet kası indeksi ile ilişkili önemli faktörleri belirlemek için çok değişkenli lojistik regresyon analizi ve alıcı çalışma karakteristik eğrisinin altındaki alan kullanıldı. BULGULAR Katılımcılar 70 erkek (ortalama yaş 57 ± 10 yıl) ve 62 kadından (ortalama yaş 60 ± 11 yıl) oluşuyordu. Düşük ve normal iskelet kası indeksi gruplarında sırasıyla 31 ve 101 katılımcı vardı. Normal iskelet kası indeksi grubuyla karşılaştırıldığında düşük iskelet kası indeksi grubunda cilt otofloresansı anlamlı derecede yüksekti (P ​​< 0.01). Çok değişkenli lojistik regresyon analizine göre cilt otofloresansı düşük iskelet kası indeksi ile ilişkili önemli bir bağımsız faktördü (olasılık oranı 15,7, %95 güven aralığı 1,85-133,01; P = 0,012). Deri otofloresansı için kesme noktası, 0,75 duyarlılık ve 0,91 özgüllük ile 2,45 keyfi birimdi. SONUÇLAR Deri otofloresansı, orta yaşlı ve yaşlı Japon erkek ve kadınları arasında düşük iskelet kası indeksi ile ilişkili bağımsız bir faktördü. Geriatr Gerontol Uluslararası 2017; 17: 785-790.

4632921

Bu çalışmada, 5.746 gen için RNA ekspresyonuyla ilişkili genetik varyantları tanımlamak için farklı donörlerden alınan 215 insan kaynaklı pluripotent kök hücre (iPSC) hattının tam genom dizilimi ve gen ekspresyon profilini kullandık. Bu ekspresyon kantitatif özellik lokusları (eQTL'ler) için transkripsiyon faktörü bağlanmasını bozan nedensel varyantları tahmin edebildik ve bunların bir alt kümesini deneysel olarak doğruladık. Ayrıca, genler arası düzenleyici bölgelerin kopya sayısını değiştirerek gen ekspresyonunu etkilediği görünen bazıları da dahil olmak üzere kopya numarası varyantı (CNV) eQTL'leri de belirledik. Ek olarak, nadir gen CNV'lerinin ve düzenleyici tek nükleotid varyantlarının gen ekspresyonu üzerindeki etkileri tanımlayabildik ve X kromozomu üzerindeki gen ekspresyonunun yeniden aktivasyonunun gen kromozomal pozisyonuna bağlı olduğunu bulduk. Çalışmamız, genetik ilişki analizleri için iPSC'lerin değerini vurguluyor ve pluripotent hücrelerde gen ekspresyonunun genetik düzenlemesini araştırmak için benzersiz bir kaynak sağlıyor.

4641348

ARKA PLAN/AMAÇLAR Alkolsüz yağlı karaciğer hastalığı (NAFLD), kronik karaciğer hastalığının önde gelen nedenidir ve metabolik sendromla yakından ilişkilidir. Bu çalışmada Allium fistulosum'un (EAF) etanol ekstraktının NAYKH üzerindeki etkisini gözlemledik ve NAYKH tedavisinin geliştirilmesinde EAF'nin doğal bir ürün olarak kullanılma olasılığını önerdik. MALZEMELER/YÖNTEMLER Hepatik lipit birikimi üzerindeki önleyici etki, in vitro oleik asit (OA) kaynaklı NAFLD modeli ve Batı diyeti (yüksek yağlı yüksek sakkaroz; WD) kaynaklı obez fare modeli kullanılarak tahmin edildi. Hayvanlar üç gruba ayrıldı (n = 7): normal diyet grubu (ND), WD grubu ve WD artı %1 EAF grubu. SONUÇLAR EAF, hücresel sitotoksisite yokluğunda HepG2 hücrelerinde OA ile uyarılan lipit birikimini azalttı ve sterol düzenleyici element bağlayıcı protein 1 ve yağ asidi sentaz genlerinin transkripsiyonel aktivasyonunu önemli ölçüde bloke etti. Daha sonra bu etkileri, EAF takviyesi varlığında veya yokluğunda ND veya WD ile beslenen farelerde in vivo olarak araştırdık. ND kontrolleriyle karşılaştırıldığında, WD ile beslenen farelerde vücut ağırlığında, karaciğer ağırlığında, epididimal yağ ağırlığında ve hepatositlerde yağ birikiminde artışlar sergilendi ve bu etkiler, EAF takviyesiyle önemli ölçüde azaldı. SONUÇLAR Allium fistulosum, NAFLD gelişimini azaltır ve EAF, karaciğerde anti-lipojenik aktiviteyi ortaya çıkarır. Bu nedenle EAF, NAFLD'nin önlenmesi ve tedavisine yönelik yeni terapötik ilaçların veya ilaç kombinasyonlarının geliştirilmesinde kullanım için umut verici bir adayı temsil etmektedir.

4647303

BAĞLAM Çocukluk ve ergenlik döneminde kardiyovasküler risk faktörlerine maruz kalma, yaşamın ilerleyen dönemlerinde ateroskleroz gelişimi ile ilişkili olabilir. AMAÇ Çocukluk ve ergenlikte ölçülen kardiyovasküler risk faktörleri ile yetişkinlikte ölçülen preklinik aterosklerozun bir belirteci olan ortak karotid arter intima-media kalınlığı (IMT) arasındaki ilişkiyi incelemek. TASARIM, ORTAM VE KATILIMCILAR Finlandiya'daki 5 merkezde, 1980 yılında 3 ila 18 yaşları arasındaki çocukluk ve ergenlik döneminde muayene edilen ve 21 yıl sonra yeniden muayene edilen, 24 ila 39 yaşlarındaki 2229 beyaz yetişkin arasında yürütülen popülasyona dayalı, ileriye dönük kohort çalışması. Eylül 2001 ve Ocak 2002. ANA SONUÇ ÖLÇÜMLERİ Kardiyovasküler risk değişkenleri (düşük yoğunluklu lipoprotein kolesterol [LDL-C], yüksek yoğunluklu lipoprotein kolesterol [HDL-C] ve trigliserid seviyeleri; LDL-C/HDL-C oranı) arasındaki ilişki ; çocukluk ve yetişkinlikte ölçülen sistolik ve diyastolik kan basıncı; vücut kitle indeksi; yetişkinlikte ölçülen ortak karotis arter IMT'si. SONUÇLAR Yaş ve cinsiyete göre ayarlanan çok değişkenli modellerde yetişkinlikteki IMT, çocukluktaki LDL-C düzeyleri (P =.001), sistolik kan basıncı (P<.001), vücut kitle indeksi (P =.007) ve sigara içme (P =.02) ve yetişkin sistolik kan basıncı (P<.001), vücut kitle indeksi (P<.001) ve sigara içme (P =.004). 12 ila 18 yaş arası ergenlerde ölçülen yüksek LDL-C düzeyleri (yani aşırı yaşa ve cinsiyete özgü yüzde 80'lik dilim), sistolik kan basıncı, vücut kitle indeksi ve sigara içimi dahil olmak üzere risk faktörlerinin sayısı, 33 ila 39 yaşları arasındaki genç yetişkinlerde ölçülen karotis İMK ile doğrudan ilişkiliydi (hem erkekler hem de kadınlar için P<.001) ve eşzamanlı risk değişkenleri için düzeltme yapıldıktan sonra anlamlı kaldı. 3 ila 9 yaşları arasında ölçülen risk faktörlerinin sayısı, erkeklerde 24 ila 30 yaşları arasında karotis İMK ile zayıf bir doğrudan ilişki olduğunu gösterirken (P = 0,02), kadınlarda bu ilişkinin olmadığını (P = 0,63) göstermiştir. SONUÇLAR 12 ila 18 yaş arası ergenlerde değerlendirilen risk faktörü profili, yetişkin ortak karotid arter IMT'sini eş zamanlı risk faktörlerinden bağımsız olarak öngörmektedir. Bu bulgular, yaşamın erken dönemlerinde kardiyovasküler risk faktörlerine maruz kalmanın, arterlerde ateroskleroz gelişimine katkıda bulunan değişiklikleri tetikleyebileceğini düşündürmektedir.

4653837

Yaşlanmaya bağlı kas atrofisinin gelişiminin altında yatan mekanizmalar belirsizdir. MikroRNA dizisi ve bireysel qPCR analizleri ile yaşlı kemirgenlerin kaslarında miR-29'un anlamlı düzeyde yukarı regüle edildiğini ve genç kemirgenlerin sonuçlarında bunu bulduk. Yaşlanmayla birlikte p85α, IGF-1 ve B-myb kas seviyeleri düşerken belirli hücre durdurma proteinlerinin (p53, p16 ve pRB) ekspresyonu arttı. MiR-29, kas progenitör hücrelerinde (MPC) eksprese edildiğinde, proliferasyonu bozuldu, SA-βgal ekspresyonu ise yaşlanmanın gelişimini işaret edecek şekilde arttı. Bozulmuş MPC proliferasyonu, miR-29 ile p85a, IGF-1 ve B-myb'nin 3'-UTR'si arasındaki etkileşimlerden kaynaklandı ve miyoblast proliferasyonunun bu aracılarının translasyonunu baskıladı. İn vivo olarak, miR-29'un genç farelerin kaslarına elektroporasyonu, proliferasyonu baskıladı ve hücresel tutuklama proteinlerinin seviyelerini arttırdı, kasta yaşlanmanın neden olduğu tepkileri özetledi. MiR-29 ekspresyonunun potansiyel bir uyaranı Wnt-3a'dır, çünkü eksojen Wnt-3a'nın MPC'lerin birincil kültürlerinde miR-29 ekspresyonunu 2,7 kat uyardığını bulduk. Bu nedenle, yaşlanmanın neden olduğu kas yaşlanması, miR-29'un Wnt-3a tarafından aktivasyonundan kaynaklanır ve bu da kas atrofisine katkıda bulunan MPC'lerin çoğalmasını bozmak için koordineli olarak hareket eden çeşitli sinyal proteinlerinin (p85a, IGF-1 ve B-myb) baskılanmış ekspresyonuna yol açar. . MiR-29'daki artış yaşlanmaya bağlı sarkopeni için potansiyel bir mekanizma sağlar.

4658268

Memeli TOR (mTOR) yolu, hücrelerin kütle biriktirdiği ve boyutların arttığı süreç olan büyümeyi düzenlemek için besin ve büyüme faktöründen türetilen sinyalleri birleştirir. mTOR büyük bir protein kinazdır ve aynı zamanda damar restenozunu bloke eden ve potansiyel antikanser uygulamalarına sahip olan bir bağışıklık bastırıcı olan rapamisinin hedefidir. mTOR, rapamisinin hedefi olan bir kompleks oluşturmak için raptor ve GbetaL proteinleriyle etkileşime girer. Burada, mTOR'un aynı zamanda yeni protein rictor (mTOR'un rapamisine duyarsız arkadaşı) tarafından tanımlanan ayrı bir kompleksin parçası olduğunu da gösterdik. Rictor, daha önce açıklanan D. discoidieum'dan pianissimo, S. pombe'den STE20p ve S. cerevisiae'den AVO3p ile homolojiyi paylaşıyor. İlginç bir şekilde AVO3p, raptorun maya homologunu içermeyen ve PKC1 aracılığıyla aktin hücre iskeletine sinyal gönderen rapamisine duyarsız bir TOR kompleksinin parçasıdır. Bu bulguyla tutarlı olarak, rictor içeren mTOR kompleksi GbetaL içerir ancak raptor içermez ve ne mTOR efektör S6K1'i düzenler ne de FKBP12-rapamisin tarafından bağlanmaz. Rictor-mTOR kompleksinin, Protein Kinaz C alfa (PKCalpha) ve aktin hücre iskeletinin fosforilasyonunu modüle ettiğini bulduk; bu, TOR sinyallemesinin bu yönünün maya ve memeliler arasında korunduğunu öne sürüyor.

4662264

ER aktivasyon fonksiyonu 1'in (AF-1) tam aktivitesi için insan östrojen reseptörü (ER) serin kalıntısının 118. pozisyondaki fosforilasyonu gereklidir. Bu Ser118, in vitro olarak mitojenle aktifleşen protein kinaz (MAPK) tarafından ve in vivo olarak epidermal büyüme faktörü (EGF) ve insülin benzeri büyüme faktörü (IGF) ile tedavi edilen hücrelerde fosforile edilir. Her ikisi de MAPK'yi aktive eden MAPK kinazın (MAPKK) veya guanin nükleotid bağlayıcı protein Ras'ın aşırı ekspresyonu, vahşi tip ER'nin östrojen kaynaklı ve antiöstrojen (tamoksifen) kaynaklı transkripsiyonel aktivitesini arttırdı, ancak mutant ER'ninkini artırmadı. Ser118 yerine alanin. Böylece, ER'nin amino terminali AF-1'in aktivitesi, büyüme faktörü sinyal yollarının Ras-MAPK kademesi yoluyla Ser118'in fosforilasyonuyla modüle edilir.

4664540

Nükleotid bağlayıcı, oligomerizasyon alanı (NOD) benzeri reseptör (NLR) proteinleri, mikrobiyal algılamada önemli bir rol oynayan ve antimikrobiyal immün yanıtların başlatılmasına yol açan, doğuştan gelen bir immün reseptör ailesidir. Birden fazla NLR ailesi üyesinin fonksiyonunun düzensizliği, hem farelerde hem de insanlarda enfeksiyon ve otoinflamatuar hastalık eğilimi ile ilişkilendirilmiştir. NLR işlevi ve etkileşimleri konusundaki anlayışımızın artmasına rağmen, algılama mekanizmaları, aşağı akış sinyalleme ve in vivo işlevlerle ilgili birçok husus hala anlaşılması güçtür. Bu derlemede NLR ailesinin önemli üyelerine odaklanıyoruz; bunların çeşitli mikroplar tarafından aktivasyonunu, aşağı yönlü efektör fonksiyonlarını ve birbirleriyle ve diğer doğuştan gelen sensör protein aileleriyle etkileşimlerini tanımlıyoruz. Ayrıca, antimikrobiyal savunmada işbirliği yapan adaptif bağışıklık kolunun aktivasyonuna yol açan NLR reseptörleri tarafından mikrobiyal algılamanın rolü de tartışılmaktadır.

4678846

BAĞLAM Antioksidan asetilsistein, bilgisayarlı tomografi taramasına tabi tutulan böbrek fonksiyon bozukluğu olan hastalarda akut kontrast nefrotoksisitesini önler. Ancak koroner anjiyografideki rolü belirsizdir. AMAÇ Elektif koroner anjiyografi yapılan orta dereceli böbrek yetmezliği olan hastalarda oral asetilsisteinin böbrek fonksiyonlarındaki akut bozulmayı önleyip önlemediğini belirlemek. TASARIM VE YERLEŞİM Mayıs 2000'den Aralık 2001'e kadar Hong Kong Üniversitesi Grantham Hastanesi'nde gerçekleştirilen prospektif, randomize, çift-kör, plasebo kontrollü çalışma. KATILIMCILAR Ortalama (SD) 68 (6,5) yaşında, stabil orta dereceli böbrek yetmezliği olan (kreatinin klerensi <60 mL/dak [1,00 mL/s]) ve müdahaleli veya müdahalesiz elektif koroner anjiyografi uygulanan iki yüz Çinli hasta. MÜDAHALE Katılımcılara anjiyografiden önceki gün ve günde oral asetilsistein (günde iki kez 600 mg; n = 102) veya eşleşen plasebo tabletleri (n = 98) verilmek üzere rastgele atandılar. Tüm hastalara düşük ozmolaliteli kontrast madde verildi. ANA SONUÇ ÖLÇÜMLERİ Kontrast uygulamasından sonraki 48 saat içinde serum kreatinin seviyesinde %25'ten fazla artışın ortaya çıkması; kreatinin klerensi ve serum kreatinin seviyesinde değişiklik. SONUÇLAR On iki kontrol hastası (%12) ve 4 asetilsistein hastası (%4), kontrast madde uygulamasından sonraki 48 saat içinde serum kreatinin seviyesinde %25'ten fazla bir artış geliştirdi (göreceli risk, 0,32; %95 güven aralığı [CI], 0,10-0,96) ; P =.03). Serum kreatinin düzeyi asetilsistein grubunda daha düşüktü (1,22 mg/dL [107,8 mikromol/L]; %95 GA, 1,11-1,33 mg/dL vs 1,38 mg/dL [122,9 mikromol/L]; %95 GA, 1,27-1,49 mg /dL; P =.006) anjiyografiden sonraki ilk 48 saat içinde. Asetilsistein tedavisi, kreatinin klerensini 44,8 mL/dak'dan (0,75 mL/s) (%95 GA, 42,7-47,6 mL/dak) 58,9 mL/dak'ya (0,98 mL/s) (%95 GA, 55,6-62,3 mL/s) önemli ölçüde arttırdı. dk) kontrast uygulamasından 2 gün sonra (P<.001). Kontrol grubundaki artış anlamlı değildi (42,1'den 44,1 mL/dak'ya [0,70 ila 0,74 mL/s]; P =.15). Asetilsisteinin faydası çeşitli hasta alt grupları arasında tutarlıydı ve en az 7 gün boyunca kalıcıydı. Tedaviye bağlı önemli bir yan etki görülmedi. SONUÇ Asetilsistein, orta dereceli kronik böbrek yetmezliği olan hastaları, minimal yan etkilerle ve düşük maliyetle, koroner anjiyografik işlemlerden sonra böbrek fonksiyonlarında kontrastın neden olduğu bozulmadan korur.

4679264

Normal ve patolojik beyin gelişimi ve yaşlanma sırasında, kromatin yapısı ve fonksiyonunun epigenetik düzenleyicisi olan DNA sitozin metilasyonunun rolü belirsizliğini koruyor. Burada, yaşları 17. gebelik haftasından 104 yaşına kadar değişen 125 deneğin temporal neokorteksinde, esas olarak CNS büyümesi ve gelişimi ile ilgili genlerin 5′ CpG adalarını kapsayan 50 lokustaki DNA metilasyon durumunu MethyLight PCR ile inceledik. Kronik nörodejenerasyon (Alzheimer) veya bunun eksikliği (şizofreni) ile tanımlanan iki psikiyatrik hastalık grubu dahil edildi. Tipik olarak karşılık gelen mRNA'ların azalan seviyeleriyle birlikte 8/50 lokus (GABRA2, GAD1, HOXA1, NEUROD1, NEUROD2, PGR, STK11, SYK) için yaşam süresi boyunca DNA metilasyon seviyelerinde güçlü ve ilerici bir artış gözlemlendi. Diğer 16 lokus ise doğumdan sonraki ilk birkaç ay veya yıl içinde DNA metilasyon düzeylerinde keskin bir artışla tanımlandı. Alzheimer kohortunda hastalıkla ilişkili değişiklikler 2/50 lokusla sınırlıydı; bu, normal beyindeki yaşa bağlı değişimin hızlanmasını yansıtıyor gibi görünüyordu. Ek olarak, sıralanmış çekirdekler üzerinde yapılan metilasyon çalışmaları, çocukluktan ileri yaşlara geçiş sırasında kortikal nöronlarda çift yönlü metilasyon olaylarına dair kanıt sağladı; bu, 3'teki önemli artışlar ve 10 lokustan 1'indeki azalmayla da yansıtılıyor. Ayrıca DNMT3a de novo DNA metil transferaz, olgun korteksin III ve V katmanlarında bulunan bir nöron alt kümesi de dahil olmak üzere tüm yaşlarda eksprese edildi. Bu nedenle, DNA metilasyonu insan serebral korteksinde yaşam boyu dinamik olarak düzenlenir, farklılaşmış nöronları içerir ve ağırlıklı olarak yaşa bağlı bir artışla genlerin önemli bir bölümünü etkiler.

4680262

Obezite, yağlı karaciğer, tip 2 diyabet, kardiyovasküler hastalık ve ciddi metabolik sendrom gibi kronik hastalıklarla ilişkilidir. Obezite, karaciğer dokusunda aşırı lipit birikimi ve fibrozis gibi metabolik bozulmaların yanı sıra oksidatif stresin artmasına da neden olur. Dut yaprağı (Morus alba L.) ekstraktının (MLE) obezitenin neden olduğu oksidatif stres, lipogenez ve karaciğerdeki fibrozis üzerindeki etkisini araştırmak amacıyla, MLE yüksek yağlı diyet (HFD) ile indüklenen grupta 12 hafta boyunca sondayla verilmiştir. obez fareler. MLE tedavisi, LXRa aracılı lipogenezi ve a-düz kas aktin gibi hepatik fibroz belirteçlerini önemli ölçüde iyileştirirken, MLE, HFD ile beslenen farelerde lipoprotein lipaz gibi lipolizle ilişkili belirteçleri yukarı doğru düzenledi. Ayrıca MLE, HFD ile beslenen farelerde 4-hidroksinonenal protein seviyelerine uygun olarak hem oksijenaz-1 ve glutatyon peroksidaz dahil olmak üzere antioksidan enzimlerin aktivitelerini normalleştirdi. MLE'nin hepatik lipid metabolizmasını, fibrozisi ve antioksidan savunma sistemini düzenleyerek obezite ile ilişkili yağlı karaciğer hastalığı üzerinde yararlı etkileri vardır. MLE takviyesi, alkolsüz yağlı karaciğer hastalığı da dahil olmak üzere obezite ile ilişkili hastalıklar için potansiyel bir terapötik yaklaşım olabilir.

4687948

BAĞLAM Son hayvan çalışmaları, 3-hidroksi-3-metilglutaril koenzim A (HMG-CoA) lipid düşürücü ilaçların (statinler) kemik oluşumunu önemli ölçüde artırdığını, ancak statin kullanımının insanlarda klinik olarak anlamlı kemik oluşumuna mı yoksa kemik oluşumunda azalmaya mı yol açtığını bulmuştur. osteoporotik kırık riski bilinmemektedir. AMAÇ Statin kullanımının kalça kırığı riskinin azalmasıyla ilişkili olup olmadığını belirlemek. TASARIM Vaka kontrol çalışması. ORTAM VE HASTALAR 65 yaşında veya daha büyük olan ve Medicare ile Medicaid veya Yaşlılar ve Engelliler için Eczane Yardımı programına kayıtlı toplam 6110 New Jersey sakini. Vaka hastalarına (n=1222) 1994 yılında kalça kırığı nedeniyle cerrahi onarım uygulandı. Kontrol hastaları (n=4888) 4:1 oranında belirlendi ve vaka hastalarıyla yaş ve cinsiyet açısından frekans eşleşmesi yapıldı. ANA SONUÇ ÖLÇÜMÜ İndeks tarihinden (ameliyata en erken başvuru tarihi) 180 gün ve 3 yıl önce statin kullanımıyla kalça kırığının düzeltilmiş olasılık oranı (OR), demografik ve klinik özellikler ile sağlık hizmeti kullanımına göre ayarlanmıştır. SONUÇLAR Önceki 180 günde (düzeltilmiş OR, 0,50; %95 güven aralığı [GA], 0,33-0,76) veya önceki 3 yılda (düzeltilmiş OR, 0,57; %95 GA, 0,40-0,82) statin kullanımı, ırk, sigorta durumu, psikoaktif ilaçlar, östrojen ve tiazid kullanımı, iskemik kalp hastalığı, kanser ve diyabet gibi değişkenler kontrol edildikten sonra bile kalça kırığı riskinde önemli azalma. Statin dışı lipid düşürücü ajanların kullanımı ile kalça kırığı riski arasında anlamlı bir ilişki gözlenmedi. Kalça kırığı riskindeki azalma derecesi ile statin kullanımının kapsamı arasında açık ilişkiler gözlendi; statin dışı lipid düşürücü ajanlarla bu tür ilişkilere dair hiçbir kanıt yoktu. Önceki 3 yıldaki statin kullanımının kapsamına göre düzeltme yapıldıktan sonra, mevcut kullanım (indeks tarihinde) riskte %71'lik bir azalma ile ilişkilendirilmiştir (düzeltilmiş OR, 0,29; %95 GA, 0,10-0,81). Statin kullanımı ile kalça kırığı riski arasındaki ilişki, ilaç sayısı, Charlson komorbidite indeksi skoru, son 180 gün içinde hastaneye yatış veya bakımevinde kalış gibi değişkenler kontrol edildikten ve bakımevinde olan hastalar hariç tutulduktan sonra da devam etti endeks tarihinden önce evde olanlar veya endeks tarihinden sonraki yıl içinde ölenler. Bu alternatif model veya analizlerin hiçbirinde, statin dışı lipit düşürücü ajanların kullanımının kalça kırığı riskinde azalma ile ilişkili olduğu gözlenmedi. SONUÇLAR Bu bulgular yaşlı hastalarda statin kullanımı ile kalça kırığı riskindeki azalma arasındaki ilişkiyi desteklemektedir. Ölçülemeyen karıştırıcı faktörlerin olasılığını dışlamak için kontrollü çalışmalara ihtiyaç vardır. JAMA. 2000;283:3211-3216

4688277

Ekolojik çalışma tasarımı, sınırlamalarına rağmen epidemiyologlar tarafından rutin olarak kullanılmaktadır. Epidemiyolojik araştırmalarda tasarımın zorluklarının ne kadar iyi ele alındığı şu anda bilinmemektedir. Bu bibliyometrik incelemenin amacı, modern kesitsel ekolojik makalelerin özelliklerini, istatistiksel yöntemlerini ve sonuçlarının raporlanmasını eleştirel bir şekilde değerlendirmekti. 6 önemli epidemiyoloji dergisinde yapılan bir araştırma, 1 Ocak 2000'den bu yana yayınlanan tüm kesitsel ekolojik çalışmaları belirledi. Toplam 125 makale, dahil edilme koşullarını karşıladı ve ortak değerlendirme kriterleri aracılığıyla değerlendirildi. Önemli sayıda kesitsel ekolojik çalışmanın güvenilmez yöntemler kullandığı veya istatistiksel gözetim içerdiği bulunmuştur; Sonuçlarını yaş veya cinsiyete göre ayarlayan çoğu araştırmacı bunu yanlış yaptı (%64), istatistiksel geçerlilik regresyon modellerinin %20'si için potansiyel bir sorundu ve basit doğrusal regresyon en yaygın analitik yaklaşımdı (%31). Pek çok yazar, çalışmalarının ekolojik doğasını (%31), çalışma tasarımı seçimini (%58) ve araştırmalarının ekolojik yanlışlığa duyarlılığını (%49) tartışırken önemli bilgileri atladı. Bu sonuçlar, ekolojik çalışmalarla ilgili raporlamayı standartlaştıran uluslararası bir dizi kılavuza ihtiyaç olduğunu göstermektedir. Ek olarak, ilgili biyoistatistik literatürüne daha fazla önem verilmelidir.

4688340

ARKA PLAN Radyoterapiye direnç, baş ve boyun skuamöz hücreli karsinom (HNSCC) dahil olmak üzere kanser tedavisinde sınırlayıcı bir faktör olmaya devam etmektedir. β1 integrin ve EGFR'nin eşzamanlı hedeflemesinin, test edilen HNSCC kanser modellerinin çoğunda mono hedeflemeden daha yüksek bir radyo-hassaslaştırma potansiyeline sahip olduğu gösterilmiştir. Tümör başlatan hücrelerin (TIC) tedaviye direnç ve nüksetme açısından anahtar bir rol oynadığı ve küre oluşturma koşullarında zenginleştirilebileceği düşünüldüğünden, bu çalışma, X-ışını ışınlaması olmadan ve bununla kombinasyon halinde β1 integrin/EGFR hedeflemesinin etkinliğini araştırdı. küre oluşturan hücrelerin davranışı (SFC). YÖNTEMLER HNSCC hücre çizgileri (UTSCC15, UTSCC5, Cal33, SAS), tümör alımı için çıplak farelere deri altından enjekte edildi ve yapışkan olmayan koşullar altında birincil ve ikincil küre oluşumu için kaplandı; sırasıyla yenileme kapasitesi. Tedavi, β1 integrin (AIIB2) ve EGFR (Cetuximab) için inhibitör antikorların yanı sıra X-ışını ışınlaması (2 - 6 Gy tek doz) ile gerçekleştirildi. Ayrıca, TIC işaretleyici ekspresyonu ve hücre döngüsü için akış sitometrisinin yanı sıra DNA onarım proteini ekspresyonu ve fosforilasyon için Western blotlama kullanıldı. SONUÇLAR Diğer HNSCC hücre hatlarına göre SAS hücrelerinin birincil ve ikincil küre oluşturma kapasitesinin daha yüksek olduğunu bulduk; bu, SAS'ın UTSCC15 hücrelerine karşı tümör alım oranlarıyla uyumluydu. AIIB2 ve Cetuximab uygulamasının SFC üzerinde küçük sitotoksik ve radyosensitize edici etkileri yoktu. Şaşırtıcı bir şekilde, geçiş sonrasında hayatta kalan SFC'nin fraksiyonunu temsil eden ikincil SAS küreleri, birincil kürelerle karşılaştırıldığında büyük ölçüde gelişmiş radyo-duyarlılık gösterdi. Şaşırtıcı bir şekilde ne AIIB2 ne de Cetuximab, bazal küre oluşturma kapasitesini ve radyosensitiviteyi önemli ölçüde değiştirmedi. İkincil SAS kürelerinde G0/G1 faz hücrelerinin birikiminde artış gözlemlenirken, DNA çift sarmal kırılma onarımı, ışınlama sonrasında önemli ölçüde artan ATM ve Chk2 fosforilasyonu temelinde hiçbir fark göstermedi. SONUÇLAR HNSCC modelinde küre oluşturan koşullar, hem anti-β1 integrin hem de anti-EGFR inhibitör antikorlara duyarlı olmayan hücreleri seçer. Birincil ve ikincil küre oluşumuyla ilgili olarak verilerimiz, bu SFC fraksiyonlarının her ikisinin de β1 integrin ve EGFR'den bağımsız olarak farklı hayatta kalma stratejileri ifade ettiğini ve altta yatan mekanizmaları çözmek için tedaviden önce ve sonra SFC'nin hayatta kalmasını ve zenginleşmesini daha iyi anlamak için gelecekteki çalışmaların garanti edildiğini göstermektedir. SFC'de yeni, uyuşturulabilir kanser hedeflerini belirlemek için.

4695046

AMAÇLAR Rutin olarak uygulanan psikiyatrik anketlerin psikiyatri dışı ortamlardaki psikiyatrik bozuklukların tanınması, yönetimi ve sonuçları üzerindeki etkisini incelemek. VERİ KAYNAKLARI Embase, Medline, PsycLIT, Cinahl, Cochrane Controlled Trials Register ve önemli dergilerin elle aranması. YÖNTEMLER Psikiyatri dışı ortamlarda klinisyenlere psikiyatrik tarama ve sonuç anketlerinin uygulanması ve rutin geri bildirimi ile ilgili randomize kontrollü çalışmaların sistematik bir incelemesi. Karşılaştırılabilir çalışmaların rastgele etkili niceliksel senteziyle birlikte temel tasarım özelliklerine ve son noktalara ilişkin anlatısal genel bakış. ANA SONUÇ ÖLÇÜMLERİ Anket sonuçlarının geri bildirimi sonrasında psikiyatrik bozuklukların tanınması; psikiyatrik bozukluklara yönelik müdahaleler; ve psikiyatrik bozuklukların sonuçları. SONUÇLAR Birinci basamakta ve genel hastane ortamlarında ortak psikiyatrik araçların kullanımını inceleyen dokuz randomize çalışma belirlendi. Çalışmalar, bu araçların uygulanmasının ve ardından sonuçların klinisyenlere geri bildiriminin etkisini, geri bildirim olmadan uygulamayla karşılaştırdı. Geri bildirimin depresif bozuklukların tanınması üzerindeki etkisini ölçen bu çalışmalardan dördü (2457 katılımcı) için meta-analitik havuzlama mümkün olmuştur. Tüm hastalara (puandan bağımsız olarak) puanların rutin olarak uygulanması ve geri bildirimi, anksiyete ve depresyon gibi zihinsel bozuklukların genel tanınma oranını artırmadı (geribildirim sonrasında klinisyen tarafından depresyonun saptanması göreceli riski 0,95, %95 güven aralığı 0,83 ila 1,09) ). İki çalışma, yalnızca yüksek puan alanlar için rutin uygulamanın ardından seçici geri bildirimin depresyonun tanınma oranını arttırdığını gösterdi (geribildirimden sonra depresyonun tespit edilmesinin göreceli riski 2,64, 1,62 ila 4,31). Ancak bu artan tanınma, artan müdahale oranına dönüşmedi. Genel olarak, psikiyatrik önlemlerin rutin uygulanmasına ilişkin çalışmalar hasta sonuçları üzerinde bir etki göstermedi. SONUÇLAR Sonucun rutin ölçümü maliyetli bir uygulamadır. Psikiyatrik olmayan ortamlarda tedavi edilen psikiyatrik bozukluğu olan kişilerin psikososyal sonuçlarının iyileştirilmesinde bunun faydalı olduğunu gösteren çok az kanıt vardır.

4695107

Ucuz ve eski antibiyotiklerin kullanımını sınırlayan antibiyotik direnci sorunu, yeni antimikrobiyal bileşiklerin sürekli olarak araştırılması ihtiyacını doğurmuştur. Direnç mekanizmalarını anlamak, sorunun çözümüne yönelik stratejilerin geliştirilmesinde önemlidir. İlaçların aktif akışı, hedef bölgelerin değiştirilmesi ve enzimatik bozunmalar, patojen bakterilerin antibiyotiklere karşı içsel direnç kazanmasını veya geliştirmesini sağlayan stratejilerdir. Bakteri hücresinden yapısal olarak ilgisiz çeşitli bileşikleri tanıyabilen ve uzaklaştırabilen ve çok çeşitli antibiyotiklere direnç kazandırabilen çoklu ilaç direnci (MDR) pompaları, o zamandan beri Staphylococcus aureus, Pseudomonas gibi birçok gram pozitif ve gram negatif patojende karakterize edilmiştir. aeruginosa, Escherichia coli ve son zamanlarda mikobakterilerde. Bazı kimyasal bileşiklerin (MDR inhibitörleri veya direnç değiştirici ajanlar olarak adlandırılır), in vitro antibiyotiklerle sinerjistik olarak çalışarak bakterilerdeki direnç fenotipini değiştirme yeteneği o zamandan beri gözlemlenmiştir. İlaca dirençli enfeksiyonların tedavisinde antibiyotiklerle kombine edilebilecek bu tür bileşiklerin araştırılması, bakterilerdeki direnç sorununun aşılmasında bir alternatif olabilir. Tıbbi bitkilerin ham ekstraktları, potansiyel direnç değiştirici ajanların gerçek kaynakları olarak öne çıkıyor ve Afrika biyosferi, zengin bitki türü çeşitliliği nedeniyle bu tür bileşiklerin potansiyel bir kaynağı olmayı vaat ediyor.

4700428

ARKA PLAN Kokain arayışının nüksetmesi, prefrontal korteks (PFC) aferentlerinden sinaptik glutamat aktarımının güçlenmesine neden olan çekirdek accumbens çekirdeğindeki (NAcore) düşük glutamat ile bağlantılıdır. Sistemik N-asetilsisteinin (NAC) glutamat homeostazisini yeniden sağladığı, kokain arayışına nüksetmeyi azalttığı ve PFC-NAcore sinapslarını zayıflattığı gösterilmiştir. Burada, doğrudan NAcore'a uygulanan NAC'nin, PFC-NAcore sinapslarında nüksetme ve nörotransmisyon üzerindeki etkilerini ve ayrıca metabotropik glutamat reseptörleri 2/3 (mGluR2/3) ve 5'in (mGluR5) katılımını inceliyoruz. YÖNTEMLER Sıçanlar, 2 hafta boyunca kokaini kendi kendine uygulamak üzere eğitildi ve neslinin tükenmesinin ardından, şartlandırılmış bir işaret veya birleşik işaret ve kokain enjeksiyonu ile eski haline döndürme başlatılmadan önce sırasıyla 30 veya 120 dakika boyunca intra-akkumbens NAC veya sistemik NAC aldı. Ayrıca akut dilimlerdeki in vitro tüm hücre kayıtlarını kullanarak postsinaptik akımları kaydettik ve birincil glial kültürlerde sistin ve glutamat alımını ölçtük. SONUÇLAR NAcore'a NAC mikroenjeksiyonu, kokain arayışının yeniden başlatılmasını engelledi. Dilimlerde, düşük bir NAC konsantrasyonu, NAcore'da uyarılmış glutamaterjik sinaptik akımların genliğini mGluR2/3'e bağımlı bir şekilde azaltırken, yüksek NAC dozları, mGluR5'e bağımlı bir şekilde genliği arttırdı. Her iki etki de sistein taşıyıcıları yoluyla NAC alımına ve sistein/glutamat değiştiricinin aktivitesine bağlıydı. Son olarak, mGluR5'in bloke edilmesiyle, NAC tarafından kokain aranmasının engellenmesinin kuvvetlendirildiğini gösterdik. SONUÇLAR NAC'ın kokain arayışının nüksetmesi üzerindeki etkisi, NAcore'da mGluR2/3 ve mGluR5'in uyarılması arasındaki dengeye bağlıdır ve NAC'ın etkinliği, mGluR5'in eşzamanlı olarak inhibe edilmesiyle geliştirilebilir.

4701662

Fosfolipidler esas olarak endoplazmik retikulum (ER) ve mitokondriyal iç zarlarda sentezlendiğinden, hücrelerin belirli fosfolipidleri çeşitli hücre zarlarına doğru şekilde nasıl dağıttığı, organele özgü fosfolipit bileşimlerinin korunması için çok önemli bir sorundur. Her ne kadar ER-mitokondri karşılaşma yapısı (ERMES), ER ile mitokondri arasındaki fosfolipid transferini kolaylaştırmak için önerilmiş olsa da, ERMES'in böyle bir rolü hala tartışmalıdır ve deneysel olarak gösterilmesini beklemektedir. Burada, ER ve mitokondri arasındaki fosfolipit değişimini izlemek için izole edilmiş maya membran fraksiyonlarına sahip yeni bir in vitro tahlil sistemi geliştirdik. Bu sistemle, ER ile mitokondri arasındaki fosfolipid taşınmasının membran sağlamlığına dayandığını ancak ATP, GTP gibi enerji kaynaklarına veya mitokondri iç zarı boyunca membran potansiyeline dayanmadığını bulduk. Ayrıca, ERMES bileşeninin eksikliğinin, ER'den mitokondriye fosfatidilserin taşınmasını bozduğunu, ancak mitokondriden ER'ye fosfatidiletanolamin taşınmasını bozmadığını bulduk. Bu in vitro tahlil sistemi böylece ER ve mitokondri arasındaki veziküler olmayan fosfolipid taşınmasını analiz etmek için güçlü bir araç sunar.

4702639

Kök benzeri özelliklere sahip tümör hücreleri oldukça agresiftir ve sıklıkla ilaca direnç gösterir. Burada, integrin avβ3'ün, erlotinib gibi reseptör tirozin kinaz inhibitörlerine karşı oldukça dirençli, kök benzeri özelliklere sahip meme, akciğer ve pankreas karsinomlarının bir belirteci olarak hizmet ettiğini ortaya koyuyoruz. Bu durum in vitro olarak ve hastadan türetilmiş tümör ksenogreftlerini taşıyan farelerde veya erlotinib tedavisi sırasında ilerleme gösteren akciğer kanseri hastalarından alınan klinik örneklerde gözlenmiştir. Mekanik olarak, ligandsız durumdaki αvβ3, KRAS ve RalB'yi tümör hücresi plazma zarına alarak TBK1 ve NF-κB'nin aktivasyonuna yol açar. Aslında αvβ3 ekspresyonu ve ortaya çıkan KRAS-RalB-NF-κB yolu, tümörün başlatılması, ankraj bağımsızlığı, kendi kendini yenileme ve erlotinib direnci için hem gerekli hem de yeterliydi. Bu yolun bortezomib ile farmakolojik olarak hedeflenmesi, hem tümör kökünü hem de erlotinib direncini tersine çevirdi. Bu bulgular sadece αvβ3'ü karsinom köklüğünün bir belirteci/sürücüsü olarak tanımlamakla kalmıyor, aynı zamanda bu tür tümörleri RTK inhibisyonuna duyarlı hale getirmeye yönelik terapötik bir stratejiyi de ortaya koyuyor.